刘健
- 作品数:152 被引量:364H指数:10
- 供职机构:上海市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目国家高技术研究发展计划上海市科技兴农推广项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学政治法律更多>>
- 上海地区猪圆环病毒2型全基因组的克隆与序列分析
- 本研究参照国外发表的猪圆环病毒2型(PCV-2)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,从上海地区临床病料中提取PCV-2基因组DNA,并进行PCR全基因扩增.回收PCR产物,将其插入pMD 18-T载体,并对筛选出的阳...
- 刘健鞠厚斌张维谊杨德全王建刘佩红周锦萍
- 上海地区猪流感病毒的分离与鉴定被引量:1
- 2020年
- 本研究对猪流感病毒上海分离株进行了鉴定和病毒特性的相关研究。采用血凝试验、电镜观察、血凝素和神经氨酸酶基因测序等方法对分离株进行了病毒的鉴定,采用形态学、化学和生物学方法对分离株进行了病原特性研究。结果显示分离株为A型猪流感病毒,属于欧洲类禽H1N1亚型,病毒粒子在透射电镜下为圆形、椭圆形或多形性,病毒粒子直径大小80~120 nm,血凝素为热稳定型,病毒耐50℃,能凝集鸡、人O型和猪红细胞,对乙醚、氯仿和酸敏感,对10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚无致死性。研究表明上海地区猪群中存在对环境具有较强耐受性,且对鸡胚低致病性的A型H1N1亚型猪流感病毒。
- 刘健杨显超葛菲菲李鑫杨德全沈海潇鞠厚斌王建赵洪进
- 关键词:H1N1猪流感病毒
- 猫杯状病毒高致病性毒株特性研究进展
- 2023年
- 猫致死性全身系统性疾病(Virulent systemic disease,VSD)由猫杯状病毒高致病性毒株(Virulent systemic feline calicivirus,VS⁃FCV)引起。患猫感染后表现为全身性症状,累及多个器官组织,引起高致死率。由于尚未发现VS⁃FCV相应的临床和遗传标志物,且疫苗免疫效果有限,给猫杯状病毒的防治带来了新的挑战。本文通过综述VS⁃FCV引起的流行病学特征、临床特点、病原学特性和生物学特性方面的研究进展,对该毒株的判定方法进行讨论,以期为其临床诊断和相应疫苗的研发提供理论依据。
- 桂亚萍刘健白艺兰王建赵洪进
- 上海市原种鸡场禽白血病净化基础分析被引量:4
- 2020年
- 2015-2019年间,通过对上海市4家原种鸡场鸡群禽白血病的病原学监测,证实该病在鸡群中存在低水平感染。从基本概况、设施设备、生物安全、生产性能和临床表现、疫病净化情况等5个方面开展流行病学调查与分析,确定上海市原种鸡场具备净化基础,可推进实施该病的全面净化。
- 赵乐乐赵乐乐夏炉明李凯航刘健杨显超吴秀娟周锦萍
- 关键词:禽白血病
- 一种用于猪Delta冠状病毒检测的试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种用于检测猪Delta冠状病毒的试剂盒及检测方法。本发明试剂盒包括RT‑PCR反应体系,其包括引物探针混合液,所述引物探针混合液包括一引物对和一探针,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ...
