史煜
- 作品数：13 被引量：56H指数：5
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目广东省重点攻关基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组AAV2-NTF2对人视网膜微血管内皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响
- 2010年
- 目的观察核运输因子2(NTF2)在体外培养的人视网膜微血管内皮细胞(RCECs)中的表达,并探讨其高表达对RCECs中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法取中山眼科中心眼库的人眼球,分离视网膜组织用以培养人RCECs,并用Ⅷ因子抗体免疫组织化学法鉴定。免疫组织化学法观察细胞中NTF2的表达。通过重组腺相关病毒(rAAV2)将外源性NTF2导入培养的RCECs内,rAAV2-NTF2和rAAV2-EGFP转染RCECs,未转染组为对照组。激光共焦显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)阳性细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组NTF2、VEGFmRNA的表达变化,并进行定量分析。结果培养的RCECs呈典型铺路石样排列,荧光显微镜下可见Ⅷ因子阳性表达为绿色荧光,95%以上的活体细胞可摄取DiI标记的Ac-LDL,并在荧光显微镜下呈现红色荧光。RCECs可表达NTF2,主要位于细胞质内,富集于核周。rAAV2-EGFP转染后,激光共焦显微镜观察可见大量EGFP阳性细胞,实验组NTF2在mRNA水平表达明显强于GFP组和对照组(t=15.06,t=7.02,P<0.01),VEGF表达明显下降(t=7.40,t=14.08,P<0.01)。结论 rAAV2-NTF2转染视网膜内皮细胞后,NTF2可稳定高表达,VEGF表达下降,NTF2可能通过调节VEGF的表达参与新生血管的发生。
- 史煜陈春生曹亮陈凌燕谢琳唐仕波
- 关键词：血管内皮生长因子
- 康柏西普玻璃体腔注射联合选择性光凝治疗视网膜中央静脉阻塞合并黄斑水肿的疗效及安全性研究被引量：4
- 2020年
- 目的:研究探讨康柏西普玻璃体腔注射联合选择性光凝治疗对视网膜中央静脉阻塞(CRVO)合并黄斑水肿(ME)的疗效及安全性的影响。方法:选取2017年3月至2019年3月在南京医科大学附属南京医院接受治疗的96例CRVO合并ME患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组48例。对照组患者接受选择性光凝治疗,观察组患者接受康柏西普玻璃体腔注射联合选择性光凝治疗。比较两组治疗后7 d、1个月、3个月、6个月最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心视网膜厚度(CMT)及治疗后1个月、3个月眼内压(IOP),记录两组治疗总有效率和并发症发生率。结果:与治疗前比较,两组治疗后7 d、1个月、3个月、6个月BCVA均明显提高,CMT明显降低(P<0.05),且治疗后3个月、6个月观察组BCVA和CMT变化更为显著(P<0.05)。术后两组IOP无明显差异(P>0.05)。观察组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05),不良反应发生率和复发率明显低于对照组(P<0.05)。结论:康柏西普玻璃体腔注射联合选择性光凝治疗能提高CRVO合并ME的临床疗效,患者术后视力恢复良好,安全性较高,值得临床推广应用。
