吴瑜
- 作品数：18 被引量：56H指数：5
- 供职机构：中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 我国血液制品中人细小病毒B19污染情况及基因型的初步研究被引量：4
- 2009年
- 目的分析我国血液制品凝血因子Ⅷ及原料血浆中人B19病毒污染情况及B19病毒的基因型。方法以B19病毒VP1／VP2区引物采用套式PCR法分别检测16批凝血因子Ⅷ成品及10批混合原料血浆中B19病毒的污染情况，并对阳性样品中B19病毒DNA的NS1-VPlu区进行测序和基因型分析。结果16批凝血因子Ⅷ中B19病毒DNA阳性率为75％（12／16），10批混合原料血浆中B19病毒DNA阳性率为100％（10／10）。序列测定结果表明，所有B19阳性样品中的病毒序列高度保守，同源性为98．3％～100％，且均为基因型Ⅰ型。结论我国凝血因子Ⅷ及原料血浆中B19病毒Ⅰ型污染率高，病毒核苷酸具有较高的保守性。
- 吴瑜耿彦生王菁舟张勇朝赵晨燕孟淑芳李德富
- 关键词：人细小病毒B19基因型
- ELISPOT,MHC肽五聚体和ICCD三种检测特异性细胞免疫应答方法的比较研究被引量：7
- 2006年
- 目的比较三种特异性细胞免疫应答的检测方法,寻求一种简便、重复性好、易于质控的评价疫苗细胞免疫的检测方法。方法采用HIVDNA疫苗肌内注射BALB/c小鼠,第6周用艾滋病重组MVA痘苗病毒腹腔注射加强免疫,于第10天制备脾脏细胞悬液,并用酶联免疫斑点法(Enzyme-Linked Immune Spot,ELISPOT)、MHC肽五聚体法和胞内细胞因子染色分析法(Intra-cellular cytokinedetection,ICCD)分别检测细胞免疫应答。结果ELISPOT、MHC肽五聚体染色以及胞内细胞因子染色分析法检测疫苗组细胞免疫应答的阳性率分别为5/5、4/5和3/5;而且ELISPOT和MHC肽五聚体染色法之间有一定相关性(r=0.647),而ELISPOT和胞内因子染色法之间以及MHC肽五聚体染色和胞内因子染色之间无相关性。结论ELISPOT试验操作相对简单,灵敏度高、重复性好,是评价疫苗细胞免疫的有效方法。
- 张春涛刘春雨吴瑜赵晨燕王佑春
- 关键词：免疫酶技术
- 抗青霉素单克隆抗体的制备及其应用研究
- 青霉素类抗生素因其高效、低毒的特点在临床上得到广泛应用，但较高的过敏反应率也在一定程度上限制了它的使用。随着免疫学和分析技术的不断发展，人们逐渐认识到临床上引起过敏的过敏原并非青霉素本身，主要是生产中产生的外源性杂质青霉...
- 吴瑜
- 关键词：青霉素单克隆抗体双抗体夹心ELISA竞争ELISA
- 文献传递
- 抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用
- 目的：制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法，对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究。
方法：将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠，应用杂交瘤技术建立...
