刘菲
- 作品数：86 被引量：532H指数：14
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省重点科学建设项目长江学者和创新团队发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 间接免疫组化检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位的研究
- 应用鸭源血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)作为抗原免疫兔制备兔抗RA的IgG,建立了检测雏鸭感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法,该法与大肠杆菌(O1、O8、O79、O138)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌(5:A)感染发...
- 刘维平程安春汪铭书陈孝跃周毅朱德康刘菲孟琼华黄诚宋涌
- 关键词：免疫组化鸭疫里默氏杆菌雏鸭
- 文献传递
- 检测鸭瘟病毒PCR方法的建立及其在临床诊断和免疫与致病机理研究中的初步应用
- 鸭瘟病毒(Duck Plague virus,DPV)是引起的鸭、鹅等水禽的急性败血性传染病的一种疱疹病毒,临床以体温升高,两腿麻痹、下痢、流泪和部分病鸭头颈肿大为特征。该病为一种广泛嗜全身性感染的传染病,其病理特征是血...
- 程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪
- 文献传递
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察
- 为研究鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律,我们应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明:感染后12h在脾...
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲郭宇飞韩晓英廖永洪徐超周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株的分离鉴定被引量：6
- 2006年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属,是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。本研究以出现繁殖障碍的母猪并通过ELISA检测为抗体阳性者的血清为材料,于2000年首次从重庆地区分离出PRRS病毒。母猪血清接种Marc-145单层细胞,经盲传至第四代时出现典型的细胞病变效应(CPE);细胞培养物经电镜观察,发现其中有球形的病毒粒子,粒子大小为40～80nm,核心直径为20～40nm;病毒TCID50为10-4.46/0.05mL;用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒,中和指数为100,并将该地方分离株命名为PRRSV-SCQ株。根据Genbank中PRRSV北美洲株ATCCVR-2332的序列设计一对特异性引物,以PRRSV-SCQRNA为模板,通过RT-PCR扩增其GP5基因片段,并将该片段插入克隆载体pMD18-T的EcoRV位点;测序结果表明该GP5基因序列与PRRSV-VR2332、LV株的GP5基因核苷酸序列同源性分别为99.34%和62.14%,GP5蛋白氨基酸推导序列的同源性分别为97.51%和54.37%,揭示SCQ地方分离株与VR2332株在基因型上更为接近,应属于美洲型。
- 颜其贵郭万柱陈斌袁孟伟王晓玉刘菲唐琼陈永舟李林刚费海军勾朝军袁刚建
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型
- 鹅细小病毒强毒PCR检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 参照GenBank中登录的鹅细小病毒 (GPV)B株的全基因序列 ,针对GPV的VP3保守基因设计了 1对引物 ,建立了GPV的PCR检测方法。采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约 4 41bp的特异性片段 ,而对鸭瘟病毒 (DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌 (E .coli)O8和O1、雏鹅新型病毒性肠炎病毒 (NGVEV)呈阴性反应。该法检测GPV核酸的灵敏度可达 0 .4 7pg ;对GPV强毒皮下注射感染雏鹅各器官的检测结果表明 ,感染后 8h即可从心、肝病料中检出病毒DNA ,感染后 2 4h可从延髓、胸腺、胰腺、十二指肠、空肠、盲肠、腔上囊、心、肝、脾、肺、肾、血液、小脑、直肠、肌肉、粪便中检出GPVDNA ,感染 4 8h后可从骨髓中检出病毒DNA ,感染 312h后仍能从十二指肠、空肠、盲肠、心、肝、肾、粪便中检出病毒DNA。病毒分离阳性的可疑病料PCR检测为阳性 ,对临床送检病料的检测结果表明 ,PCR的敏感性显著高于病毒分离。
- 黄诚程安春汪铭书刘菲韩新峰王刚周伟光文明贾仁勇郭宇飞陈孝跃周毅
- 关键词：PCR鹅细小病毒
- 间接免疫酶组织化学法检测鹅细小病毒感染方法的建立及其抗原定位的实验研究
- 本研究建立了检测雏鹅感染鹅细小病毒的间接免疫酶组织化学法(Indirect ImmunoperoxidaseStaining,IIS),该法与GPV感染死亡雏鹅的肝组织呈强阳性,而与鹅源血清1型鸭疫里默氏菌、大肠菌(O1...