- 史煜许译丹张荟刘媛陈力迅陈春生
- 关键词：黄斑水肿
- 线粒体DNA氧化损伤对糖尿病大鼠视网膜血管的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管细胞线粒体DNA（mtDNA）损伤及黏附分子表达、细胞凋亡情况。方法Sprague-Dawley大鼠100只，分为正常对照组和实验组。实验组大鼠腹腔注射链尿佐菌素诱导糖尿病模型，造模成功后依照病程分为DR1、DR2、DR3月组，正常对照组分为NR1、NR2、NR3月组。提取各组大鼠视网膜血管DNA，联合Fpg酶切Southern印迹杂交检测未损伤mtDNA含量；实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）观察mtDNA编码基因环氧酶1（COX-1）及转录因子A（mtTFA）mRNA的表达；消化铺片TdT介导的duTP缺口末端标记（TUNEL）免疫荧光、细胞间黏附因子（ICAM-1）免疫组织化学染色，分别观察细胞凋亡及黏附分子的表达。结果不同病程糖尿病大鼠视网膜未损伤mtDNA含量与不同鼠龄正常对照组比较，糖尿病大鼠未损伤mtDNA含量明显减少，且随着病程延长减少更明显；COX-1及mtTFAmRNA表达相应降低；糖尿病大鼠随病程延长，TUNEL、ICAM-1阳性细胞数增多。结论糖尿病大鼠随着病程延长，视网膜血管细胞mtDNA损伤加重，其编码基因及转录调控基因mRNA的表达均相应下降，黏附分子表达上调，细胞凋亡增加。
- 谢琳唐仕波史煜朱晓波
- 关键词：糖尿病视网膜病变病理生理学线粒体病理生理学
- 核运输因子2在糖尿病大鼠视网膜的时空表达及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨糖尿病大鼠视网膜中核运输因子2(NTF2)的时空表达变化及意义。方法:伊凡思蓝(EB)灌注铺片观察糖尿病大鼠视网膜血管分布和形态。逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测与糖尿病大鼠不同时点鼠龄匹配的对照组(N2w,N1m,N3m,N6m)和糖尿病成模后2周、1月、3月、6月(D2w,D1m,D3m,D6m)大鼠视网膜中NTF2、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。免疫组化法检测NTF2蛋白在视网膜中的表达和分布位置。结果:正常组大鼠可见在低背景荧光下视网膜血管对EB有很好的屏障作用,成模1月后糖尿病大鼠视网膜血管仅见背景荧光增强,成模3月后血管出现异常节段性扩张,局部血管周围EB渗漏。与糖尿病大鼠年龄匹配的正常大鼠视网膜NTF2和VEGF并未随时间延长而变化,mRNA表达稳定。糖尿病成模2周后开始,NTF2mRNA有轻度增高,并随病程的延长保持较高水平,病程达6个月时,NTF2表达开始回落,与正常大鼠基本一致。NTF2蛋白在正常大鼠及糖尿病大鼠视网膜中免疫组化均可以检出,主要分布在视网膜内层,以节细胞层、内核层为主。结论:NTF2mRNA水平在糖尿病大鼠视网膜中升高,主要分布在视网膜内层。NTF2很可能在糖尿病视网膜病变中起着一定的调控作用,其作用途径及机制可能与VEGF的作用通路有一定的联系。
- 史煜陈春生曹亮陈凌燕谢琳唐仕波
- 关键词：血管内皮生长因子糖尿病视网膜病变
- 糖尿病视网膜病变抵抗基因的研究
- 糖尿病性视网膜病变是糖尿病最常见的微血管并发症之一，对视力的危害十分严重，导致大量患者失明，给患者本人、家庭和社会带来沉重的负担，已成为发达国家及发展中国家主要的致盲原因之一。目前尚未寻找到有效的办法预防和治疗，已成为眼...
