周培
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：上海市科委纳米专项基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2007年
- 赋有许多独特性能的天然蛋白质纤维——蜘蛛丝在生物医学、材料和军事等领域具有广泛的应用前景，但惟有通过基因工程手段才能大量获取。根据已报道的蜘蛛丝蛋白的氨基酸序列，结合蜘蛛丝蛋白的模块结构特性和功能的关系，优化设计并人工合成了全长为429bp的蜘蛛丝蛋白基因SPS。将该基因克隆到质粒pET-32a中，构建成表达载体pET-SPS1，并进一步构建了它的多个串联体表达载体pET—SPS（2～8）。所有表达载体在大肠杆菌BL21（DE3）中进行了诱导表达，重组蜘蛛丝蛋白得到了纯化。结果表明，合成的蜘蛛丝蛋白基因与预期一致，融合表达的蜘蛛丝蛋白几乎全部可溶。其中，1—3串联体蜘蛛丝蛋白基因能够有效表达，但随着串联数的进一步增加，蜘蛛丝蛋白基因融合表达效率下降，初步探讨了下降的可能原因。
- 周培邹竹荣曹丽娟苏裕
- 关键词：蜘蛛丝蛋白基因合成串联体蛋白质表达大肠杆菌
- 蜘蛛丝蛋白的模块结构性能和重组表达
- 2008年
- 蜘蛛丝是一类天然蛋白质纤维,具有独特的机械性能(高强度、高弹性和高断裂功等)和卓著的生物学特性(生物可降解性和与生物组织的相容性等),在生物医学、材料、纺织和军事等领域都有着很高的潜在应用价值。综述了不同蜘蛛丝蛋白的模块结构特征及与其功能的关系,扼要介绍了目前利用各种基因工程方法表达重组蜘蛛丝蛋白的研究进展。
- 周培邹竹荣曹丽娟苏裕
- 关键词：蜘蛛丝蛋白
- 人脂联素在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：1
- 2010年
- 为了提高重组人脂联素在大肠杆菌中的可溶性,构建和表达了增溶标签与人脂联素的融合表达载体.这些标签包括大肠杆菌硫氧还蛋白和NusA蛋白、酿酒酵母SUMO蛋白和噬热海洋菌Thermotoga maritime的红素氧还蛋白.结果显示,所有的人脂联素融合蛋白在大肠杆菌中都获得了高水平的表达,但可溶性存在很大差异,说明不同融合标签对人脂联素可溶性表达的促进作用不同.其中,红素氧还蛋白与SUMO蛋白组合一起对人脂联素可溶性的增强作用最为显著,其相应的融合蛋白几乎全部可溶.另外,通过酵母SUMO/Ulp1反应,经His标签亲和层析纯化得到的人脂联素融合蛋白能被有效酶切,加工为人脂联素成熟肽产物.
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- 关键词：大肠杆菌可溶性表达
