刘康
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南眼科医院更多>>
- 发文基金：军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠视网膜神经节细胞存活和突起生长与可溶性混合晶状体蛋白的促进作用:体外培养实验被引量：4
- 2005年
- 目的:观察不同培养基中血清和混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞的影响,探讨晶状体损伤后其促进视网膜神经节细胞存活和再生的作用。方法:实验于2004-04/07在解放军第三军医大学西南眼科医院眼科实验室完成。选择成年LongEvens大鼠8只用于可溶性混合晶状体蛋白的提取;选择新生0～2dLongEvens大鼠30只用于视网膜神经节细胞的培养。分别用下列3组培养基对离体视网膜神经节细胞进行培养:①100mL/L新生牛血清+900mL/LDMEM/F12培养基(新生牛血清+DMEM/F12组)。②100mL/L新生牛血清+100mL/L胎牛血清+800mL/LDMEM/F12培养基(新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组)。③100mL/L胎牛血清+900mL/LDMEM/F12培养基(胎牛血清+DMEM/F12组)。每组又分为6个亚组,其中5个亚组分别加入5种不同终浓度的可溶性混合晶状体蛋白(1,0.5,0.02,0.01,0.005mg/L)溶液,一个亚组不加可溶性混合晶状体蛋白液。每天在倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,记录存活细胞数和存活时间。培养2,4,6d后,计数每视野分散的、有突起生长的视网膜神经节细胞数和最长突起长度(每一视野随机取5个细胞进行测量,共30个视野,150个突起)应用LeicaQWin图像分析系统。结果:①视网膜神经节细胞存活时间:新生牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活六七天,新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组和胎牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活七八天。②有突起生长的视网膜神经节细胞数目和最长突起长度:在相同培养天数(2,4,6d)和条件下(加入同一终浓度晶状体蛋白)新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组细胞数目均多于新生牛血清+DMEM/F12组犤加入0.5mg/L晶状体蛋白,2d时(3.83±4.53比0.14±0.38)个/视野,(4d时14.7±9.62比2.5±3.89)个/视野,P<0.01;6d时(20.13±12.32比5.43±5.62)个/视野,P<0.05犦;在4d内胎牛血清+DMEM/F12组细胞突起长度明显优于新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组(P<0.01);加入混合晶状体蛋�
- 刘康王一牛建军王艳华曾玉晓
- 关键词：视网膜神经节细胞细胞培养
- 重组人促红细胞生成素对离体培养视网膜神经节细胞的影响
- 2007年
- 目的研究重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoiain，rhEPO）对培养的视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）存活、突起生长及生长相关蛋白43（growth associmed protein43，GAP-43）表达的影响，探讨rhEPO对培养RGCs可能的作用机制。方法分别用DMEM及含有rhEPO的DMEM对RGCs进行离体培养，观察RGCs在体外存活的时间，测量2d、4d、6dRGCs的最长突起长度；免疫细胞化学检测GAP-43蛋白表达，并测定平均灰度值。结果DMEM组离体培养RGCs于6～8d死亡，而rhEPO组RGCs能存活10～12d，存活时间较DMEM组显著延长（P〈0．01）。培养2d、4d、6d时，DMEM组最长突起长度依次为（42．90±4．71）μm、（79．74±8．49）μm、（110．02±10．79）μm，rhEPO组依次为（55．47±7．07）μm、（100．16±7．78）μm、（118．63±11．50）μm，培养2d、4d时rhEPO组与DMEM组相比差异非常显著（P〈0．01），6d时差异显著（P〈0．05）。2组细胞在培养2d时GAP-43蛋白的表达水平较高，4d时GAP-43蛋白表达到高峰。6d时GAP-43蛋白的表达水平明显降低。各时间点rhEPO组RGCsGAP-43蛋白的表达均较DMEM组有明显增高，与DMEM组相比均有非常显著差异（P〈0．01）。结论rhEPO可延长离体培养RGCs的存活时间和促进其突起的生长。上调离体培养RGCs GAP-43蛋白的表达。rhEPO促进RGCs突起生长的作用可能通过上调RGCs GAP-43蛋白的表达来实现。[眼科新进展2007；27（3）：138-192]
- 牛建军曾玉晓王一阴正勤王仕军陈中山刘康
- 关键词：重组人促红细胞生成素视网膜神经节细胞细胞培养生长相关蛋白-43
- 晶状体蛋白在视神经损伤及疾病保护和治疗中的作用
- 王一赵海生王艳华吴楠应希刘康王晓琴张莉刘志敏
- 10.混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞保护作用的在体研究
- 利用大鼠视神经横断伤模型,研究混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞的保护作用.方法 将成年Long evens大鼠21只,随机分成3组,分别为伤后1,2,3周组,每组7只.建立视神经完全损伤模型,于视神经切断前7天经上丘及外...
- 刘志敏王一任蕾刘康
- 11.α、β、γ晶状体蛋白保护RGCs存活和突起生长的体外筛选研究
- 既往研究发现晶状体损伤可保护视神经损伤后RGCs存活和促进轴突再生,并证明混合晶状体蛋白具有直接促进的作用,但α、β、γ晶状体蛋白各组分的作用如何尚不清.本研究进一步探明混合晶状体蛋白各组分(α、β、γ)对离体培养的大鼠...
- 刘康王一王艳华牛建军曾玉晓
- α晶状体蛋白促大鼠RGCs存活和突起生长的体外研究
- ＜正＞目的:既往研究发现晶状体损伤可保护视神经损伤后RGCs存活和促进轴突再生,并证明混合晶状体蛋白是具有直接的促进作用的物质,开辟了全新的研究思路和方向,但其作用机制尚不清楚。本研究为进一步阐明混合晶状体蛋白的作用机制...
- 刘康王一王艳华牛建军曾玉晓
- 关键词：突起生长
- 文献传递
- 视网膜组织固定效果的探讨
- 刘康
