龚凤娟
- 作品数：11 被引量：47H指数：3
- 供职机构：吉首大学生物资源与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省研究生科研创新项目湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 禽多杀性巴氏杆菌C48-3株hexABC基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量：2
- 2012年
- 为研究荚膜在禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)致病过程中的作用,本研究利用同源重组基因敲除技术构建禽P.multocida C48-3株荚膜多糖输出蛋白基因hexABC的缺失突变株,并以小鼠为动物模型检测荚膜缺陷对细菌毒力的影响。PCR、RT-PCR和DNA测序结果均表明253 bp的hexC基因下游序列、798 bp的hexB基因全序列和290 bp的hexA基因上游序列完全被四环素抗性基因替代,表明构建了基因敲除突变株C48-3ΔhexABC。电镜观察结果表明突变株荚膜合成能力缺失,对小鼠的致病性试验结果显示突变株毒力基本丧失。本研究获得的无荚膜突变株为进一步研究禽P.multocida的致病机理奠定基础。
- 吾鲁木汗.那孜尔别克张宇凤龚凤娟恩特马克.布拉提白
- 关键词：禽多杀性巴氏杆菌基因敲除荚膜毒力
- 具有ACC脱氨酶活性的绞股蓝内生细菌的分离鉴定及其抑菌促生作用被引量：1
- 2015年
- 采用富集筛选法从绞股蓝根中筛选得到6株具有ACC脱氨活性的细菌,其中菌株JDG-6、JDG-7、JDG-14、JDG-16、JDG-23均具有较强的分泌铁载体能力,但菌株JDG-32没有产铁载体能力。抑菌试验结果显示,菌株JDG-6、JDG-7、JDG-14和JDG16对一种或多种供试菌有抑菌作用,其中菌株JDG-14能抑制大肠埃希菌、藤黄八叠球菌和白色念球菌的生长。促生试验表明,菌株JDG-6、JDG-7和JDG-14均能促进水稻幼苗根的伸长,其中菌株JDG-14的促生作用最为明显,与对照组相比水稻幼苗的根长和根鲜重分别增长了26%和21%。通过形态特征观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,菌株JDG-6、JDG-7、JDG-16和JDG-23属于假单胞杆菌属(Pseudomonas),菌株JDG-14为木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus),而菌株JDG-32为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。菌株JDG-6、JDG-7和JDG-14均具有ACC脱氨酶活性和抑菌活性的促生菌,具有农业应用潜力。
- 张缇吾鲁木汗.那孜尔别克龚凤娟恩特马克.布拉提白
- 关键词：绞股蓝内生细菌ACC脱氨酶促生作用
- 杜仲内生ACC脱氨酶活性细菌的分离鉴定及抑菌活性检测
- 采用富集筛选法从杜仲根中分离到5株具有ACC脱氨酶活性的内生细菌，利用纸片法测定它们的抑菌活性，通过生理生化试验和16S rRNA序列分析对分离菌株进行鉴定，并用大肠杆菌表达系统对ACC脱氨酶进行表达.结果显示：5株杜仲...
- 龚凤娟刘丹丹恩特马克·布拉提白吾鲁木汗·那孜尔别克
- 关键词：内生菌ACC脱氨酶抑菌实验
- 文献传递
- 赤红球菌JDM312环己酮单加氧酶的原核表达及检测
- 2011年
- 通过酶切法从重组质粒pUC18-chnB中得到编码环己酮单加氧酶的chnB基因序列,将其定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-chnB,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE电泳检测表达产物.测序结果表明chnB基因大小为1 623bp,编码由540个氨基酸残基构成的多肽.SDS-PAGE结果显示,表达分子量约为60kDa的带有6×His标签的环己酮单加氧酶,与预期分子量相符,表明成功构建出原核表达质粒并实现了目的蛋白表达,为进一步开展环己酮单加氧酶活性研究奠定了基础.
