吕延成
- 作品数：36 被引量：86H指数：7
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学环境科学与工程更多>>
- 基于实践的研究生医学实验动物学教学分析被引量：7
- 2018年
- 研究生医学实验动物学课程是我校教学改革的中心对象之一,我们构建以研究生成长成才为主的培养机制,对教学内容、教学方法、考核评价机制三方面进行优化,积极探索以理论为指导,以实验为主导的教学改革的有效方法和途径。经过实践证明,教改提高了教学质量和效果,充分激发了学生的学习积极性和主动性,并建立了完善的考核体系,为今后的教学奠定了理论基础。
- 张青峰冯昆刘星高书颖吕延成
- 关键词：医学实验动物学教学内容教学方法考核评价机制
- 一种抗菌肽VK‑21及其应用
- 本申请公开了生物技术领域的一种抗菌肽VK‑21，所述抗菌肽的氨基酸序列为：Val‑Lys‑Arg‑Lys‑Lys‑Lys‑Pro‑Gln‑Ser‑Trp‑Lys‑Thr‑Trp‑Trp‑Thr‑Lys‑Trp‑Trp‑T...
- 杨愈丰杨传辉谢明峰柳敦耀夏嫱李均刘振勇张晓青向红英彭莉萍吕延成
- 文献传递
- UL29shRNA表达质粒与ACV对HSV-2抑制效果的比较
- 2016年
- 目的:通过将筛选的UL29shRNA表达质粒与抗病毒药物阿昔洛韦(ACV)的抗病毒效果及细胞毒性进行比较,探讨RNA干扰在细胞水平上对HSV-2病毒的抑制效果。方法:将筛选的干扰效果最好的表达质粒UL29-shRNA1641作为RNA干扰组与抗病毒药ACV进行对HSV-2的抑制效果的比较研究,分为RNAi组、ACV组和RNAi+ACV组。采用实时荧光定量PCR检测UL29mRNA的相对表达量,Karber法检测细胞上清液中病毒滴度的变化、蛋白印迹法(Western blot)检测ICP8的相对表达量,对RNAi与ACV抑制效果进行比较,通过WST-1(Water-Soluble Tetrazolium-1)法对质粒转染复合物(质粒+转染试剂)和ACV的细胞毒性进行比较。结果:RT-PCR检测三组mRNA的相对表达水平,其中RNAi组UL29基因相对表达量高于ACV组(P<0.05);RNAi+ACV组UL29基因相对表达量明显低于RNAi组和ACV组(P<0.05)。Karber法检测三组细胞上清液病毒滴度表明,RNAi组病毒滴度高于ACV组(P<0.05),RNAi+ACV组的病变病毒滴度明显低于RNAi组和ACV组(P<0.05)。Western blot检测ICP8相对表达量,ACV组的ICP8(UL29编码的单链DNA结合蛋白,主要作用是在HSV-2 DNA复制过程中与复制叉产生了单链DNA结合,防止其重新配对形成ds DNA或被核酸酶降解)相对表达量比RNAi组低(P<0.05)。RNAi+ACV组ICP8相对表达量降低最为明显,与ACV组和RNAi组相比有显著差异(P<0.05)。WST-1法对转染复合物与ACV的细胞毒性进行比较,其中RNAi中质粒和转染试剂对细胞的毒性明显小于ACV。结论:在RNAi与ACV对HSV-2抑制效果的比较中,ACV要好于RNAi,两者联合使用的抑制效果好于单独使用RNAi或ACV。在抑制效果都较好的情况下比较,RNAi中使用的质粒与转染试剂对细胞的影响比ACV小。
- 仵立佳吕延成兰小凇潘晓瑜丁娟
- 关键词：RNA干扰
- 一种柑橘类果皮精油的提取方法
- 本发明公开了一种柑橘类果皮精油的提取方法，包括下述步骤：步骤一、收集新鲜、无腐烂的柑橘类果实的果皮，粉碎机粉碎；步骤二、将粉碎的果皮置于圆底烧瓶中，按料液比1：5～15加入蒸馏水，形成溶液；步骤三、在溶液中加入盐析剂，至...