- 吴瑜孟淑芳胡昌勤金少鸿
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA过敏反应
- 文献传递
- 半抗原免疫分析研究进展被引量：15
- 2007年
- 随着免疫分析技术的发展,对具有反应原性而无免疫原性的半抗原的检测技术得到了不断发展,广泛应用在生物医学、药物残留检测等方面。本文即对半抗原的结构特点、载体的选择、偶联方法以及在酶联免疫吸附试验、胶体金层析技术方面的应用进展进行综述。
- 吴瑜胡昌勤金少鸿
- 关键词：半抗原抗体免疫分析
- STR图谱分析法鉴别人源细胞交叉污染被引量：5
- 2010年
- 目的采用STR图谱分析法鉴别人源细胞交叉污染。方法采用PCR-毛细管电泳分析方法,分别检测人源、猴源及鼠源细胞以及人源细胞交叉污染模型的16个STR位点,分析STR图谱法用于细胞交叉污染检测的可行性。并对来自不同生物制品生产单位的27株生产用细胞及5株组织工程医疗产品用细胞进行STR图谱分析。结果STR图谱分析方法具有人源细胞特异性,猴源细胞及鼠源细胞不产生特征性图谱。此方法可以对形态相似或不相似的人源细胞交叉污染模型进行明确鉴别。采用此方法检测的27株生物制品生产用人源细胞未发现有交叉污染现象,而5株组织工程医疗产品用细胞中,发现有2株为非单个个体的混合细胞。结论STR图谱分析法具有高特异性,可用于人源细胞间交叉污染或细胞个体来源的鉴别。
- 吴瑜冯建平林林吴雪伶孟淑芳王佑春李德富
- 关键词：组织工程产品交叉污染
- STR图谱分析方法用于细胞库中人源细胞的鉴别研究
- 目的：采用STR图谱分析的方法，建立本单位细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱，并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。
方法：采用16个位点的STR图谱分析方法，检测本单位细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的...
- 吴雪伶冯建平吴瑜樊金萍孟淑芳李德富
- 关键词：细胞鉴别基因序列细胞库
- 文献传递
- STR图谱用于生物制品生产用人源细胞鉴别的研究被引量：10
- 2009年
- 目的研究短串联重复序列（STR）图谱鉴别方法在生物制品生产用人源细胞质量控制中的应用。方法采用PCR一毛细管电泳分析方法，分别建立检测9个和16个人STIR位点的方法鉴别人源细胞，并对来自不同生物制品生产单位、不同传代水平的病毒性疫苗生产用人二倍体细胞株及基因治疗制品生产用的293细胞进行STR图谱的检测和比较。结果建立人源细胞株的STR图谱分析方法。13个单位提供的病毒疫苗生产用21株人二倍体细胞中，除1株细胞并非MRC-5细胞外，其他细胞均可认定为本细胞，且未发现交叉污染现象。而8个单位提供的12株基因治疗用293细胞的STIR图谱则存在明显差异，提示该类细胞可能存在来源、基因修饰改造背景不清及传代过程中遗传特性不稳定的因素。结论STR图谱分析灵敏度高、特异性强，可用于生产用人源细胞株／系间的鉴别。
- 孟淑芳吴瑜冯建平吴雪伶王佑春李德富
- 关键词：细胞鉴别人二倍体细胞293细胞
- STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究被引量：5
- 2010年
- 目的采用短串联重复序列（STR）图谱分析的方法，建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱，并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。方法采用16个位点的STR图谱分析方法，检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞，并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对，分析细胞的正确性及交叉污染情况。对未检出信号的细胞株，采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别。结果被检测的61株细胞中，41株细胞呈现特征性STR图谱，不存在与其他细胞的交叉污染现象，其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致，5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同，可判定为正确细胞；7株细胞尚无国际可比对数据，但STR图谱特异，可认定为新建细胞。11株细胞（占18．0％）被鉴定为错误的细胞，其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC（现更名为FHCC98）的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致；2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同；4株细胞未检测到信号，同工酶结果显示均为鼠源细胞；同时还发现2株细胞为交叉污染细胞。结论细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重，正确鉴别细胞，特别是对国内自建细胞重新鉴定，对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要。
- 吴雪伶冯建平吴瑜樊金萍孟淑芳李德富
- 关键词：细胞鉴别交叉污染
- 抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用被引量：4
- 2007年
- 目的:制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法,对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究。方法:将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株。常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定。通过对不同抗体组合的分析和条件的优化,建立检测过敏原的双抗体夹心ELISA方法。结果:经细胞融合、筛选及克隆化,共获得9株稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株,其中5株亲和力较高。建立了双抗体夹心ELISA相对定量检测方法,该方法灵敏度达到870 U/L,平均回收率为107.81%,批内变异系数平均为6.7%,批间变异系数平均为9.3%,可用于A群链球菌制剂中青霉噻唑蛋白的检测。结论:成功地制备了抗青霉素的mAb,并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法。
- 吴瑜孟淑芳胡昌勤金少鸿
- 关键词：青霉素单克隆抗体
