何大水
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基因疫苗脾内免疫制备抗人c-kit单克隆抗体及其初步鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:用基因脾内免疫方法制备抗人c-kit单克隆抗体,并通过对抗体生物学特性的初步研究,确定该方法制备抗体的可行性。方法:利用分子克隆方法构建重组质粒pcDNA3.1/c-kit胞外区,脾内免疫BALB/c小鼠一次,通过杂交瘤技术制备抗人c-kit单克隆抗体。采用流式细胞术、Western blot方法初步鉴定制备的抗体。结果:目的基因片段c-kit胞外区正确插入质粒pcDNA3.1,重组质粒免疫小鼠后通过杂交瘤技术获得了三株分泌抗人c-kit胞外区的杂交瘤细胞株6C4、2C5和5D5,其亚类均为IgM类,识别不同的抗原表位,其特异性与抗人c-kit抗体一致。结论:可用基因脾内一次免疫法制备抗人c-kit单克隆抗体。
- 石琳何大水冯春玲袁向飞屈浩黄丽华张丽艳王冬梅张毅张宇光
- 关键词：C-KIT基因免疫单克隆抗体
- 以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析被引量：1
- 2007年
- 目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmAb。以ELISA法测定mAb的Ig亚类。采用流式细胞术和Westernblot鉴定mAb的特异性和结合活性。以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数。结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAbB6E和2B6B,其Ig亚类均为IgG2a。mAb2B6E的亲和常数为1.81×10-7mol/L,与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性。结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫,再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb,为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径,也为日后改造抗DAFmAb进行靶向治疗研究打下了基础。
- 潘娜石琳黄丽华周立何大水张宇光
- 关键词：DAFDNA免疫单克隆抗体
