刘菲
- 作品数:6 被引量:20H指数:3
- 供职机构:山东农业大学更多>>
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- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)角质酶的纯化和特性(英文)被引量:2
- 2009年
- 本文对烟草赤星病菌Alternaria longipes产生的角质酶进行了纯化及性质测定。在含有苹果角质(诱导物)的液体培养基中培养A.longipes,第8 d达到产酶高峰。发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)Sepharose、Sephacryl S-100 HR和Phenyl-Sepharose 6 fast flow(high sub)进行纯化。通过SDS-PAGE测得蛋白分子量为59.5 kDa。该酶的最适温度为35℃,最适pH为9.0,在温度20℃~40℃及pH 4.0~10.0范围内,酶活较稳定。一些金属离子如Na+、Cu2+和Mn2+可以部分抑制角质酶活性。
- 刘辉刘菲魏芳芳梁元存赵蕾刘爱新
- 关键词:烟草赤星病菌蛋白纯化
- 核黄素激活烟草防卫反应和诱导对两种土传病害的抗性研究
- 核黄素(维生素B2)是一种水溶性B族维生素。核黄素的基本生物功能是以单核苷酸(FMN)或黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的形式作为辅酶,参与动植物和微生物的以氧化.还原反应为特征的多个生理生化过程。
一些研究表明对...
- 刘菲
- 关键词:核黄素悬浮细胞烟草防卫反应
- 文献传递
- 拟南芥ASNAP在有性生殖中的功能分析
- 有性生殖对于植物生存繁衍至关重要。配子体发育是植物繁衍的前提,其研究不仅有助于理解某些基本的生物学问题,而且能够在提高作物粮食产量等方面发挥作用。真核细胞(包括植物细胞)内囊泡运输途径介导细胞内膜系统间蛋白质和脂类等物质...
- 刘菲
- 关键词:植物学有性生殖囊泡运输反向遗传学
- 文献传递
- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)产角质酶液体发酵条件的优化被引量:1
- 2009年
- 以基础培养基(查彼培养基+碳酸钙+苹果角质)为营养优化了长柄链格孢(Alternaria longipes)产角质酶的环境和营养条件。结果表明,最佳产酶的环境条件是:培养时间8d,培养温度25℃,pH5.5;通过正交试验确定最佳产酶的营养条件是:蔗糖3%,干酪素1%,吐温-800.3%;酶活高达175.2U/mL,是基础培养基酶活力的11.0倍。
- 刘辉刘爱新梁元存刘菲魏芳芳
- 关键词:烟草赤星病菌发酵条件
- 核黄素对烟草悬浮细胞活性氧和防卫反应的激活作用被引量:5
- 2009年
- 【目的】研究核黄素处理烟草悬浮细胞后,激活的氧迸发和防卫反应,以及钙信号和蛋白激酶对这些事件的影响。【方法】1mmol·L-1核黄素处理烟草悬浮细胞,用半定量RT-PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法测定一系列防卫反应,并用钙离子通道抑制剂LaCl3、钙离子螯合剂EGTA和一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂staurosporine处理细胞,测定防卫反应的变化。【结果】1mmol·L-1核黄素处理悬浮细胞后,产生了氧迸发、导致培养基质碱性化、增强4种防卫基因PR(pathogenesis-related)-1a、PR-1b、PAL(phenylalanine ammonia lyase)和LPO(lignin peroxidase)表达以及scopoletin的积累;LaCl3、EGTA和staurosporine可以不同程度地抑制这些防卫反应。【结论】核黄素能够激活烟草悬浮细胞的氧迸发和防卫反应,在信号转导中钙信号和蛋白质磷酸化参与了这些过程。
- 刘菲魏芳芳王蕾刘辉梁元存刘爱新
- 关键词:核黄素烟草活性氧防卫反应
- 核黄素诱导烟草悬浮细胞酚类物质和木质素的积累被引量:9
- 2009年
- 【目的】阐明核黄素对烟草悬浮细胞苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性以及抗病相关的酚类物质、木质素等次生代谢产物含量的影响。【方法】1mmol·L-1的核黄素处理烟草悬浮细胞,用生物化学、细胞化学和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法测定苯丙烷代谢有关的生理和生化指标。【结果】核黄素处理后,PAL和POD活性明显升高,处理12h和24h后酶活性分别达到峰值;荧光观察细胞壁积累了更多的酚类物质,胞内和胞外scopoletin(7-羟基-6-甲氧基香豆素)含量明显升高,在处理12h后都达到峰值,分别是对照的3.6和3.9倍;细胞染色和含量测定表明,核黄素处理后烟草悬浮细胞沉积了更多的木质素,处理24h和48h后,木质素含量分别为对照的1.5和1.8倍。【结论】核黄素处理后提高了烟草悬浮细胞PAL、POD活性,积累了更多与抗病有关的次生代谢产物。
- 刘菲刘辉梁元存刘爱新魏芳芳林琎
- 关键词:烟草核黄素SCOPOLETIN木质素