吴雪梅
- 作品数：7 被引量：27H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 17-β-雌二醇对大鼠垂本前叶细胞转化生长因子基因表达的影响被引量：2
- 1998年
- 实验采用无血清原代培养大鼠垂体前叶细胞及原位杂交方法，观察了不同剂量（１０１０、１０８和１０６ｍｏｌ／Ｌ）的１７β雌二醇（ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，Ｅ２）对大鼠垂体前叶细胞转化生长因子α（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒα，ＴＧＦα）和转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）基因表达的影响。结果表明：１０１０ｍｏｌ／ＬＥ２作用２４ｈ后，对两种生长因子的表达均无显著影响；而１０８ｍｏｌ／Ｌ和１０６ｍｏｌ／ＬＥ２则显著升高ＴＧＦαｍＲＮＡ，分别为对照组的１５倍和１６倍（ｐ＜０００１）；同时明显降低ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ，使ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ水平分别降低为对照组的７０％和５５％（ｐ＜０００１）。说明一定浓度的Ｅ２对正常大鼠垂体前叶细胞ＴＧＦα和ＴＧＦβ１基因表达有明显影响，提示这两种生长因子可能以自分泌／旁分泌机制。
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- 关键词：原位杂交17-Β-雌二醇
- 雌二醇对大鼠垂体前叶细胞增殖的影响及其机制的初步探讨被引量：1
- 1997年
- 观察了17-β羟雌二醇（17-β-estradiol，E2）及其代谢产物2-羟雌酮（2-hydroxyestrone，2－OHE1）、2-羟雌二醇（2－hydroxyestradiol，2－OHE2）和多巴胺（dopamine，DA）受体激动剂piribedil对大鼠垂体前叶细胞（aneriorpituitarycells，APC）增殖的影响。结果表明：E2（10－6mol/L）可促进APC生长，A10－5mol/L的piribedil却可抑制APC的增殖活性。提前12h加入E2或2－OHE2、2－OHE2可抑制piribedil的效应，但E2对piribedil效应无明显影响。
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- 关键词：PIRIBEDIL
- 褪黑素抑制促甲状腺释放激素刺激乳鼠垂体前叶细胞催乳素基因的表达被引量：9
- 1997年
- 褪黑素（melatonin，MEL）主要由松果腺分泌，它是一种吲哚类激素，其功能之一能抑制下丘脑的促性腺释放激素和垂体前叶的促性腺激素。本工作利用原位杂交方法，观察了MEL对促甲状腺释放激素（thyrotropinreleasinghormone，TRH）兴奋垂体前叶激素-催乳素（prolactin，PRL）表达的影响。结果表明，在一定浓度范围内，MEL不但可抑制TRH刺激PRL基因表达的效应，还可直接抑制垂体前叶细胞PRL基因的表达。这为进一步探讨在体条件下MEL对PRL合成与分泌的调节，提供了实验依据。
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- 关键词：褪黑素促甲状腺激素释放激素
- 异体垂体移植大鼠E_2诱致催乳素瘤的实验研究被引量：6
- 1998年
- 目的 探讨催乳素瘤的发病机理,验证其原发于腺垂体的假说。方法 应用雄性S.D.大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋植17-β-雌二醇(E_2)药泵,观察E_2对大鼠原位垂体,异体移植于肾囊的垂体及血浆催乳素(prolactin,PRL)水平的影响。并利用上述垂体细胞原代培养及原位杂交组化方法,研究经E_2作用120d后的原位及移植垂体细胞中PRL基因表达水平的改变。结果 经E_2作用60d及120d后,大鼠体重分别降至正常大鼠的74%(P<0.01)和50%(P<0.001),原位垂体及移植垂体的重量则较对照组增加达三倍以上(P<0.001),并伴高催乳素血症,血浆催乳素水平为对照组的100～200倍(P<0.001)。原位杂交结果表明,E_2作用120d后,原位及移植垂体细胞中PRL mRNA水平分别升高为正常大鼠垂体细胞的3.1倍和3.5倍(P<0.001),且二者的表达水平无显著差异。结论 提示E_2也可不经下丘脑机制直接作用于腺垂体水平诱发催乳素瘤,即催乳素瘤有可能原发于腺垂体。但本工作尚未进一步排除催乳素瘤的形成涉及下丘脑机制的可能性。
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- 关键词：催乳素瘤垂体移植原位杂交病理学
- 垂体催乳素瘤的病因及发病机制的实验研究被引量：3
- 2000年
