俞冠翘
- 作品数：32 被引量：112H指数：7
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 苜蓿根瘤菌固氮酶基因启动子P1转录起始点下游顺序(DS)的特性被引量：5
- 1996年
- 自生状态的苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)nifHDK操纵子的启动子P1能被微氧诱导而呈高水平表达,而fixABCX操纵子的启动子P2则呈微弱的表达.P1和 P2的 DNA顺序从转录起始点到上游-160处具有 85％的同源性,但从转录起始点到翻译起始点的核苷酸顺序则完全不同.用P1转录起始点下游从+17到+61核苷酸的DNA片段(DS)取代P2区的相应的DNA顺序,在自生状态微氧诱导条件下能提高P2的表达水平,在大肠杆菌中有NifA存在时P2亦呈高水平表达,说明P1和P2区的DS顺序是决定P1和P2自生状态微氧诱导条件下表达或异源表达差异的根本原因.在共生状态下P2的表达不依赖启动子下游顺序.采用引物延伸法测定 P2的转录起始点,发现 P2区当引入 P1区的 DS后不改变它的转录起始点.由于P2不论有DS的插入与否均不影响其在根瘤菌共生状态的正常表达,因此P2在自生状态的根瘤菌中与共生状态时的表达调节将有所不同.
- 高云峰吴桐朱家璧俞冠翘沈善炯
- 关键词：苜蓿根瘤菌启动子转录
- 大豆早期结瘤素基因enod2B启动子在水稻中的表达受结瘤因子诱导被引量：7
- 2004年
- 在根瘤菌与宿主豆科植物形成的共生关系中,根瘤菌分泌的结瘤因子是宿主专一性的主要决定因子.结瘤因子信号能够诱导豆科植物根毛细胞质膜去极化、离子流动和早期结瘤素基因的表达以及根毛变形、皮层细胞分裂和根瘤原基形成等与共生有关的表型变化.水稻是重要的粮食作物,能否对结瘤因子信号产生应答反应是最终实现水稻结瘤固氮的关键因素.将大豆早期结瘤素基因Gmenod2B的启动子与报告基因β-葡萄糖苷酶(GUS)基因融合构建成嵌合基因Gmenod2Bp-GUS,以此嵌合基因作为探索水稻细胞感受结瘤因子信号的分子标记.通过根癌农杆菌介导的遗传转化系统,获得了携带嵌合基因Gmenod2Bp-GUS的水稻再生植株.以广宿主根瘤菌NGR234(pA28)分泌的结瘤因子作为探针,检测转基因水稻中嵌合基因Gmenod2Bp-GUS的表达.结果表明,转基因水稻中大豆早期结瘤素基因enod2B启动子的表达可以受结瘤因子诱导,仅在水稻根部的皮层薄壁细胞和内皮层细胞中呈特异性表达,并且受到氮源的调控.推测在水稻中可能存在结瘤因子所诱导的豆科早期结瘤素表达的类似机制.
- 王彦章俞冠翘沈善炯朱家壁
- 关键词：大豆结瘤因子转基因水稻GUS活性根瘤菌
- 苜蓿中华根瘤菌Rm1021中新的共生相关基因的克隆、鉴定及表达研究
- 邹华松俞冠翘何志水宋东亮戚铭盛刘影
- 本项目主要研究内容：（1）克隆受nifA基因调节的启动子。（2）筛选共生相关基因。拟解决的关键技术：本项目是用定点突变获得共生相关基因的突变体，对共生的表型进行鉴定，这是整个研究的基础。在确定了共生基因以后，再对它的功能...
- 关键词：
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌相关基因克隆
- 重组大豆根瘤菌的研制
- 俞冠翘戴小密朱家璧皱华松沈善炯
- 该项目应用遗传工程技术构建重组大豆根瘤菌二株，其中菌株Sinorhizobium fredii LMG101在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率，接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。阐明阴沟肠杆菌nifLA操纵子表达的氧调节...
- 关键词：
- 关键词：大豆根瘤菌土著菌竞争结瘤
- 接种大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)遗传工程菌株LMG101对大豆的增产效应被引量：19
- 2003年
- 笔者曾报道带外源肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA的大豆根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)工程菌株LMG10 1在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率 ,用其接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。本项工作通过 3年的田间小区试验 ,对工程菌S .frediiLMG10 1的田间施用效果进行了研究。试验表明 ,接种工程菌S .frediiLMG10 1能有效地提高大豆的结瘤固氮效率和大豆产量。接种工程菌S .frediiLMG10 1的大豆植株固氮酶活力分别比对照和接种出发菌植株高 3.1倍和 2 .1倍 ,与之相应工程菌占瘤率也较高 ,大豆田间产量分别比对照和接种出发菌提高 10 %和 5 %以上 ,统计差异显著 (P <0 .0 5 )。
- 戴小密刘彦杰叶小梅朱万宝许玲朱家壁常志州黄红英马艳俞冠翘
- 关键词：大豆根瘤菌增产效应大豆NIFA基因共生固氮
- 异源nifA基因对苜蓿中华根瘤菌nifA突变体的互补分析被引量：4
- 2006年
- 为深入研究苜蓿中华根瘤菌NifA的特性,分别用组成型表达的慢生型大豆根瘤菌和紫云英根瘤菌的nifA基因互补苜蓿中华根瘤菌nifA突变体,观察其共生表型.结果表明,慢生型大豆根瘤菌和紫云英根瘤菌nifA基因不能互补苜蓿中华根瘤菌nifA突变体的共生表型.以苜蓿中华根瘤菌nifA突变体为遗传背景,利用全基因组微阵列实验比较分析引入异源nifA基因后产生的基因表达谱的变化.结果显示,苜蓿中华根瘤菌自身NifA蛋白引起238个基因的表达发生变化.这些表达差异的基因分属共生、能量和中心代谢、持家、细胞结构与运输等生物学功能组.慢生型大豆根瘤菌、紫云英根瘤菌和阴沟肠杆菌的NifA蛋白分别引起了20,7和9个基因的表达发生变化.这些基因主要是固氮相关基因,但差异不及苜蓿中华根瘤菌NifA互补菌明显.以苜蓿中华根瘤菌nifH启动子与lacZ融合基因为报道基因,研究nifH的表达.结果指出,慢生型大豆根瘤菌和紫云英根瘤菌的NifA蛋白只能部分激活苜蓿中华根瘤菌nifH的表达,激活水平分别为苜蓿中华根瘤菌NifA蛋白激活率的70%和50%,与微阵列实验结果相符.
