吴高德
- 作品数：13 被引量：69H指数：4
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生航空宇航科学技术理学更多>>
- HPLC在线二阶微分光谱法检测基因工程产品的C-端肽被引量：2
- 1995年
- 遗传工程重组蛋白质N-端序列和C-端序列分析是鉴定其结构特征的2项重要的指标.N-端的序列分析即采用经典的Edman方法,在商品化的仪器上自动分析50个以内的N-端氨基酸残基,已经是一种常规方法,近年来技术发展可以通过SDS-PAGE电泳印迹到PVDF膜上,在膜上直接分析蛋白的N-端序列,不但可以用来测定产品的顺序,而且为检验基因工程培养物是否与预期表达产物相吻合提供了一个相当简便的方法.
- 张丽华屠红旻邵晓霞吴高德徐来根夏其昌
- 关键词：基因工程HPLC
- 基因工程产品的质控和蛋白质组研究
- 夏其昌曾嵘宋金芳邵晓霞徐来根吴高德
- 根据基因工程目标产品质量监控要求，建立了各种基因工程药物的切实可行的蛋白质质检方法和引进国际先进新技术。另建立蛋白质变体的分析方法。此外建立了高分辨的双向电泳和质谱鉴定识别胶上的蛋白质点，即蛋白质组工作，不但丰富和提高了...
- 关键词：
- 关键词：质控蛋白质组
- 模式蛋白分离用的A3-2型空间连续自由流电泳仪
- 2005年
- 目的研究空间微重力环境对电泳分离的影响,证实自主研制的A3-2型电泳仪的设计和工艺,为我国空间电泳研究的发展和生物材料加工及空间制药奠定基础。方法用A3-2型连续自由流电泳仪,分别在地面和空间对细胞色素C和牛血红蛋白两种模式蛋白进行电泳分离实验,对其结果进行分析比较。结果电泳仪在“神舟”4号飞船上成功地进行了空间电泳分离实验,并获得了完整的飞行试验数据。返回舱着陆后,回收的电泳仪装置完好无损,得到了全部(30管)分离产物。结论在线光电检测及分离产物的检测结果都说明,空间微重力环境下的电泳分离效果明显优于地面的结果。飞行试验表明,A3-2电泳仪的结构设计和工艺是正确和可行的,它为我国首次进行的空间电泳分离实验取得圆满成功提供了保障。
- 吴汉基蒋远大刘文喜张志远冯学章夏其昌丁士健吴高德李钦
- 关键词：飞船微重力飞行试验
- 人肝癌细胞系BEL-7404和正常肝细胞系L-02表达的蛋白质组双向凝胶电泳分析被引量：41
- 2000年
- 蛋白质组分析技术已在生物科学各领域被广泛应用，也是功能基因组研究的重要组成部分．通过对人ＢＥＬ－７４０４肝癌细胞系和Ｌ－０２正常肝细胞系表达的蛋白质组ＩＰＧ－ＤＡＬＴ双向凝胶电泳和图象分析，发现７个蛋白点只在肝癌细胞中检测到表达，１４个点只在肝细胞中检测到表达，７８个蛋白点在两种细胞中表达量上有显著变化（Ｐ＜０．０１）．两种细胞蛋白质组表达反映在差异表达谱上．双向电泳重复性分析表明 ＩＥＦ方向平均位置偏差为０．７３ ｍｍ， ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方向为０．４４ｍｍ，量的变异为１７．６％一１９．２％．双向电泳的重复性已适合于蛋白质组差异表达的研究，蛋白质组差异表达谱可成为疾病诊断、药物作用分析和生命过程等研究的有用工具．
- 俞利荣王楠吴高德徐永华夏其昌
- 关键词：蛋白质组双向凝胶电泳肝癌细胞
- HPLC无孔径载体柱用于快速分离蛋白质和多肽被引量：7
- 1995年
- 介绍了一种新型的高效液相色谱柱（无孔径载体柱）的结构特点及其在蛋白质、多肽及遗传工程产品分析中的应用。在相同的洗脱条件下，与常规柱相比，无孔径载体柱高效、快速，特别是它能分离分子量较大和疏水性较强的蛋白质。此外，就无孔径载体柱在使用过程中对仪器的要求作了阐述，还讨论了温度对柱效的影响以及灵敏度与梯度时间的关系等。
- 张丽华屠红吴高德夏其昌
- 关键词：蛋白多肽HPLC
- 新型人白细胞介素-2突变点的分析鉴定
- 1992年
- 对新型人白细胞介素-2(IL-2-Ser-125)进行了精制和纯度指标的鉴定。蛋白质N端序列分析表明产品中1/3部分N端缺失Met,这种微观不均一性在等电聚焦和毛细管电泳中有所反映。此外,对新型人IL-2的含点突变残基的多肽进行氨基酸序列分析,证实确由Cys-125突变成Ser。
- 吴高德屠红旻邵晓霞徐来根夏其昌
- 关键词：点突变分析白细胞介素2
- 重组人γ干扰素的C端不均一性被引量：1
- 1992年
- 王海波徐来根吴高德夏其昌
- 关键词：Γ干扰素C端不均一性肽谱
- HPLC在线二阶微分光谱法检测人表皮生长因子的C－端肽
- 1995年
- Ｔｒｐ（色氨酸）与Ｔｙｒ（酪氨酸）二阶微分光谱能被用来在线检测ＲＰ－ＨＰＬＣ（反相高效液相色谱）中含芳香族氨基酸的肽段，这些特征光谱是通过二极管矩阵检测器（ＤＡＤ）得到的，用这种方法分析人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）的胰蛋白酶酶解图谱，能鉴别出含Ｔｒｐ的Ｃ－端肽。
- 张丽华屠红吴高德徐来根夏其昌
- 关键词：人表皮生长因子
- 连续自由流电泳微重力下分离模式蛋白质的研究被引量：4
- 2004年
- 以连续自由流电泳的区带电泳模式分离血红蛋白和细胞色素C,比较了不同缓冲液甘油浓度下的分离效果,确定了最终装载在神舟4号飞船上A3-2型电泳仪的电泳分离条件,通过地面和空间实验,初步探讨了微重力对连续自由流电泳分离的影响,并对电泳的分离产物做了多种检测。
- 丁士健刘韬宋金芳吴高德邵晓霞夏其昌吴汉基蒋远大张志远刘文喜冯学章马玉立李钦
- 关键词：微重力蛋白质血红蛋白细胞色素C
- 基因工程人γ干扰素C端的结构分析及功能作用被引量：10
- 1994年
- 基因工程人γ干扰素经溴化氰裂解后进行ＨＰＬＣ分析，发现Ｃ端肽缺失。毛细胞管电泳及氨基酸序列定量分析结果进一步指出，其Ｃ端不仅缺失，而且不均一，分别以Ｌｙｓ－１２５，Ｌｙｓ－１２８和Ｌｙｓ－１３０为末。用ＷＩＳＨ／ＶＳＶ系统测定其抗病毒效价，比活性为３×１０＾７ＩＵ／ｍｇ，说明其Ｃ端缺失１３－１８个氨基酸残基时并不影响活性。本文还讨论了Ｃ端断裂的可能原因。
- 王海波徐来根吴高德夏其昌应国光王兴娟童葵塘
- 关键词：基因工程Γ干扰素肽谱