- 周春宇程安春汪铭书刘菲周毅陈孝跃
- 关键词：鹅细小病毒抗原定位
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒株的形态发生学与超微病理学研究被引量：25
- 2004年
- 应用透射电镜和超薄切片技术,研究鸭病毒性肠炎病毒(duckenteritisvirus,DEV)CH强毒株人工感染成年鸭后,病毒在宿主细胞内的形态发生及各组织器官的超微结构变化。结果表明,感染后不同时间剖杀及发病后死亡鸭的肝、肠、脾、胸腺、法氏囊等组织器官中,均观察到典型的疱疹病毒粒子。病毒主要的靶细胞为淋巴细胞、网状内皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞、肠道上皮细胞、肠道平滑肌细胞和肝细胞等。DEV的核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型四种形态,存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒核衣壳可在核内获得皮层,通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒;也可通过内外核膜进入胞浆,在其中获得皮层,然后在各种质膜上获得囊膜,最后成熟病毒释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟,细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密病毒核酸颗粒、微管和中空短管以及胞浆内膜包裹的电子致密小体、双层管等病毒相关结构。超微研究表明,组织细胞有坏死和凋亡两种变化。坏死细胞肿胀甚至破裂,线粒体肿胀空泡化,粗面内质网扩张,核糖体脱落,有的细胞器甚至完全崩解,染色质或固缩或溶解。凋亡细胞则染色质聚集,胞浆凝聚深染,细胞膜上有大量空泡,并有凋亡小体形成。细胞坏死与凋亡往往同时存在,疾病发?
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲韩晓英廖永洪徐超郭宇飞周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 关键词：鸭病毒囊膜强毒株核衣壳法氏囊
- 一种新发现的鸭病毒性肿头出血症传染病的研究
- 1998-2003年四川省、重庆市、贵州省和云南省等养鸭地区发生一种以鸭头肿胀、眼结膜充血出血、全身皮肤广泛出血、肝脏肿大呈土黄色并伴有出血斑点、体温43℃以上、排草绿色稀粪等为特征的急性传染病,该病的发生迅速、传播快,...
- 程安春汪铭书陈孝跃周毅刘菲宋涌郭宇飞韩晓英袁桂萍徐超廖永洪方鹏飞刘兆宇
- 文献传递
- 间接免疫酶组织化学法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒感染和抗原定位被引量：6
- 2008年
- 以蔗糖密度梯度离心法提纯的猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)病毒SC1株作为抗原,免疫家兔制备兔抗PRRS病毒IgG,成功建立了检测PRRS病毒抗原的间接免疫酶组织化学法。该方法只与PRRS病毒感染猪组织呈现阳性反应,与猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒人工感染并致死仔猪的肝脏组织呈现阴性反应。用该方法检测PRRS SC-1株人工感染28日龄仔猪,在感染后7 d即可在肺门淋巴结、胸腺、扁桃体、十二指肠、肺、大脑和肾脏检测到PRRS病毒抗原。PRRS病毒抗原主要分布于胸腺和十二指肠感染细胞的胞浆内、肺门淋巴结小梁周围的淋巴窦和弥散的淋巴组织、扁桃体淋巴结的隐窝及其周边。该法具有特异、直观和敏感的特点,可用于PRRS病毒感染的实验室诊断、抗原定位及甲醛固定样本的回顾性诊断。
- 张平英朱德康程安春汪铭书刘伍梅李雪梅陈希文刘菲周毅陈孝跃
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原定位
- 天府肉鸭IFN-α基因的密码子使用法特征分析被引量：1
- 2011年
- 密码子简并性特征造成了不同物种密码子使用的偏好性不同,这对外源基因的表达强度有着较大的影响。运用软件对选取的16种IFN-α和天府肉鸭IFN-α基因(EU925650)进行了密码子偏爱性分析。通过进化树的构建结果显示天府肉鸭IFN-α,与北京鸭、河南肉鸭以及绍兴鸭IFN-α的亲缘关系最为接近。通过CAI,ENC,GC3S等数据分析进行了密码子偏爱性特征的分析。结果显示,天府肉鸭IFN-α系统保守基因,与禽类IFN-α基因的密码子使用类似。
- 刘菲高丽芹程安春汪铭书韩清林赵婷婷唐卫杰
- 关键词：IFN-Α密码子偏爱性