- 姚振华田哲贤戴小密Anke Becker李健严海芹肖琰朱家璧俞冠翘Silvia Rüberg王忆平邹华松
- 关键词：SINORHIZOBIUMMELILOTI
- 苜蓿中华根瘤菌nifA基因突变影响多种细胞学过程(英文)
- 2007年
- 苜蓿中华根瘤菌nifA基因在共生固氮过程中担负着调控功能,nifA突变株Rm1354在宿主植物的根部诱导白色无效根瘤。本文报道Rm1354在自生状态下的表型变化。nifA的突变导致根瘤菌在半固体培养基上泳动变慢,胞外蛋白含量降低。有趣的是,Rm1354在延宕期间高丝氨酸内酯含量比野生型低,在指数期和静止期却比野生型高。另外,突变株Rm1354的竞争结瘤能力也大大减弱。这些结果揭示了苜蓿中华根瘤菌nifA基因对许多细胞学过程都有调控作用。
- 巩子英朱家璧俞冠翘邹华松
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌NIFA胞外蛋白
- NifA蛋白的N末端结构域决定肺炎克氏杆菌和阴沟肠杆菌中NifA蛋白的温度敏感性被引量：6
- 2000年
- NifA蛋白是固氮基因的中心调节物 .它激活nif基因转录时依赖于σ5 4 RNA聚合酶全酶 .肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)NifA蛋白由 3个结构域组成 ,即功能不明的N末端结构域 ,具有ATP酶活性的中心催化结构域和C末端DNA结合结构域 .KpNifA蛋白对温度敏感 ,而阴沟肠杆菌 (Enterobactercloacae ,Ec)NifA蛋白的温度敏感性不如KpNifA蛋白 .
- 顾剑颖俞冠翘朱家璧沈善炯
- 关键词：NIFA蛋白温度敏感肺炎
- 苜蓿中华根瘤菌Sm NifA蛋白与阴沟肠杆菌Ec NifA蛋白功能差异的研究被引量：7
- 2003年
- nifA基因是固氮基因nif的调节基因,其产物NifA蛋白是固氮过程的中心调节因子。将多拷贝组成型表达的苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti,Sm)nifA基因或阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae,Ec)nifA基因引入苜蓿中华根瘤菌野生型菌株Sm 1021和苜蓿中华根瘤菌nifA突变型菌株SmY中,并检测这些苜蓿中华根瘤菌感染苜蓿之后根瘤的表型及固氮酶活性。实验结果表明,苜蓿中华根瘤菌NifA蛋白和阴沟肠杆菌NifA蛋白在苜蓿中华根瘤菌中的功能有明显差异。在野生型菌株Sm 1021中,引入多拷贝SmnifA基因对宿主根瘤固氮效率的促进作用明显优于引入多拷贝Ec nifA基因的作用。引入多拷贝Sm nifA基因的SmY菌株(nifA突变型)能够共生固氮,而引入Ec nifA基因的SmY菌株仍然不能固氮。氨基酸序列同源性分析显示,N末端结构域是Sm NifA蛋白和Ec NifA蛋白同源性最低的功能域。进一步研究表明,Sm NifA蛋白的N末端结构域在互补苜蓿中华根瘤菌nifA突变型菌株SmY的固氮功能时是必需的。
- 杨成涛俞冠翘沈善炯朱家璧
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌阴沟肠杆菌同源性
- 苜蓿中华根瘤菌烯脂酰ACP还原酶基因fabI1的功能研究被引量：3
- 2009年
- 我们先前的工作表明,苜蓿中华根瘤菌的烯脂酰ACP还原酶基因fabI1在nifA突变根瘤中表达水平降低.本研究构建了fabI1的定点插入突变体.与野生型相比,突变菌株的生长速度变慢,在高浓度NaCl培养基上的生长能力降低.在半固体培养基上,该突变体的涌动能力完全丧失.在共生过程中,突变菌株在宿主植物上延迟结瘤,形成根瘤的能力下降.虽然苜蓿中华根瘤菌中的烯脂酰ACP还原酶基因fabI2的序列与fabI1有66%的一致性,但fabI2不能恢复fabI1突变体的表型,揭示了这两个基因在功能上的差异.
- 刘影朱家璧俞冠翘邹华松
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌表型结瘤
