叶昕
- 作品数:27 被引量:34H指数:2
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院战略重点研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 蛋白激酶抑制剂Flavopiridol对流感病毒复制的体外抑制作用被引量:2
- 2012年
- 【目的】在细胞水平上研究黄酮类化合物flavopiridol的抗流感病毒效果,初步探索了其抗流感病毒的机制。【方法】首先用Western blot初步检测了在蛋白激酶抑制剂flavopiridol处理下流感病毒NP和M1蛋白的水平,然后通过免疫荧光实验观察了宿主细胞中流感病毒vRNP的合成,又利用噬斑实验检测了flavopiridol对病毒复制的影响,最后通过检测flavopiridol处理的宿主细胞内RNA聚合酶Ⅱ的磷酸化状态和病毒各种RNA的合成量,探究了flavopiridol抑制流感病毒复制的机理。【结果】结果表明,flavopiridol在细胞水平上可以显著抑制流感病毒蛋白质和vRNP的合成及病毒的复制,同时flavopiridol也可以抑制宿主RNA聚合酶Ⅱ大亚基CTD结构域七肽重复序列中的2位丝氨酸的磷酸化来抑制聚合酶的转录延伸活性,显著地减少病毒vRNA的合成。【结论】Flavopiridol可以通过抑制宿主细胞RNA聚合酶Ⅱ的转录延伸活性有效地抑制流感病毒的复制。
- 汪世雄张军杰叶昕
- 关键词:FLAVOPIRIDOL流感病毒
- 乙型肝炎病毒上调的lnc-HUR1抑制肝癌细胞凋亡被引量:1
- 2022年
- Lnc-HUR1是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)上调的长链非编码RNA,具有促进肝癌细胞增殖和促进肝癌发生发展的功能。为探究lnc-HUR1对肝癌细胞凋亡的影响,通过免疫印迹、实时荧光定量PCR、双荧光素酶报告基因、免疫共沉淀、流式细胞术等实验方法,检测lnc-HUR1对肝癌细胞凋亡的影响。转化生长因子-β(tansforming growth factor-β,TGF-β)、五氟尿嘧啶和星孢菌素诱导肝癌细胞凋亡的实验结果显示,过表达lnc-HUR1能够显著降低caspase3/7的活性以及PARP-1的剪切,而敲低lnc-HUR1则能够显著增加caspase3/7的活性,促进PARP-1的剪切;Annexin-Ⅴ和PI联合染色实验也表明过表达lnc-HUR1能够抑制细胞凋亡,敲低lnc-HUR1能够促进细胞的凋亡。同时过表达lnc-HUR1能够在RNA水平和蛋白水平上调凋亡抑制因子Bcl-2(B cell lymphoma-2)、下调促凋亡因子BAX(B cell lymphoma-2-associated x),从而抑制细胞的凋亡。在CCL4诱导的小鼠急性肝损伤模型中,lnc-HUR1转基因小鼠肝组织中Bcl-2的表达高于对照小鼠。染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验也证实lnc-HUR1能够降低p53在Bcl-2和BAX启动子区的富集。以上结果说明,lnc-HUR1通过促进凋亡抑制因子Bcl-2及抑制凋亡促进因子BAX的表达抑制肝癌细胞的凋亡。进一步的实验表明,在HCT116细胞中lnc-HUR1能够调控Bcl-2和BAX的转录,而在HCT116 p53−/−细胞中,lnc-HUR1对Bcl-2和BAX的表达没有影响,说明lnc-HUR1对肝癌细胞凋亡的抑制作用依赖于p53的活性。综上所述,HBV上调的lnc-HUR1具有抑制肝癌细胞凋亡的作用,lnc-HUR1通过抑制p53转录活性,上调凋亡抑制因子Bcl-2、抑制凋亡促进因子BAX的转录,从而抑制细胞凋亡。上述结果提示Lnc-HUR1在HBV相关肝癌发生发展中发挥重要作用。