- 彭哲慧龚凤娟刘丹丹吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：原核表达
- 泡桐内生枯草芽孢杆菌JDB-1草菌素的抑菌活性及其spaS基因的克隆被引量：3
- 2011年
- 用硫酸铵沉淀法从泡桐内生枯草芽孢杆菌JDB-1发酵液中粗提枯草菌素,采用纸片扩散法和琼脂糖扩散法分别检测枯草菌素对细菌和真菌的抑菌活性,采用PCR从菌株JDB-1基因组DNA中扩增出枯草菌素基因spaS,并克隆到pMD18-T载体,测定spaS基因的核苷酸序列.结果表明硫酸铵粗提的枯草菌素对大肠杆菌K12、恶臭假单胞杆菌AS1.1003、赤霉菌JSD-2、赤霉菌JSD-7和白色念珠菌ATCC10123等细菌和和真菌具有较强的抑制活性.DNA测序结果显示spaS基因大小为171bp,与已报道不同菌株spaS基因核苷酸序列的同源性为95%.
- 吴瑞方龚凤娟杨镒蔓恩特马克.布拉提白
- 关键词：枯草芽孢杆菌抑菌活性
- 禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能被引量：9
- 2013年
- 【目的】探讨ompH基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用。【方法】利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29ΔompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR筛选ompH基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证。用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异。【结果】组合PCR、逆转录PCR和DNA测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3ΔompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3ΔompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P<0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3ΔompH的致病性相对减弱。【结论】本实验构建的突变株C48-3ΔompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础。
- 吾鲁木汗.那孜尔别克张宇凤龚凤娟泽田拓士恩特马克.布拉提白
- 关键词：禽多杀性巴氏杆菌粘附
- 具有ACC脱氨酶活性的杜仲和绞股蓝内生细菌及根际细菌的分离鉴定及其植物促生作用
- 为了筛选具有促生作用和生防作用的植物内生细菌和根际细菌，本研究用选择培养基从杜仲和绞股蓝的根及根际中分离到33株能以ACC作为唯一氮源的内生细菌和根际细菌。鉴定结果显示：5株杜仲内生细菌分别为 Pseudomonas k...
- 龚凤娟
- 关键词：ACC脱氨酶基因重组促生作用
- 文献传递
- Pseudomonas koreensis JDM-2株ACC脱氨酶基因的克隆和表达被引量：2
- 2011年
- 应用PCR从杜仲内生Pseudomonas koreensis JDM-2株基因组中扩增出ACC脱氨酶基因acdS,将其克隆到pMD18-T载体并段进行DNA测序,通过BamHⅠ和HindⅢ酶切从重组质粒pMD18ACDS中切下acdS基因序列,将其连接到pQE30质粒的BamHⅠ和HindⅢ位点,构建表达质粒pQE30ACDS,转化大肠杆菌BL21,利用比色法测定ACC脱氨酶活力.测序结果表明,JDM-2菌株acdS基因大小为1 017bp,与已报道不同菌种acdS基因的同源性在86%～99%之间.SDS-PAGE结果显示在大肠杆菌BL21中表达了分子量为38kDa的ACC脱氨酶.酶活性检测结果显示重组菌ACC脱氨酶的酶活力为0.214U/mg.
- 龚凤娟张宇凤刘丹丹恩特马克.布拉提白吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：PSEUDOMONASACC脱氨酶
- 一株抗多杀性巴氏杆菌的白花泡桐内生真菌的分离和鉴定被引量：2
- 2010年
- 采用组织分离法从药用植物白花泡桐叶中分离内生真菌,以动物病源菌多杀性巴氏杆菌C48-3、C51-3和X-73为指示菌种对分离到的7株内生真菌进行了抗菌活性筛选,采用形态特性观察及ITS-rRNA序列分析对具有抗菌活性菌株JSD-8进行鉴定。抑菌试验结果显示,JSD-8菌株对多杀性巴氏杆菌C48-3、C51-3和X-73均具有较强的抗菌活性,其抑菌活性成分值得进一步研究。通过形态特性观察及ITS-rRNA序列分析,将JSD-8鉴定为串珠状赤霉菌。
- 罗江华吾鲁木汗.那孜尔别克李科刘祝祥龚凤娟恩特马克.布拉提白
- 关键词：多杀性巴氏杆菌内生真菌
- 具有ACC脱氨酶活性的内生细菌及根际细菌的分离鉴定及其植物促生作用
- 为了筛选具有促生作用和生防作用的植物内生细菌和根际细菌，本研究用选择培养基从杜仲和绞股蓝的根及根际中分离到33株能以ACC作为唯一氮源的内生细菌和根际细菌。鉴定结果显示：5株杜仲内生细菌分别为Pseudomonaskor...
- 龚凤娟
- 关键词：绞股蓝内生细菌根际细菌ACC脱氨酶促生作用
- 文献传递