- 应用在同一只雄性SD大鼠中,保留原位垂体并在肾囊内植入一异体垂体,同时背部埋植装有17β雌二醇(17βestradiol,E2)的药泵,经E2在体作用60～120天后,其原位垂体和异体移植入肾囊的垂体同时形成垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,研究PRL瘤的发病机制。结果表明,E2长期作用可诱发原位垂体和远离下丘脑的移植垂体同时形成PRL瘤,并伴高PRL血症和PRL基因的高表达;体外和体内实验结果均显示,一些相关生长因子或细胞因子可能与PRL瘤的形成有关;分析正常垂体、原位和移植垂体瘤中PRL基因调控序列的结构,表明在原位垂体瘤中PRL基因近端启动子区发生点突变,突变启动子活性增高,而移植垂体瘤PRL基因相应序列无改变。上述结果提示:垂体PRL瘤可能原发于腺垂体水平,但未排除继发于下丘脑异常的另一可能性;雌激素诱发原位和移植垂体形成PRL瘤的发病机制可能不尽相同;体内神经内分泌免疫网络在原位垂体PRL瘤的发生过程可能起一定作用,但其确切证据尚待深入探讨。
- 吴雪梅
- 关键词：17-Β-雌二醇垂体催乳素瘤病因发病机制
- 生长因子和雌激素对大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素基因表达的影响被引量：4
- 1999年
- 目的观察外源性生长因子和雌激素对离体正常大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）基因表达的影响，并探讨生长因子与雌激素作用的关系。方法应用无血清原代培养的大鼠垂体前叶细胞，分别采用荧光染色细胞ＤＮＡ的激光扫描共聚焦显微镜（ｌａｓｅｒｓｃａｎｎｉｎｇｃｏｎｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＬＳＣＭ）扫描、以及原位杂交方法，观察１７－β－雌二醇（ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，Ｅ２）、表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈ ｆａｃ－ｔｏｒ，ＥＧＦ）及转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）对大鼠垂体前叶细胞增殖活性和催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）基因表达的影响。结果生长因子或雌激素作用３６ｈ后，Ｅ２和ＥＧＦ单独作用组细胞ＤＮＡ含量和ＰＲＬｍＲＮＡ含量均较正常对照组明显升高（Ｐ＜０．００１）；两者共同作用上述效应更为显著，高于Ｅ２和ＥＧＦ单独作用组（Ｐ＜０．０１）。ＴＧＦβ１对细胞增殖与ＰＲＬ基因表达均有抑制作用（Ｐ＜０．００１）；而与Ｅ２共同作用时细胞内ＤＮＡ含量和ＰＲＬｍＲＮＡ水平显著高于ＴＧＦβ１单独作用组（Ｐ＜０．００１），但仍低于Ｅ２单独作?
- 吴雪梅张荣狄安稞单惠敏黄曼影许荣焜
- 关键词：雌二醇增殖活性催乳素
- 大鼠催乳素基因真核细胞可表达性质粒的构建及应用研究被引量：8
- 1998年
- ７３５ｂｐ的ＰＲＬｃＤＮＡ片段从质粒ＰＲＬ－ＳＰ６５＃１中回收后，用粘性末端连接法将其重组到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上，筛选出正向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ和反向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＡＳ。将重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬｓ和空载体ｐｃＤＮＡ３分别转入ＮＩＨ３Ｔ３细胞系，用Ｇ４１８筛选出阳性细胞后与未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２的情况下，用原位杂交的方法，分别用ＰＲＬｃＤＮＡ探针和原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓｃＤＮＡ探针进行检测，未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２时都几乎无催乳素基因的表达，同样，转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞也无ＰＲＬ的表达，而转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ的ＮＩＨ３Ｔ３细胞则有大量的ＰＲＬ基因的表达，与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。正常和转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞有一定程度的原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓ的表达，当分别加入Ｅ２和转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ后，ＮＩＨ３Ｔ３细胞中的ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因表达水平都显著升高（Ｐ＜０．０５）。
- 周远征单慧敏黄曼影吴雪梅狄安稞
- 关键词：催乳素基因DNA重组质粒原癌基因催乳素瘤
