光丽霞
- 作品数:63 被引量:153H指数:7
- 供职机构:第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学更多>>
- 肿瘤坏死因子α与乙型肝炎肝细胞损伤的关系
- 1997年
- 用原代肝细胞培养、肝细胞内HBV-DNA/PCR扩增、放射配体结合及单克隆抗体技术等先进手段研究TNFα与乙型肝炎肝细胞损伤的关系,发现HBV感染可增强肝细胞对TNFα毒性作用的敏感性,能促进活化单核巨噬细胞释放TNFα。
- 顾长海王宇明闵伟琪袁良平光丽霞李奇芬彭齐荣
- 关键词:乙型肝炎肝细胞损伤单核巨噬细胞肿瘤坏死因子毒性作用
- 乏氧条件启动HRE调控HSV-TK/GCV效应链对人肺腺癌A549细胞杀伤作用的观察被引量:1
- 2008年
- 目的:观察由缺氧反应元件(HRE)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)系统对乏氧环境中的人肺腺癌细胞系A549细胞的杀伤作用。方法:将HRE调控HSV-TK和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双基因共表达的真核载体pHRE-TK通过脂质体导入A549细胞,分别在乏氧(O2浓度为3%)和常氧(O2浓度为21%)环境中培养,荧光显微镜观察重组载体转染A549细胞后报告基因EGFP表达变化,并进行荧光光密度(FOD)分析;再予以GCV处理5d后,用MTT法检测GCV对培养细胞的杀伤效果。设立分别仅含有HRE、HSV-TK以及两者均无的3个荧光表达载体(pHRE、pTK、pEGFP)为对照组。结果:在乏氧环境中,由HRE调控的重组载体pHRE-TK和pHRE转染A549细胞后,其FOD值高于无HRE调控的载体pTK和pEGFP转染组P<0.01;而在常氧环境中各组细胞之间FOD值差异无统计学意义,P>0.05。携带HSV-TK基因的重组载体pHRE-TK和pTK转染A549细胞后,细胞对GCV的敏感性均高于无HSV-TK基因的pHRE组细胞,P<0.01;敏感性随GCV浓度增加而增大。在乏氧环境中培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于pTK组(P<0.01),亦高于在常氧环境中培养的pHRE-TK组细胞,P<0.01;而在常氧环境中,pHRE-TK组与pTK组细胞对GCV的敏感性差异无统计学意义,P>0.05。结论:在乏氧的A549细胞内,HRE使报告基因EG-FP表达增强;HRE能增强HSV-TK/GCV系统对乏氧环境中的A549细胞的杀伤效率。
- 司英健光丽霞袁发焕张克斌
- 关键词:腺癌单纯疱疹病毒属胸苷激酶
- 缺氧反应元件增强单纯疱疹病毒胸苷激酶/GCV对乏氧环境Ewing肉瘤细胞杀伤作用的研究被引量:2
- 2006年
- 目的构建一种由缺氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)基因的真核表达载体,观察HRE能否增强HSV-TK/GCV(gancyclovir,GCV)系统对乏氧环境中的人Ewing's肉瘤细胞系SK-ES细胞的杀伤作用,为弥补放、化疗的不足,探索有效的治疗方法。方法(1)将合成的HRE片断,插入到pIRES_2- EGFP(pIRES_2-EGFP)的双顺反子荧光蛋白报告基因的真核启动子的增强子部位,获得重组质粒pHRE;以PCR法扩增HSV-TK基因中TK基因片断,将其克隆到pIRES_2-EGFP及pHRE的双顺反子荧光蛋白报告基因上游的多克隆位点,获得重组质粒pTK及pHRE-TK。(2)通过脂质体将pHRE- TK、pHRE、pTK及pIRES_2-EGFP导入SK-ES细胞,分别在乏氧(O_2浓度为3%)和富氧(O_2浓度为21%)环境中培养,荧光显微镜观察报告基因增强性绿色荧光蛋白表达变化,并进行荧光吸光度分析;再予以GCV处理5 d后,用MTT法检测GCV对培养细胞的杀伤效果。