- 陈永臣温金燕祁丹丹童晓梅刘宁宁叶昕
- 关键词:乙型肝炎病毒肝癌凋亡
- 抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定被引量:2
- 2016年
- 流感病毒属于正黏病毒科,为有包膜包裹的单股负链RNA病毒。它的8个基因片段编码至少16种病毒蛋白,其中3个蛋白组成流感病毒的聚合酶复合体。流感病毒聚合酶碱性蛋白1(PB1)是该复合体的组分之一,在病毒的转录、复制及重配中发挥重要的作用。为研究其功能,构建His-PB1(aa 550–755)融合蛋白原核表达质粒,IPTG诱导融合蛋白表达,通过镍柱亲和将其纯化,然后作为抗原免疫家兔。对抗血清进行间接ELISA检测,表明抗体效价可达1∶100 000。兔源PB1蛋白抗血清经亲和纯化后,用于免疫印迹检测流感病毒WSN毒株PB1蛋白以及外源转染的FLAG-PB1蛋白,结果表明该PB1抗体具有良好的特异性,同时也能特异性识别其他亚型的A型流感病毒的PB1蛋白,为进一步研究流感病毒PB1蛋白的功能奠定了基础。
- 秦玉洁张廷虹叶昕
- 关键词:流感病毒多克隆抗体
- 胶枝霉素C的制备方法及其应用
- 本发明涉及胶枝霉素C(Gliocladicillin C)的制备方法及其应用。将真菌粘帚霉属(Gliocladium sp.)菌株6.102CGMCC No.2673进行固体发酵,对发酵产物进行分离纯化获得活性化合物,并...
- 车永胜刘杏忠叶昕郭慧娟陈亚丽刘述春
- 化合物AJ-4在制备治疗或预防流感病毒的药物中的应用
- 本发明公开了化合物AJ‑4在制备治疗或预防流感病毒的药物中的应用。化合物AJ‑4即为式(Ⅰ)所示化合物。本发明首先要求保护式(Ⅰ)所示化合物在制备抑制流感病毒的药物中的应用。本发明还保护一种抑制流感病毒的药物,其活性成分...
- 叶昕张立新秦玉洁刘雪婷叶榛张敬宇童晓梅
- 文献传递
- 化合物AJ-4在制备治疗或预防流感病毒的药物中的应用
- 本发明公开了化合物AJ-4在制备治疗或预防流感病毒的药物中的应用。化合物AJ-4即为式(Ⅰ)所示化合物。本发明首先要求保护式(Ⅰ)所示化合物在制备抑制流感病毒的药物中的应用。本发明还保护一种抑制流感病毒的药物,其活性成分...
- 叶昕张立新秦玉洁刘雪婷叶榛张敬宇童晓梅
- 文献传递
- 含有A型流感特异性启动子的重组293T细胞及其应用
- 本发明公开了一种含有A型流感特异性启动子的重组293T细胞及其应用。本发明所提供的重组细胞为向293T细胞中转入重组质粒后得到的重组细胞;所述重组质粒含有融合基因;所述融合基因,是由片段1、报告基因和片段2顺次连接构成的...
- 叶昕秦玉洁童晓梅胡毅张廷虹叶榛
- 文献传递
- 化合物DaP-01及其制备方法和应用
- 本发明公开了化合物DaP‑01及其制备方法和应用。本发明提供的化合物DaP‑01,为式(Ⅰ)所示化合物。本发明还保护化合物DaP‑01在制备药物中的应用。所述药物的功能为如下(a)和/或(b)和/或(c):(a)促进肿瘤...
- 叶昕李学兵童晓梅程水红祁丹丹李明莉冯永
- 文献传递
- 化合物ID45在制备治疗或预防流感病毒药物中的应用
- 本发明公开了化合物ID45在制备治疗或预防流感病毒药物中的应用。化合物ID45即为式(Ⅰ)所示化合物。本发明首先要求保护式(Ⅰ)所示化合物在制备抑制流感病毒的药物中的应用。本发明还保护一种抑制流感病毒的药物,其活性成分为...
- 叶昕张立新叶榛代焕琴秦玉洁王建国马荣
- 文献传递
- 含有A型流感特异性启动子的重组细胞及其应用
- 本发明公开了含有A型流感特异性启动子的重组细胞及其应用。本发明所提供的重组细胞的应用为所述重组细胞在制备检测流感病毒的试剂盒中的应用、所述重组细胞在制备筛选抗流感病毒药物的试剂盒中的应用或所述重组细胞在筛选抗流感病毒药物...
- 叶昕张军杰刘婷童晓梅李刚