- 史煜
- 关键词：糖尿病视网膜病变血糖控制基因芯片炎症反应细胞因子
- 文献传递
- 体外培养人视网膜微血管内皮细胞屏障功能的研究被引量：8
- 2009年
- 目的:研究原代培养的人视网膜微血管内皮细胞屏障功能。方法:对人视网膜微血管内皮细胞进行原代培养并鉴定,第4代细胞接种于Polyester(PET)膜上,不同时点对滤膜表面行显微镜观察,通过紧密连接相关蛋白occludin的表达,间接反映细胞之间紧密连接的形成,应用共聚焦免疫显微镜观察2、3、4周occludin表达的变化;跨膜电阻(TER)检测屏障的稳定性,并通过测量正常培养条件和5μg/L的血管内皮生长因子(VEGF)干预下辣根过氧化物酶(HRP)通透性的改变反映屏障特性。结果:成功培养了人视网膜微血管内皮细胞,纯度可达95.8%。细胞接种1周后融合为单层,接种后2、3、4周细胞密度无明显变化,细胞接触紧密,呈单层生长,可见occludin在细胞相邻边界规则的表达;occludin在2、3、4周,在细胞内的分布逐渐移向相邻细胞交界处;2周时视网膜微血管内皮细胞跨上皮细胞电阻达(120.62±3.97)Ω/cm2,2、3、4周差异无显著(P>0.05);单层细胞的通透性检测结果显示,HRP从滤膜上方到达下方随时间延长呈线性增加,且在VEGF的干预下,各时点通透率明显增加(P<0.05)。结论:利用体外培养的人原代视网膜微血管内皮细胞建立单层细胞具有典型的屏障功能特性,可作为体外研究血视网膜内屏障的有用模型。
- 李建桥江静波罗燕刘清云肖伟史煜马红婕唐仕波
- 关键词：血管内皮细胞细胞培养血视网膜屏障
- 哌仑西平抑制近视眼机制的研究被引量：5
- 2007年
- 目的观察哌仑西平对实验性近视的抑制作用,初步探讨其作用机制。方法将出生后48h内的纯种M99穗麻雄鸡的右眼缝上眼罩进行遮盖,分别在玻璃体内注入500μg哌仑西平(MD+P组)及10μl生理盐水为阴性对照(SS组),单纯遮盖作为空白对照(MD组)。同时观察单纯注入500μg哌仑西平(P组)对正常眼(正常组)的影响。4周后进行验光。运用高效液相色谱(HPLC)联合电化学检测(EC)方法分析实验动物视网膜上多巴胺(DA)及其代谢产物多巴克(DOPAC)水平的变化。结果MD组和正常组屈光度差异有统计学意义(P<0.01)。MD组与正常组相比,视网膜DA及其代谢产物DOPAC水平明显降低(P<0.01),下降率大于40%。MD+P组视网膜DA和DOPAC水平与正常组相比差异无统计学意义。结论500μg哌仑西平能够抑制实验性近视的产生和发展。哌仑西平可能作用于视网膜上毒覃碱受体(M受体)而引起DA改变,进而抑制近视的产生。
- 史煜陈春生钱益勇吴昌凡曾骏文
- 关键词：哌仑西平形觉剥夺近视多巴胺
- rAAV2-NTF2对糖尿病大鼠血视网膜屏障的保护作用被引量：5
- 2009年
- 目的:观察2型重组腺相关病毒-核运输因子2(rAAV2-NTF2)对糖尿病大鼠血视网膜屏障功能损伤的拮抗作用。方法:伊凡思蓝(EB)灌注铺片观察糖尿病大鼠视网膜血管分布和形态。亚克隆构建pSNAV-NTF2载体,腺相关病毒包装形成rAAV2-NTF2。成年雄性Wistar大鼠,以右眼为实验眼,玻璃体腔注射4μLrAAV2-NTF2,左眼为对照眼,玻璃体腔注射rAAV2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)4μL。1个月后取4只大鼠左眼,固定后取视网膜制备全视网膜铺片,荧光显微镜下观察EGFP表达情况。再行STZ腹腔注射诱导糖尿病,同时设单纯糖尿病组(diabetes,D组)和正常组(normal,N组)。糖尿病1个月后以45 mg/kg剂量静脉注射EB,循环2 h后1%多聚甲醛枸橼酸缓冲液灌注并摘除眼球取视网膜,置于甲酰胺中浸泡提取染料,用分光光度计测量甲酰胺中染料的浓度。结果:正常组大鼠可见在低背景荧光下视网膜血管对EB有很好的屏障作用,糖尿病2周大鼠视网膜血管仅见背景荧光增强,糖尿病1月后血管出现异常节段性扩张,局部血管周围EB渗漏。糖尿病1个月大鼠视网膜内EB浓度是正常组的4.67倍,P<0.01,提示糖尿病大鼠血-视网膜屏障受损。玻璃体腔注射rAAV2-NTF2,视网膜内EB浓度为(8.30±4.16)μg/g视网膜干重,较对侧眼(22.13±8.43)μg/g视网膜干重明显减少,可以部分改善血-视网膜屏障的破坏,降低EB-白蛋白渗漏(P<0.05)。结论:玻璃体腔注射rAAV2-NTF2可减轻糖尿病大鼠视网膜血-视网膜屏障功能的破坏,为糖尿病视网膜病变的基因治疗提供了实验依据。
