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一种快速生长的甘蓝型油菜DH系的获得和鉴定被引量：1: 2009年; 从快速生长的甘蓝型油菜的小孢子培养中共获得23个再生植株。经倍性鉴定,其中自发加倍成二倍体的有10株,单倍体13株。单倍体再用秋水仙碱处理后获得DH系,所得材料对油菜功能基因组学的研究可能有一定的价值。; 吴磊吴冕Karin Sonntag王幼平; 关键词：甘蓝型油菜小孢子培养 DH系

两种抗病基因双T-DNA区双元载体的构建被引量：1: 2010年; 选择标记基因的删除是植物转基因工程中重要的步骤之一,双T-DNA区双元载体转化法以其共整合频率高、删除标记基因效率高的优点在植物遗传转化中应用非常广泛。本文通过构建天麻抗真菌蛋白基因、脂质转移蛋白基因双T-DNA区双元载体,为培育不含选择标记基因的抗病新材料奠定基础。通过PCR的方法克隆GAFP基因,产物纯化测序确定序列准确后与pSB130-35S载体进行BamHⅠ、SacⅠ双酶切;pCAMBIA2300-LTP、pSB130-35S经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,酶切产物纯化后连接,连接产物转化大肠杆菌。采用基因特异性引物进行菌液PCR鉴定阳性克隆,重组质粒pSB130-GAFP、pSB130-LTP双酶切产物大小分别为540bp、1200bp,与预期产物大小一致,pSB130-GAFP、pSB130-LTP双T-DNA区双元载体构建成功。载体pSB130-GAFP、pSB130-LTP转化根癌农杆菌后可以直接用于植物的遗传转化。; 吴磊史秀岚田巍刘巧泉王幼平; 关键词：双元载体天麻抗真菌蛋白基因

利用原位杂交及CAPS标记分析芸薹属A、B和C基因组间的关系被引量：15: 2008年; 以来源于Brassica rapa基因组(AA)的重复序列(151bp)为探针,分别同二倍体白菜型油菜(AA,2n=20)、甘蓝(CC,2n=18)和异源四倍体芥菜型油菜(AABB,2n=36)的中期染色体杂交,白菜型油菜和甘蓝的所有染色体上都有杂交信号,芥菜型油菜的染色体上显示出20个明显的信号,其余染色体上信号很弱或无,可以区分出A和B基因组。对来源于油菜3个基本种与3个复合种FAE1基因进行CAPS分析表明,3个基本种表现出不同的酶切式样,用MboI和MspI酶切表现出多态性,基因组A和C非常相似,而基因组B与A、C关系较远,同时3个复合种也并不是2个基本种的简单相加,表明异源四倍体在长期进化过程中可能发生了重排和重组。; 孔芳蒋金金吴磊王幼平; 关键词：芸薹属荧光原位杂交 CAPS标记亲缘关系

T-DNA插入突变体导致甘蓝型油菜种子脂肪酸含量的变化: 本文通过农杆菌介导方法将双元载体pCambia2031转化快速生长型甘蓝型油菜,收获的T0代种子及T1代植株经PCR鉴定和遗传分析,获得单拷贝的纯合的T-DNA插入突变体51株。对T-DNA插入突变体T2代种子进行了脂肪...; 吴磊刘银李伟Eicke Rudloff王幼平; 关键词：甘蓝型油菜 T-DNA插入突变体脂肪酸含量; 文献传递

油菜叶片总蛋白质双向电泳样品制备方法的改进被引量：9: 2010年; 以甘蓝型油菜"扬油6号"的叶片为试验材料,分别采用传统的TCA/Acetone(三氯乙酸/丙酮沉淀法)和改进的PEG(polyethylene glycol)分步提取法提取叶片可溶性总蛋白,并利用条件一致的蛋白质双向电泳体系进行比较。TCA/Acetone法提取的蛋白质双向电泳图谱背景中由于高丰度"housekeeping"结构蛋白的存在,特别是叶片中参与光合作用的Rubisco蛋白的干扰,图谱中低丰度调控蛋白受到了高度覆盖和遮蔽现象,影响双向电泳图谱的质量。而PEG分步提取法提取的蛋白质样品,可以剔除Rubisco蛋白,使获得的双向电泳图谱清晰,无斑点间的遮蔽现象,为油菜叶片蛋白质组定量和定性分析提供了丰富的信息。; 孔芳蒋金金吴磊葛才林王幼平; 关键词：油菜双向电泳

芸薹属种子贮藏蛋白质组分的比较研究被引量：5: 2010年; 对组成芸薹属3个基本种和3个复合种的种子贮藏蛋白亚基组成进行了SDS-PAGE比较分析,结果表明:不同种间的种子贮藏蛋白具有一定的差异,表现出丰富的多态性;6个种共有24条亚基带,并各自具有特征蛋白谱带。利用贮藏蛋白亚基条带的信息,分析了种间的蛋白相似度,并进行了聚类分析。供试材料分为两类:Ⅰ类为白菜型油菜、甘蓝与甘蓝型油菜;Ⅱ类为黑芥、芥菜型油菜和埃塞俄比亚芥。; 孔芳蒋金金吴磊葛才林王幼平; 关键词：芸薹属种子贮藏蛋白 SDS-PAGE 亲缘关系

T-DNA插入突变体导致甘蓝型油菜种子脂肪酸含量的变化: 本文通过农杆菌介导方法将双元载体p Cambia2031转化快速生长型甘蓝型油菜,收获的T0代种子及T1代植株经PCR鉴定和遗传分析,获得单拷贝的纯合的T-DNA插入突变体51株。对T-DNA插入突变体T2代种子进行了脂...; 吴磊刘银李伟Eicke Rudloff王幼平; 关键词：甘蓝型油菜 T-DNA插入突变体脂肪酸含量

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吴磊