顾冬民
- 作品数：14 被引量：52H指数：4
- 供职机构：南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金南京医科大学校科研和教改项目江苏省国际科技合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 大鼠胰腺发育中巢蛋白的表达变化
- 目的:探讨巢蛋白(nestin)在大鼠胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化。方法:应用RT-PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均...
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 文献传递
- 转醛醇酶与青春期小鼠睾丸间质细胞生成睾酮的相关性研究
- 转醛醇酶是磷酸戊糖途径非氧化阶段的关键酶,其主要作用在于调控磷酸戊糖途径产生5-磷酸核糖和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,前者参与核苷酸、辅酶A和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸等分子的合成代谢;后者是生物体内重要的还原当量,不仅维持...
- 顾冬民
- 关键词：转醛醇酶睾丸间质细胞RT-PCR免疫印迹双向电泳
- 文献传递
- 胸苷磷酸化酶在瘢痕疙瘩中表达的初步研究被引量：2
- 2003年
- 陈晓栋王若宁顾冬民张国成叶顺章
- 关键词：瘢痕疙瘩胸苷磷酸化酶
- 转醛醇酶活性在人肝癌组织中的特异性增高
- 目的比较人肝癌组织与正常肝组织中转醛醇酶核酸转录、蛋白表达及活性变化。方法取人肝癌组织10例,人正常肝组织3例,癌旁组织3例分别测转醛醇酶活性,RT-PCR检测转醛醇酶mRNA表达,Western blot检测转醛醇酶蛋...
- 张锐张一鸣顾冬民周锦勇德伟
- 关键词：转醛醇酶肝肿瘤活性
- 文献传递
- 转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达及其亚型的分离和鉴定被引量：2
- 2002年
- 目的:研究转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达并分离鉴定其亚型。方法:应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)对转醛醇酶在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达进行半定量分析,同时利用双向电泳免疫印迹技术分离、鉴定转醛醇酶的亚型。结果:①转醛醇酶在生后1周小鼠睾丸中表达量平均比成年高47.8%(P<0.005)。②双向电泳Westernblotting示小鼠睾丸转醛醇酶共有10余个亚型,生后1周小鼠睾丸中a8亚型表达量极低,而在成年小鼠睾丸中a8亚型高表达。结论:①生后1周小鼠生长发育快,合成代谢旺盛,转醛醇酶基因绝对表达量高。②a8亚型可能与生殖功能(精子发生、睾酮生成)密切相关。
- 顾冬民程志祥刘颖朱慧德伟
- 关键词：转醛醇酶发育小鼠睾丸
- 大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术的初步建立被引量：5
- 2003年
- 目的:初步建立大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法:应用大鼠成年和胚胎18天胰腺组织提取的总蛋白,对以载体两性电解质pH梯度为第一向的双向电泳关键因素与环节,如样品处理、凝胶制备、电泳参数等进行一系列的优化。结果:获得了分辨率及重复性均很好的双向电泳图谱。结论:通过对各种条件的优化,初步建立了双向电泳技术,为研究胚胎胰腺不同时期特异性蛋白的表达及分子标志打下基础。
- 程志祥熊俊倪雪峰顾冬民德伟
- 关键词：双向电泳胰腺蛋白质组
- 巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表达变化被引量：25
- 2004年
- 目的 :探讨巢蛋白 (nestin)在胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化 .方法 :取三个发育时期的胰腺 ,应用RT PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析 .结果 :在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均有表达 ,阳性细胞主要分布在胰岛 ,在腺泡周围的外分泌中有少量分布 .结论 :随大鼠胰腺的生长发育 ,核酸、蛋白表达下调 .
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 关键词：巢蛋白胰腺逆转录-聚合酶链反应免疫组化
- 转醛酶与青春期小鼠Leydig细胞生成睾酮的相关性研究被引量：4
- 2003年
- 目的 研究青春期小鼠Leydig细胞中转醛酶活性、蛋白表达水平与睾酮生成的相关性。 方法 原代培养Leydig细胞 ,加入HCG刺激 ,酶联免疫法测定培养 2、8小时细胞上清睾酮浓度 ,同时测定转醛酶活性 ,Westernblot检测转醛酶蛋白表达水平。结果 (1)刺激组Leydig细胞上清睾酮浓度明显高于对照组 ,组间存在显著性差异 (2小时P <0 .0 1,8小时P <0 .0 0 1)。 (2 )刺激组Leydig细胞转醛酶活性明显高于对照组 ,组间存在显著性差异(2小时P <0 .0 5 ,8小时P <0 .0 0 1)。 (3)Leydig细胞刺激组和对照组间转醛酶蛋白表达水平无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 HCG促进小鼠Leydig细胞生成睾酮的同时 ,转醛酶活性同步提高 。
- 顾冬民朱慧刘颖徐桦陈丙莺德伟
- 关键词：青春期小鼠LEYDIG细胞睾酮蛋白表达
- 人绒毛膜促性腺激素对K9小鼠睾丸间质细胞转醛醇酶活性的影响被引量：2
- 2002年
- 目的:观察人绒毛膜促性腺激素(hCG)对K9小鼠睾丸间质细胞(K9细胞)转醛醇酶(transaldolase,TAL)活性的影响,探索哺乳动物中TAL活性与睾酮合成之间的关系。方法:酶联免疫法测定细胞培养液中睾酮分泌量,TAL活性测定,蛋白免疫印迹(Westernblotting)分析TAL蛋白变化及RNA印迹法(Northenblotting)分析TALmRNA表达情况。结果:hCG实验组睾酮分泌量及TAL活性比对照组均提高2倍,Westernblotting分析TAL蛋白量无明显变化,而Northenblotting分析TALmRNA表达明显增加。结论:hCG促进K9细胞中睾酮合成的同时TAL活性显著增加,TAL可能与哺乳类K9细胞类固醇激素的合成有关。
- 陈少华顾冬民张一鸣朱慧徐桦德伟
- 关键词：转醛醇酶睾丸间质细胞小鼠
- 血管内皮抑素的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2002年
- 背景与目的:本实验拟在原核系统中表达并纯化人血管内皮抑素(endostatin),制备鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体。方法:设计引物扩增内皮抑素的cDNA,重组入原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,应用纯化产物免疫3只小鼠。结果:构建成制备人血管内皮抑素的原核表达载体pQE-30,并转化入大肠杆菌BL21中得到表达产物,经Ni亲和层析柱纯化后进行SDS-PAGE鉴定结果为单一组分。利用纯化的人血管内皮抑素成功制备高滴度的鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体,并由Westernblot分析证实。结论:高纯度表达产物及多克隆抗体的制得为今后的研究提供了素材。
- 张一鸣王若宁李艳利顾冬民程志祥熊俊德伟陈丙莺
- 关键词：血管生成因子血管内皮抑素原核表达多克隆抗体
