黄锭
- 作品数：12 被引量：30H指数：4
- 供职机构：华东理工大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 适于MDCK细胞大规模贴壁培养和单细胞悬浮培养的无血清培养基
- 本发明涉及现代生物技术之培养基研发技术领域，为一种适于MDCK细胞大规模贴壁培养和单细胞悬浮培养的无血清培养基，它包括21种氨基酸、6种维生素、8种盐类、8种脂类、4种微量元素、2种缓冲剂、1种蛋白水解物、1种酸碱指示剂...
- 谭文松赵亮周燕黄锭
- 适于大规模生产流感疫苗的无血清培养基
- 本发明涉及生物技术之培养基研发技术领域，是一种适于大规模生产流感疫苗的无血清培养基，它包含23种基础代谢营养物、2种核酸类化合物、6种维生素、9种无机盐类化合物、1种剪切力保护剂、2种酸碱度缓冲剂、1种酸碱度指示剂、10...
- 谭文松刘旭平赵亮范里黄锭
- 用于流感疫苗生产的MDCK细胞无血清单细胞悬浮培养体系的开发
- 近年来,因流感病毒侵害,人类健康和动物产品工业每年都要蒙受巨大损失。传统的流感疫苗生产多采用鸡胚培养过程,但该生产过程具易受微生物污染、内毒素残余量高、对流感大流行应急能力差等缺点,因此动物细胞制病毒疫苗工业的发展变得尤...
- 黄锭
- 关键词：MDCK细胞无血清培养基流感病毒
- 细胞密度和营养供给对H1N1流感病毒产率的影响被引量：4
- 2015年
- 探究细胞培养生产流感病毒过程中,高细胞密度引起低单位细胞病毒产率(Svy)的原因及找到解决方法。通过增加微载体浓度以及换液操作获得较高的细胞密度;考察了感染时细胞密度(CCI)和病毒感染用维持培养基对病毒产量和单位细胞病毒产率的影响。在12.6 g/L微载体培养过程中,通过换液操作,可获得高细胞密度,达到1.47×107 cells/m L。在CCI为1×107cells/m L条件时,选择合适的维持培养基,其Svy最高达到5.14×103 virions/cell,比同等条件下用DMEM维持培养基的Svy值提高了近一倍。高密度培养MDCK细胞生产流感病毒时,充分考虑不同阶段的培养条件和营养需求,可以提高细胞密度和单位细胞病毒产率,进而提高流感病毒的产量。该研究结果为工业化生产流感病毒疫苗提供了基础数据。
- 孔文刚黄锭罗剑周琳婷陈则刘旭平谭文松邓献存
- 关键词：MDCK流感病毒
- 适于大规模生产流感疫苗的无血清培养基
- 本发明涉及生物技术之培养基研发技术领域，是一种适于大规模生产流感疫苗的无血清培养基，它包含23种基础代谢营养物、2种核酸类化合物、6种维生素、9种无机盐类化合物、1种剪切力保护剂、2种酸碱度缓冲剂、1种酸碱度指示剂、10...