结果(1)测序结果证实,重组质粒pHRE含HRE片断,pTK及pHRE-TK含HSV-TK片断,均为单拷贝正向插入,序列正确。(2)对比各组细胞EGFP荧光吸光度值发现:①在乏氧环境中培养,pHRE和pHRE-TK组细胞荧光吸光度值高于在富氧环境培养的荧光吸光度值(P<0.01);②在乏氧环境培养,pHRE组和pHRE-TK组细胞荧光吸光度值高于pTK组和pIRES_2-EGFP组(P<0.01);③在富氧环境培养的各组细胞之间荧光吸光度值差异无统计学意义(P>0.05)。(3)对比GCV对各组细胞杀伤效果发现:①在乏氧、富氧两种环境培养的pHRE-TK和pTK组细胞对GCV的敏感性均高于pHRE组细胞(P<0.01),敏感性随GCV浓度增加而增大;②在乏氧环境培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于pTK组(P<0.01),而在富氧环境中培养的pHRE-TK组与pTK组细胞对GCV的敏感性差异无统计学意义(P>0.05);③在乏氧环境培养的pHRE-TK组细胞对GCV的敏感性高于在
- 司英健光丽霞袁发焕张克斌
- 关键词:单纯疱疹病毒属胸苷激酶肉瘤EWING缺氧反应元件
- 重型病毒性肝炎外周血单核细胞分泌IL-1的观察
- 1999年
- 刘建玲光丽霞
- 关键词:重型病毒性肝炎单个核细胞白细胞介素1
- 残肾肾小球毛细血管增生及其意义的实验研究被引量:3
- 1997年
- 为弄清肾小球毛细血管能否增生及其在慢性肾衰发生发展中的作用,采用毛细血管铸型、形态计量等方法,定量观察5/6肾切除大鼠(B组)残肾肾小球毛细血管形态演变和肾功能变化,并以假手术大鼠为对照(A组)。发现B组大鼠术后残存肾小球体积逐渐增大,扫描电镜下发现肾小球毛细血管数目逐渐增多、分支增加,透谢电镜下在扩展的系膜区内发现新生的毛细血管,形态计量显示单个肾小球毛细血管长度和内表面积逐渐增加,而肾小球毛细血管长度密度、面积密度、以及肾实质体密度与A组无显著差别。说明残肾之肾小球毛细血管能显著增生,这种增生是一种与肾小球囊腔扩大成比例的有功能的代偿性增生。
- 袁发焕史景泉光丽霞许平庆
- 关键词:慢性肾衰残肾
- HBV感染的单核细胞分泌TNFα和PGE_2的改变及其意义探讨被引量:13
- 1995年
- 本文作者用聚合酶链反应(PCR)技术检测了70例慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞内HBvDNA,并用双抗体夹心法、放射免疫分析法,分别检测了单核细胞培养上清肿瘤坏死因子α(TNFα)、前列腺素E2(PGE2)含量,结果显示,单核细胞内HBVDNA阳性者培养上清TNFα含量显著增高,PFE2含量显著下降。临床病情越重,单核细胞内ABVDNA检出率越高,其培养上清TNFα含量越高,PGE2含量越低。提示HBV感染单核细胞可导致其分泌功能异常,从而加重肝组织损害。
- 光丽霞顾长海
- 维生素E对5/6肾切除所致慢性肾衰大鼠的保护作用
- 1998年
- 目的:观察抗氧化剂维生素E对慢性肾衰之残存肾组织和残肾功能的保护作用。方法:在5/6肾切除大鼠慢性肾衰模型上,以假手术大鼠为对照,采用形态计量和生化测定方法,对比分析术后30、60、90、120d给予或不给予维生素E治疗的慢性肾衰大鼠残肾纤维化程度,残肾功能及其活性氧化代谢状况等指标。结果:大鼠术后残存肾小球呈代偿性肥大、肾小球毛细血管代偿性增生的同时,有显著的氧自由基反应亢进、抗氧化能力减弱、肾小球硬化、滤过膜增厚、肾间质纤维化、肾组织羟脯氨酸含量增高、肾功能进行性恶化;而用维生素E治疗的大鼠,氧自由基反应和抗氧化能力趋于正常,肾小球硬化、滤过膜增厚、肾间质纤维化和肾组织羟脯氨酸含量增高的程度显著减轻,肾小球代偿性肥大和肾小球毛细血管代偿性增生的发生时间后移,肾功能恶化的速度显著减慢。结论:维生素E通过其抗氧化作用,显著抑制5/6肾切除所致慢性肾衰残肾组织纤维化,延缓残肾功能进行性恶化的速度,而对代偿性肾小球肥大和毛细血管增生无明显直接影响。
