吴庆刚 作品数:24 被引量:52 H指数:4 供职机构: 无锡市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 卫生部科学研究基金 江苏省自然科学基金 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 环境科学与工程 轻工技术与工程 更多>>
尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA基因的克隆和序列分析 2008年 目的比较尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA与相关序列的差异,明确是否为未知的基因型。方法采用PCR扩增、基因克隆与测序分析方法,分别对UPEC4030株papA进行基因与氨基酸序列分析,并与相关序列进行比较。结果UPEC4030papA由722个碱基对组成,编码192个氨基酸的多肽。与10个基因型UPECpapA核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较,结果分别为36.11%~77.95%和22.20%~78.34%;与papA基因分型多重PCR引物序列比较,下游分型引物在UPEC4030papA相应位置上的序列同源性只有10%~66.67%,推测该菌株papA为未知的基因型。结论UPEC4030papA为未知的基因型,相关致病机制和流行病学意义值得深入研究。 吴庆刚 张敬平 赵春城 诸建国 钮伟民 陈锦英 尤凤兴 姜永关键词:尿道致病性大肠埃希菌 基因测序 一株未知黏附基因型的尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株的基因分析 被引量:1 2008年 目的比较尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papG和papA基因与相关序列的差异,以明确UPEC4030 papA基因变异情况及与papG的组合形式,确定是否为未知基因型。方法采用基因克隆测序方法,分别对UPEC4030株papG和papA基因进行序列分析,并与相关序列进行比较。结果UPEC4030 papA由722个碱基对组成,编码192个氨基酸的多肽。与10个基因型UPEC papA核苷酸序列和推导的氨基酸序列同源性比较,分别为36.11%~77.95%和22.20%~78.34%;与papA基因分型多重PCR引物序列比较,下游分型引物在UPECA030 papA相应位置上的序列同源性只有10.00%~66.67%,表明该菌株papA确实为未知的基因型。UPECA030菌株papG全基因片段由1100个碱基组成,编码337个氨基酸的多肽,其核苷酸及推导的氨基酸序列与Ⅱ型papG代表株UPECIA2相比较,同源性分别为99.00%和99.11%,表明UPEC4030 papG属于Ⅱ型。结论UPEC4030 papA为未知的基因型,其papG属于Ⅱ型。 吴庆刚 张敬平 陈锦英 郑明寰 尤凤兴 姜永关键词:尿道致病性大肠埃希菌 基因测序 45株尿道致病性大肠埃希菌papA和papG基因分型研究 2008年 大肠埃希菌是尿路感染的主要致病菌,其中85%以上的菌株具有P菌毛,后者可特异性黏附、定植入泌尿道上皮细胞引起尿道上行性感染,这类菌称为尿道致病性大肠埃希菌(Uropathogenic E.coli,UPEC)。P菌毛尖端PapG黏附素是UPEC黏附定植尿道的关键因子,PapG依其受体结合特异性不同分为Ⅰ、Ⅱ型。P菌毛蛋白总量的99.9%是PapA(F抗原),是UPEC血清学分型的基础,现共发现11个血清型, 张敬平 吴庆刚 陈锦英 郑明寰 钮伟民 尤凤兴 姜永关键词:尿道致病性大肠埃希菌 基因分型 微量元素锌对小鼠免疫功能影响的初探 吴庆刚产毒微囊藻mcyA基因荧光定量PCR方法的建立 被引量:4 2011年 针对微囊藻毒素合成酶基因mcyA探索一种适用于自然水样中微囊藻毒素产毒潜能检测的TaqMan实时荧光定量PCR方法。该方法从铜绿微囊藻FACHB-1279中的mcyA基因中扩增出目的基因片段,用TA克隆方法将基因片段插入Allel TA vector(ABP-CE-TAVEC020)中来制备质粒标准品。