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- 文献传递
- Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基被引量：4
- 2014年
- 目的采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基。方法在自主研发的含蛋白无血清培养基的基础上,通过Plackett-Burman试验和响应面试验设计考察23组营养物质对MDCK细胞生长的影响,以细胞比生长速率、维持时间及最大活细胞密度作为响应值进行筛选和定量优化。以最优化的因子浓度配制化学成分明确的无血清无蛋白培养基,分别于细胞培养板和搅拌瓶中培养MDCK细胞,考察细胞比生长速率、维持时间和最大活细胞密度3个响应值的大小。结果通过Plackett-Burman试验筛选出4种对MDCK细胞生长具有显著性促进作用的因子:半胱氨酸、苏氨酸、亮氨酸和葡萄糖,苏氨酸和亮氨酸有助于提高细胞比生长速率,半胱氨酸和葡萄糖有利于提高最大活细胞密度;该化学成分明确的无血清无蛋白培养基能很好地支持MDCK细胞悬浮生长,单细胞悬浮培养MDCK细胞时,细胞比生长速率可达0.058/h,最大活细胞密度可达32.65×105个/ml,分别比基础培养基提高了2.15和3.09倍。结论采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化了化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基,为采用MDCK细胞大规模工业化生产流感疫苗奠定了基础。
- 黄锭黎文明赵亮范里叶朝阳刘旭平谭文松罗剑陈则
- 关键词：MDCK细胞
- 微载体浓度与细胞接种密度对MDCK细胞生长的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨微载体浓度与犬肾脏上皮（Madin-Darby canine kidney,MDCK）细胞接种密度之间的关系,及其对MDCK细胞生长代谢的影响。方法实验设计了4组不同的单个微载体周围的细胞数范围,分别为0-10、10-20、20-60和60-120个,每组范围分别通过控制微载体浓度或细胞接种密度得到2组不同条件的实验组,即12 g/L微载体组和5×104个/ml MDCK细胞组、7 g/L微载体组和1×105个/ml MDCK细胞组、3 g/L微载体组和5×105个/ml MDCK细胞组、1 g/L微载体组和1×106个/ml MDCK细胞组,其中1、3、7、12 g/L微载体组细胞接种密度均为2×105个/ml,5×104、1×105、5×105、1×106个/ml MDCK细胞组微载体浓度均为3 g/L。经转瓶培养,每隔24 h取样,进行细胞计数,并检测细胞代谢。按确定的最佳细胞接种密度和微载体浓度培养MDCK细胞72 h后,接种0.01 MOI的甲型流感病毒株A/PR8/34,检测病毒的HA效价。结果当一个微载体周围的细胞数控制在20-60个之间,微载体浓度为3 g/L,细胞接种密度为5×105个/ml时,活细胞密度（viable cell density,VCD）可达3×106个/ml以上,细胞在72-96 h之间,能获得一个较为稳定的平台期,葡萄糖等营养物不会消耗过多以致耗竭,而乳酸、氨等代谢副产物的累积对培养环境造成的压力较小,有利于后期流感病毒的接种,同时还可达到理论最高活细胞值的60%以上。HA效价可达12 log2HA units/50μl。结论控制单个微载体周围细胞数在20-60个之间,细胞生长和代谢显著优于其他条件,且有利于病毒的复制,提高了病毒滴度。为基于MDCK细胞大规模高效生产流感病毒疫苗的工业化生产提供了数据参考。
- 贾涵婧王逸群黄锭罗剑周琳婷陈则刘旭平谭文松周燕
- 关键词：微载体细胞密度
- 基于MDCK细胞高密度培养的甲型流感病毒疫苗生产工艺开发与优化
- 近年来，随着动物细胞培养技术的迅猛发展，其在生物医药生产方面的灵活性、高效性、安全性等优势日渐突显，正被广泛应用于包括病毒类疫苗在内的多种生物医药产品的生产，并将有望取代传统工艺而成为病毒疫苗的主流生产方式。然而以流感疫...
- 黄锭
- 关键词：细胞培养甲型流感病毒流感疫苗生产工艺
- 适于MDCK细胞大规模贴壁培养和单细胞悬浮培养的无血清培养基
- 本发明涉及现代生物技术之培养基研发技术领域，为一种适于MDCK细胞大规模贴壁培养和单细胞悬浮培养的无血清培养基，它包括21种氨基酸、6种维生素、8种盐类、8种脂类、4种微量元素、2种缓冲剂、1种蛋白水解物、1种酸碱指示剂...
- 谭文松赵亮周燕黄锭
- 文献传递
- 感染时间对MDCK细胞中H1N1甲型流感病毒扩增过程的影响被引量：2
- 2015年
- 为了研究感染时间TOI对MDCK细胞中H1N1甲型流感病毒扩增过程的影响,以期合理优化以MDCK细胞培养技术为基础的H1N1流感病毒生产工艺,从而提高其生产效率。在不同TOI条件下以H1N1流感病毒感染MDCK细胞,考察TOI对MDCK细胞生长与代谢动力学以及H1N1流感病毒扩增过程的影响。结果表明,当TOI为72 h时,H1N1流感病毒产量最高。然而单位细胞病毒产率却随TOI增大而呈现下降趋势,进一步剖析TOI与感染时细胞密度CCI对单位细胞病毒产率的影响可知,该现象是由细胞状态而非高细胞密度所致。上述研究揭示了由TOI不同导致的细胞状态差异对MDCK细胞中H1N1流感病毒生产效率的重要性。
- 黄锭刘旭平范里赵亮谭文松陈则
- 关键词：流感病毒MDCK细胞