- 杨愈丰柳敦耀向红英吕延成
- 文献传递
- UL27基因shRNA表达载体对293细胞转染效率的优化被引量：1
- 2015年
- 旨在优化Lipofectamine2000试剂介导UL27基因重组质粒p GPU6/GFP/Neo-UL27shRNA转染HEK293细胞的条件,为研究UL27基因重组质粒对HSV-2的干扰作用奠定基础。用Lipofectamine2000试剂介导p GPU6/GFP/Neo-UL27shRNA重组质粒转染293细胞,采用流式细胞仪检测不同的转染时间下的转染效率,同时荧光显微镜和流式细胞仪检测不同比例条件下的转染效率,MTT法检测细胞的存活率。在质粒与转染试剂复合物的配比为0.8μg∶2μL,转染48 h,转染效率最高并且对细胞毒性最小。优化p GPU6/GFP/Neo-UL27shRNA转染293细胞的条件,提高了转染效率。
- 潘晓瑜吕延成
- 关键词：293细胞转染效率
- 一种抗菌肽SE37及其应用
- 本专利公开了生物技术领域的一种抗菌肽SE37，其氨基酸序列为：Ser‑Glu‑Thr‑Arg‑Pro‑Val‑Leu‑Asn‑Arg‑Leu‑Phe‑Asp‑Lys‑Ile‑Arg‑Gln‑Val‑Ile‑Arg‑Lys...
- 杨愈丰冯嘉敏夏嫱李均刘振勇张晓青向红英柳敦耀彭莉萍吕延成
- 文献传递
- 柚子皮精油提取及其驱蚊效果研究被引量：9
- 2017年
- 本文通过响应面法研究了柚子皮精油的提取工艺,并初步考察了所提取精油的驱蚊效果。柚子皮精油提取采用微波辅助蒸馏法,在采用单因素实验考察蒸馏时间、料液比和NaCl质量分数对精油提取率的影响之后,通过响应面法进行提取工艺优化,以获得最佳提取方案;然后采用趋避法验证柚子皮精油的驱蚊活性。结果表明,最佳柚子皮精油提取方案如下:蒸馏时间100 min,料液比0.3∶2(g/m L),NaCl的质量分数1%,采用该方案柚子皮精油提取率达1.65%。通过初步驱蚊实验发现柚子皮精油具有较好的驱蚊活性,和市售六神花露水效果相当,驱蚊效应具有进一步深入研究的价值。
- 杨愈丰柳敦耀向红英吕延成王菊芳
- 关键词：蒸馏法响应面法
- 临床医学专业生物化学的教学实践与体会
- 2015年
- 生物化学作为临床医学专业的一门专业基础课程,其内容抽象繁杂、知识更新速度较快、结构式和代谢通路多,难理解,难记忆,学习难度大,为了提高教学质量,调动学生学习的积极性和主动性,在教材选择、教学内容、学习方法、教学方法等方面谈谈在多年教学工作中的几点体会。
- 邵敏高书颖杨愈丰王燕吕延成钟世军
- 关键词：生物化学教学
- 靶向UL27shRNA抑制Ⅱ型单纯疱疹病毒在HEK293细胞中的复制被引量：7
- 2013年
- 按照shRNA(small hairpin RNA)设计原则,针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type2,HSV-2)的UL27基因序列保守区域筛选设计、合成4条干扰靶序列并构建表达UL27序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pGPU6/GFP/Neo.通过脂质体介导重组表达载体转染HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cell)再接种HSV-2.采用实时荧光定量PCR(real-timefluorescent quantitative PCR)技术检测UL27各组的mRNA转录水平,终点滴定法检测细胞上清液中的病毒滴度,四甲基偶氮唑盐(four methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率,Western印迹法检测蛋白表达效果.结果显示,UL27shRNA75组对UL27基因mRNA表达抑制效果最佳,同时能显著抑制感染细胞的CPE(cytopathic effect,CPE),降低上清液中的病毒感染滴度,提高细胞的生存率,抑制UL27基因的蛋白表达.提示本研究构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27表达载体能在细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL27基因表达,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制.
- 吕延成潘晓瑜周丹丹袁俊杰黄畅
- 关键词：RNA干扰
- UL54和UL29基因干扰对HSV-2复制的影响被引量：1
- 2014年
- 目的利用RNAi技术同时沉默Ⅱ型单纯疱疹病毒的UL54和UL29基因,探讨双基因干扰对HSV-2复制的影响。方法采用pGPU6/GFP/Neo质粒分别构建UL54、UL29基因的shRNA重组表达质粒,单独或同时转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测UL54、UL29基因的表达,终点滴定法检测培养细胞上清液中病毒感染滴度;MTT法测定细胞的存活效率。结果转染后48h后,与空白组相比,各干扰组均可不同程度降低上清液中的病毒滴度,提高细胞存活率,降低目的基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。与单干扰组相比,双基因干扰组能更有效降低病毒滴度并提高细胞存活率(P<0.01),增加了对UL54和UL29基因mRNA的抑制率,降低了蛋白的表达(P<0.01)。结论 pGPU6/GFP/Neo-UL54、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达质粒同时转染细胞可抑制HSV-2的复制,采用双基因干扰比单独基因干扰具有更高的效率。
- 吕延成潘晓瑜黄畅丁娟
- 关键词：短发夹RNA