通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了mcyA基因的标准曲线,该法构建的标准曲线相关系数高达0.998 3,满足实时荧光定量RT-PCR的要求。该方法检测所需水样少(仅200μL),具有水样基因组提取操作简便、快速、线性范围广、灵敏度高等优点,能应用于水库、湖泊等水源中具有产毒性能的微囊藻的快速定量检测。 何恩奇 钮伟民 吴庆刚 周伟杰 晏丽 张银志 孙秀兰关键词:铜绿微囊藻 水样 食品安全关键检测技术研究与应用 张敬平 钮伟民 孙秀兰 黄飚 吴家林 吴庆刚 肖勇 刘文卫 戴军 赵晓联 凌霞 本项目属于预防医学与公共卫生领域,涉及卫生检验学、食品毒理学的基础与应用研究。项目以病原生物学、分析化学、免疫学、生物化学和分子生物学等前沿检测分析手段为基础,针对食品中病原微生物、生物毒素、违禁化学品、农药和兽药残留、...关键词:关键词:食品安全 食品检测 农药残留检测 转基因产品检测 液相色谱-串联质谱法同时检测水中5种微囊藻毒素 被引量:10 2008年 [目的]建立高效液相色谱-串联质谱同时检测水中5种微囊藻毒素(MC)的方法。[方法]在流动相中加入甲酸,以亮氨酸-脑腓肽为内标,采用多反应监测模式(MRM)对5种MC进行定量检测。[结果]5种MC的检出限均低于0.1μg/L,平均回收率在91.2%-101.6%。此方法用于太湖水样的检测,3个水样中1个样品检出了MC-LR,含量为0.2μg/L,低于WHO饮用水中MC-LR为1.0μg/L的控制标准。[结论]该研究建立的高效液相色谱-串联质谱同时检测水中5种MC的方法灵敏度高、选择性好。 钮伟民 肖付刚 戴维杰 吴庆刚 汤坚 赵晓联关键词:微囊藻毒素 高效液相色谱-串联质谱 太湖 无锡地区流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究 2009年 目的监测无锡地区2005年至2008年季节性流感型与亚型分布并了解2008年部分A/H3N2分离株血凝素(HA)基因变异状况。方法无锡地区医院门诊流感样患者及集体单位聚集性流感样暴发患者采集鼻咽拭标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2008年部分H3亚型流感病毒进行HA全基因测序,分析HA基因变异状况。结果2005年至2008年9月,在无锡地区流感样患者中共分离到435株流感病毒,其中164株为A/H1N1亚型,80株为A/H3N2亚型,B型191株。型与亚型有明显季节性分布强弱特征。H3亚型HA序列分析,无锡地区9株分离株与上海地区同期分离株接近,有很多序列相互穿插归属于进化树的同一分支,与WHO2008--2009年疫苗推荐株相近。结论近年无锡地区散发和局部暴发流感病毒感染仍主要为A/H1N1、A/H3N2和B型,A/H3N2HA基因与上海地区同期分离株接近,与WHO2008--2009年疫苗推荐株相近。 尤凤兴 居丽雯 马广源 张敬平 施强 吉杏生 吴家林 凌霞 肖勇 沙丹 吴庆刚 季亚勇关键词:正粘病毒科 血凝素类 国内分离的致肾盂肾炎大肠埃希菌papA和papG基因分型的研究 首先,该研究建立了UPECpapC PCR的方法,在其扩增片段内设计了PstⅠ内切酶位点,可用于PCR产物的鉴定,提高该方法的特异性.采用上述方法对国内分离的147株尿源性大肠埃希菌进行检测,UPEC菌株检出率为31.9... 吴庆刚关键词:粘附 基因分型 文献传递 幽门螺杆菌与人巨噬细胞株作用蛋白组学比较 被引量:1 2012年 目的寻找幽门螺杆菌(Hp)与宿主细胞(U937)作用后的差异蛋白。方法利用双向电泳技术分离Hp26695和TN2株与U937细胞相互作用前后的蛋白,应用ImageMaster 2Dv3.1软件对蛋白图谱进行比较,对目的蛋白进行基质辅助激光解析及电离飞行时间质谱分析,应用Mascot软件进行蛋白图谱搜库比对。结果 2株作用后的细胞株共检测到2个差异蛋白斑点,经质谱分析鉴定与Mascot搜库证实,其中的1种差异蛋白为Hp热休克蛋白60。结论热休克蛋白60可能进入细胞或结合于宿主细胞膜上,其相关机制尚待进一步阐明。 吴庆刚 张建中 严子禾 李伯清关键词:幽门螺杆菌 U937细胞 蛋白组学