- 杨德全鞠厚斌刘佩红周锦萍王建刘健葛菲菲李鑫杨显超邓波葛杰白艳艳
- 文献传递
- 六株鸽源新城疫病毒的分离、鉴定及生物信息学分析被引量:11
- 2014年
- 新城疫是严重危害世界养禽业的一种禽类传染病。近年来,鸽新城疫的流行越来越严重,引起了养殖户和兽医工作者的广泛关注。本研究在4批发病鸽组织病料中分离到了4株鸽源新城疫强毒株和2株鸽源弱毒株。病毒分离株经鸡胚有限稀释法纯化5次后,新鲜尿囊液用于提取病毒RNA。经RT-PCR扩增、测序得到分离株的F基因和HN基因序列。通过对F基因的遗传进化分析发现,4株鸽源强毒株属于ClassⅡ基因Ⅵb亚型,2株鸽源弱毒株与Class II基因II型疫苗株La Sota高度同源。进一步遗传进化分析结果显示,4株鸽源新城疫病毒强毒株与目前国内流行株属于同一遗传分支,这些毒株与欧洲流行株亲缘关系十分相近,而与中国20世纪90年代鸽源分离株遗传距离稍远,因此推测当前鸽源流行强毒株可能源自欧洲。生物信息学分析显示鸽源毒株HN蛋白345~353位的一个线性抗原表位发生了改变,而血清学实验显示La Sota疫苗株和鸽源毒株的交叉血凝抑制存在明显差异,暗示鸽源毒株已经发生了抗原性变异。因此,使用鸡疫苗株La Sota免疫鸽存在免疫失败的风险,需要研发鸽专用新城疫病毒疫苗用于鸽新城疫的防疫工作。
- 李仕超仇旭升刘开春周锦萍刘健鞠厚斌谭磊孙英杰宋翠萍刘佩红丁铲
- 关键词:新城疫病毒鸽源F基因HN基因
- 抗猫传染性鼻气管炎病毒药物的体外筛选被引量:10
- 2017年
- 试验旨在检测抗病毒药物对猫传染性鼻气管炎病毒的有效性。利用F81细胞建立抗猫传染性鼻气管炎病毒药物的体外筛选模型,采用MTT法检测,计算病毒的抑制率。结果显示,阿昔洛韦、利巴韦林、L-赖氨酸、板蓝根和黄芪多糖的半数有效浓度(IC50)分别为9.5、3.3、3.4、161.0和4.7μg/mL,聚肌胞IC_50为6.0mg/mL,治疗指数TI分别为76.8、39.3、2 588.0、4.5、78.7和5.8。结果表明,L-赖氨酸和黄芪多糖为高效抗猫传染性鼻气管炎病毒药物。
- 刘健杨显超李凯航李鑫徐锋杨德全葛杰鞠厚斌周锦萍
- 关键词:MTT抗病毒药
- 上海市三株H9N2鸭禽流感病毒全基因遗传进化分析被引量:11
- 2014年
- 为了解上海市鸭群中H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传变异特征,以及与疫苗株A/Chicken/Shan dong/6/1996和A/Chicken/Shanghai/F/1998之间的遗传距离,对2007年和2009年分离自上海市鸭气管和泄殖腔样品采用荧光RT-PCR检测,将H9亚型禽流感病毒核酸阳性样品处理后,经鸡胚尿囊腔接种分离病毒,HI进一步确定血凝素(haemagglutin,HA)亚型,随后进行了全基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明:3株分离毒株为H9N2亚型鸭禽流感病毒,HA蛋白裂解位点的氨基酸组成为PARSSRGLF,符合低致病性禽流感病毒特征,均属于经典的H9N2 Ck/Bei群系;NA基因均属于Y280系;NP、PA基因和A/Goose/Guangdong/1/1996(H5亚型)归为一群;PB2和M基因属于Qa/HK/G1/97系;NS基因仍为Ck/Bei系;2007年的分离株和2009年的分离株在PB1基因上分属不同亚群。3株病毒的HA1基因与疫苗株A/Chicken/Shandong/6/1996和A/Chicken/Shanghai/F/1998之间的遗传距离均大于7%。由此可见,3株鸭H9N2亚型毒株可能是由不同禽流感病毒基因亚群间发生自然重排的产物,现有疫苗对分离株的保护性需要进一步评估。
- 葛菲菲刘健杨德全鞠厚斌葛杰周锦萍
- 关键词:H9N2亚型禽流感病毒遗传进化分析
- 检测猪瘟病毒的商业化荧光PCR试剂盒比对验证被引量:2
- 2015年
- 为了比较猪瘟病毒6种荧光PCR检测试剂盒的使用效果,本研究采用标准毒株、疫苗与猪瘟阳性组织3类样品,对这些试剂盒的敏感性、特异性、重复性及有效期符合率进行比较。结果显示,试剂盒差异较大,仅有国外试剂盒和2家国产试剂盒与预期的结果一致,其对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型以及阴性猪样品的核酸无交叉反应,重复性与再现性均为理想,在有效期内检测结果没有发生变化。本研究开展检测猪瘟病毒试剂盒验证试验,这将为猪瘟的病原学诊断及实验室开展其它试剂盒验证提供参考。
- 鞠厚斌杨德全葛菲菲刘健李鑫周锦萍
- 关键词:猪瘟病毒荧光PCR试剂盒
- 猪流行性腹泻病毒研究现状被引量:12
- 2013年
- 概括了猪流行性腹泻病毒的基因分型和流行病学,阐述了猪流行性腹泻病毒与机体免疫系统的相互作用,在哺乳动物细胞中的增殖特点,以及毒力相关基因的预测,分析了病毒的遗传变异特点,讨论了控制猪流行性腹泻所面临的问题。
- 杨德全鞠厚斌葛菲菲宁昆刘健王建周锦萍
- 关键词:猪流行性腹泻病毒生物学特性流行病学