刘乐锋
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 金黄色葡萄球菌重组GapC蛋白的GAPDH活性及免疫原性分析被引量：9
- 2008年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)表面GapC蛋白的GAPDH活性、免疫原性及免疫保护作用,应用PCR方法扩增出S.aureus的gapC基因,插入到pQE-30载体相应位点,构建重组质粒pQE/gapC。将其导入宿主菌E.coliM15(pREP4)后,IPTG诱导表达。重组蛋白纯化后进行GAPDH活性检测,并与灭活全菌体分别免疫健康家兔。然后,应用ELISA方法检测血清中IgG抗体水平及IFN-γ、IL-4细胞因子浓度,并用1.0×108CFU/mLS.aureus菌株Wood46对免疫家兔攻毒。SDS-PAGE结果显示,GapC蛋白在E.coliM15(pREP4)中获得表达;经GAPDH活性检测及WesternBlot检测,重组蛋白具有较高的GAPDH活性和抗原特异性;经ELISA检测,GapC蛋白及全菌体组兔血清中IgG抗体水平迅速升高,并在加强免疫后第28天达到最高(1:64000),加强免疫后第14d,血清中细胞因子IFN-γ和IL-4浓度与对照组相比,显著升高(P<0.05),而全菌体免疫组升高不明显(P>0.05);攻毒结果为蛋白免疫组家兔获得一定的免疫保护(4/5)。以上结果表明,表达的重组GapC蛋白具有GAPDH活性、较好的免疫原性及免疫保护力,可作为深入研究S.aureus基因工程疫苗的良好靶向。
- 朱洪伟朱战波崔玉东张晶刘乐锋朴范泽
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫原性免疫保护
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 穆飞飞孙龚刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龚刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌LukF和LukS蛋白免疫保护作用研究
- 金黄色葡萄球菌是一种引起人和动物疾病的最重要致病菌,其主要致病物质是外毒素,其中杀白细胞素能在白细胞膜上形成穿孔而破坏白细胞。杀白细胞素由F和S双组分构成,F和S蛋白组分在白细胞膜上以特定比例聚合而形成膜孔道。但至今为止...
- 刘乐锋
- 关键词：金黄色葡萄球菌杀白细胞素免疫保护
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌凝集因子A的免疫原性被引量：7
- 2009年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)凝集因子A(ClfA)免疫原性及免疫保护作用,应用PCR方法扩增出金黄色葡萄球菌Newman、Wood46和HLJ23-1株的clfa基因并进行序列分析,再将Newman株的clfa基因插入到pQE-30载体上,导入宿主菌Escherichia coli M15(pREP4)并诱导表达和纯化ClfA重组蛋白。用纯化的ClfA免疫小鼠,检测血清中抗体和细胞因子水平,首次免疫后35 d时用金黄色葡萄球菌Wood46、HLJ23-1、Newman株对小鼠攻毒。结果发现:clfa基因序列高度保守;ClfA重组蛋白在E.coli M15中获得表达;在首次免疫后35 d时血清抗体效价和细胞因子浓度与对照组相比,均显著升高(P<0.05);攻毒结果为蛋白免疫组小鼠获得一定的免疫保护。由此表明,ClfA重组蛋白有较好的免疫原性和免疫保护力。
- 冯昊刘乐锋迟佳琦王宁李闰婷佟春玉马金柱朱战波崔玉东
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫原性
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龑刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递