- 袁发焕史景泉光丽霞廖立生
- 关键词:维生素E肾切除慢性肾衰
- 重庆地区汉族儿童β_(2)-肾上腺素能受体单倍型与哮喘相关性的研究被引量:4
- 2001年
- 目的 探讨 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)单倍型与重庆汉族哮喘儿童哮喘的相关性。方法 采用PCR 限制性酶切分析法检测 76例汉族哮喘儿童 β2 AR16、2 7位多态性 ,并与 10 0例健康人进行对照 ,统计分析 β2 AR单倍型与哮喘病情严重度的关系。结果 对照组 β2 AR甘氨酸 (Gly) 16及谷氨酰胺 (Gln) 2 7等位基因频率分别为 0 .42、0 .70 ,哮喘组为 0 .5 0、0 .72 ,后者与对照组比较 ,无显著差异 (P >0 .0 5 )。Gly16等位基因及Gly16 Gln2 7单倍型在重度哮喘组中频率分别为 0 .71、0 .47,在 3组中的分布差异显著 (P<0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,以重度哮喘组分布频率较高。结论 Gly16及Gln2 7型 β2 AR多态性不是中国重庆汉族儿童哮喘发病的主要因素 ,但Gly16等位基因与Gly16 Gln2
- 廖伟李为明赵聪敏光丽霞王金生奚敏艾友萍温恩懿
- 关键词:哮喘儿童单倍型
- 薄层色谱法纯化卟啉锰修饰的TFO被引量:2
- 2002年
- 目的 筛选分离纯化卟啉锰 TFO 吖啶化合物的简单有效的方法。方法 以固相亚磷酰胺法合成吖啶、6碳氨基连接臂修饰的TFO ,并以温和法切割和脱保护 ;四苯基卟啉四羧酸经金属化、酯化后 ,与上述TFO偶联 ;分别以变性聚丙酰胺凝胶电泳、寡核苷酸纯化柱、薄层色谱法分离纯化偶联反应产物。结果 以凝胶电泳分离偶联反应产物时 ,偶联反应产物带、卟啉锰活性酯带位于同一水平 ,未分离出独立的卟啉锰 TFO 吖啶化合物带。以寡核苷酸纯化柱分离偶联反应产物时 ,紫外分光光度仪检测结果显示 ,回收物仍为卟啉锰 TFO 吖啶化合物与游离的卟啉锰活性酯的混合物。以薄层层析分离偶联反应产物时 ,在卟啉锰活性单酯带后 ,出现一条绿色月牙型带 ,紫外光光谱分析显示 ,此带回收物同时具有寡核苷酸和卟啉锰的特征吸收峰 (UVλmax =2 6 0、4 6 8nm) ,质谱分析结果证实 ,回收物分子量实测值与卟啉锰 TFO 吖啶化合物理论一致。结论 薄层色谱法可简单有效分离纯化卟啉锰 TFO 吖啶化合物。
- 光丽霞袁发焕刘立赵聪敏温恩懿奚敏艾友萍王升启王小红姜中兴
- 关键词:卟啉锰薄层色谱
- 维生素E对大鼠残肾纤维化的抑制作用被引量:3
- 1997年
- 观察维生素E对慢性肾衰残肾组织进行性纤维化的抑制作用。方法在5/6肾切除大鼠慢性肾衰模型上 ,以假手术大鼠为对照 ,采用形态计量和生化测定方法 ,对比分析术后30、60、90、120天给予或不给予维生素E治疗的慢性肾衰大鼠残肾纤维化程度。结果大鼠行5/6肾切除术后 ,在残存肾小球代偿性肥大、肾小球毛细血管代偿性增生的同时 ,肾小球显著硬化 ,滤过膜显著增厚 ,肾间质显著纤维化 ,肾组织羟脯氨酸含量显著增高 ;而用维生素E治疗的大鼠 ,肾小球硬化、滤过膜增厚、肾间质纤维化和肾组织羟脯氨酸含量增高的程度显著减轻 ,肾小球代偿性肥大和肾小球毛细血管代偿性增生的发生时间后移。结论维生素E能显著抑制5/6肾切除所致慢性肾衰残肾组织的纤维化 ,对其代偿性肾小球肥大和毛细血管增生无明显直接影响。
- 袁发焕史景泉光丽霞廖立生
- 关键词:维生素E肾功能衰竭