- 史煜李斌李涛曹亮李永浩马红婕谢琳唐仕波
- 关键词：糖尿病视网膜病变腺相关病毒血-视网膜屏障
- apelin-APJ系统基因单核苷酸多态性与糖尿病视网膜病变的关系被引量：1
- 2019年
- 目的研究apelin-APJ系统基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法横断面研究。自2017年7月至2018年7月纳入2型糖尿病患者885例,参照DR国际临床分型标准对患者进行分组,其中DR组346例,非DR(non-DR,NDR)组539例。两组均行眼部检查,计算体质量指数,测量血压,检测空腹血糖,并进行血液生化指标及血脂等实验室检查。采用定量PCR方法获得apelin基因rs3115757、rs56204867、rs3761581和APJ基因rs7119375、rs9943582共5个位点的基因分型,比较不同性别两组间各基因型分布的差异,采用Logistic回归分析apelin和APJ基因5个SNP与DR的关系。结果无论男性还是女性,DR组糖尿病病程均显著长于NDR组(均为P=0.000)。男性apelin基因的3个SNP位点突变等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均有统计学意义(均为P<0.05),APJ基因2个SNP突变位点等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均无统计学意义(均为P>0.05)。女性的5个SNP突变位点等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均无统计学意义(均为P>0.05)。调整年龄、体质量指数、空腹血糖后,Logistic回归分析结果显示,无论男性还是女性,携带rs3115757-C、rs56204867-C、rs3761581-A突变等位基因者患DR的风险均明显高于携带相应野生等位基因者(均为P<0.05)。结论 apelin基因的3个SNP rs3115757、rs56204867、rs3761581与DR的发生有关。
- 史煜许译丹丁波刘媛陈力迅陈春生
- 关键词：APELINAPJ单核苷酸多态性糖尿病视网膜病变
- 不同年龄组人视网膜微血管内皮细胞特性的研究(英文)
- 2009年
- 目的:研究2个不同年龄组供体来源的人视网膜微血管内皮细胞的特性。方法:分离培养2个不同年龄组的人视网膜微血管内皮细胞,分别为出生后30 d内和40-65岁供体组。视网膜微血管内皮细胞具有特异性表达,通过免疫荧光染色CD31、vWF和乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)的摄取来定位内皮细胞的标记。通过使用matrigel基质胶培养细胞,激光共聚焦显微镜和Western blotting分析vWF在细胞内的分布,评估2组细胞管状结构形成能力以及vWF在细胞内的不同分布。结果:从2个不同年龄组中成功地获得高纯度视网膜微血管内皮细胞。2组在种到基质胶后6 h均能形成典型的二维管腔样结构,但婴幼儿组评分比成人组高(27.2%±2.2%),且二维管腔样结构在30 h仍可较好地维持,而成人组已看到部分自发降解。另外可见到vWF在婴幼儿组主要表达在细胞核内,而成人组主要表达在胞浆。结论:不同年龄来源的人视网膜血管内皮细胞具有某些自身特定的性状特征,在与年龄相关的疾病的体外研究中,供体年龄因素可能造成的影响应该得到一定的重视。
- 李建桥罗燕马伟丁小燕袁玲肖伟李杰史煜唐仕波
- 关键词：血管内皮细胞视网膜WILLEBRAND因子
