马磊
- 作品数：67 被引量：227H指数：9
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 一种抑制蚊子生殖的试剂及其应用
- 一种抑制蚊子生殖的试剂及其应用,属于蚊媒病防治技术领域，尤其涉及MG132在制备抑制蚊子生殖试剂中的应用。本发明利用MG132能够显著抑制蚊的生殖力，且这种抑制作用能够持续到子二代。
- 沈波厉茜茜张成孙艳周丹马磊朱昌亮
- 文献传递
- 淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR,从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T-A克隆、测序、比对,在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1,在大肠杆菌BL21中进行原核表达,将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列,由GenBank登录上网(GenBank/NCBICB074944-51、CB270837,2003年);经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族;CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。
- 李秀兰滕达孙艳马磊朱昌亮
- 关键词：淡色库蚊细胞色素P450原核表达
- 白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段的克隆及其作为基因表达内参照的应用被引量：8
- 2007年
- 目的获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用。方法根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT-PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达。结果获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911 bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上。在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因。结论成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因。
- 焦健华马磊张东辉
- 关键词：白纹伊蚊C6/36细胞PCR
- 淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 目的 获取淡色库蚊CYP4家族新基因。 方法 根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,经PCR鉴定重组成功 ,测序并进行比对。 结果 共克隆出 3 6个阳性克隆 ,将其中 9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析 ,表明为CYP4家族中 9个新的cDNA序列 ,由GeneBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定 ,属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P45 0的多样性及其与抗药性的关系打下基础。 结论 克隆 9个淡色库蚊基因部分序列 ,被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。
- 滕达李秀兰公茂庆马磊陆洵蔚孙艳朱昌亮
- 关键词：淡色库蚊细胞色素P450基因克隆
- 用SSH结合cDNA芯片分离、鉴定蚊虫抗药性相关基因
- ＜正＞ 媒介昆虫对杀虫剂产生抗性是媒介防治中的严重问题。昆虫抗药性是可遗传的复杂生物进化现象,分离抗药性和敏感性相关基因是媒介抗药性分子机制与分子诊断研究的重要基础,并可望建立媒介防治的新方法。近20年来,国外研究者采用...
- 田海生马磊沈波李秀兰朱昌亮
- 文献传递
- 抗药性相关糜蛋白酶基因真核表达载体的构建和鉴定被引量：2
- 2003年
- 目的:构建抗药性相关基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系中高表达糜蛋白酶(chymotrypsin)基因,经T/A克隆测序鉴定后,扩增、纯化质粒,经双酶切后纯化目的片段,克隆到真核荧光表达载体pEGFP-C3中。结果:PCR和酶切鉴定表明,构建成功真核荧光表达载体pEGFP-C3/chymotrypsin。结论:PCR加双酶切鉴定的方法构建表达质粒,迅速省时,结果可靠。
- 杨明夏胡莺沈波马磊李秀兰秦黎朱昌亮
- 关键词：抗药性糜蛋白酶基因表达载体CDNA文库
- 抗牛胰蛋白酶(TRY)抗体的制备和对杀虫剂抗性的初步检测被引量：1
- 2007年
- 目的制备抗牛胰蛋白酶(TRY)多克隆抗体检测杀虫剂抗性,为建立蚊媒菊酯类杀虫剂抗性的现场检测方法奠定基础。方法用牛TRY配成200mg/mL的储备液,与弗氏完全佐剂等体积混合均匀后,按照每只BALB/c小鼠20μg的量背部皮下多点注射,每隔15d加强免疫1次。25d后尾部采血,用ELISA方法测定抗体滴度。45d后眼球采血分离血清,标记分装冷藏备用。用此抗体Western blot研究抗性和敏感品系淡色库蚊成蚊粗提蛋白,观察显色结果。结果所得多克隆抗体小鼠抗牛TRY抗血清滴度达到1:10000,ELISA重复性稳定。在抗TRY抗血清组抗性品系出现约28kD大小的显色带。结论成功制备小鼠抗TRY多克隆IgG抗血清,其检测蚊虫抗性是可行的,值得进一步研究。
- 马磊杨明夏孙艳李秀兰朱昌亮
- 关键词：多克隆抗体胰蛋白酶ELISA
- 淡色库蚊细胞色素P450抗性相关克隆与初步鉴定(摘要)
- 为了探讨细胞色索P450与昆虫抗药性的关系,本文采用一对昆虫细胞色素P450简并引物,以反转录——聚合酶反应从淡色库蚊扩增新异片段,T/A直接克隆法筛选阳性克隆并进行cDNA芯片和逆Northem分析,结果表明: 1、目...
- 朱昌亮田海生马磊李秀兰叶炳辉
- 文献传递
- 淡色库蚊溴氰菊酯抗性与性别相关性分析被引量：3
- 2016年
- 目的研究淡色库蚊抗药性与性别之间的关系。方法建立淡色库蚊溴氰菊酯敏感、抗性两品系的杂交系,对所得子二代抗性分离群体以抗性程度区分为四组不同的表型。转录组测序后对雌雄蚊之间的抗性差异进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR进行表达量的验证。结果子7代三组60min击倒率分别为雌蚊:13.6%、36.4%、34.0%,雄蚊:51.1%、51.1%、82.9%;子8代两组60min击倒率分别为雌蚊:13.0%、19.6%,雄蚊:26.4%、51.9%;子9代五组60min击倒率分别为:雌蚊47.2%、66.7%、14.8%、38.5%、32.9%,雄蚊:68.7%、70.0%、54.8%、41.7%、58.3%,抗性击倒试验显示,杂交蚊雄蚊抗性水平低于雌蚊;定量PCR显示抗性相关基因乙酰葡萄糖胺水解酶蛋白(protein O-GlcNAcase)基因和溶血磷脂酶(lysophospholipase)基因在敏感雄蚊中高表达,而在抗性雌蚊中低表达。结论淡色库蚊溴氰菊酯抗性与性别相关,提示淡色库蚊雌雄蚊间可能存在不同的抗性机制。
- 胡梦雪孙雪丽孙小红许娜周丹孙艳马磊沈波朱昌亮
- 关键词：淡色库蚊性别
- 日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa抗原编码基因的核酸疫苗研究被引量：9
- 1999年
- 为探索日本血吸虫（中国大陆株）２２．６ｋＤａ 抗原（Ｓｊ２２．６）编码基因用作核酸疫苗的可行性，将ｐＣＭＶ／Ｓｊ２２．６基因重组质粒经肌肉注射免疫了一批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠并进行攻击感染试验，结果表明此重组质粒能在小鼠体内持续存在、稳定表达并诱导小鼠产生特异性的抗Ｓｊ２２．６ 抗体。
- 苏川马磊王荣芝邵莉君吴海玮沈蕾范乐明陈淑贞张兆松吴观陵
- 关键词：日本血吸虫核酸疫苗编码基因
