顾何锋
- 作品数：15 被引量：62H指数：5
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
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- 过量氟诱导成釉细胞钙超载及细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究过量氟对体外培养大鼠成釉细胞内钙超载及细胞凋亡的影响。方法取大鼠成釉细胞系HAT-7细胞,分别加入不同浓度(0、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mmol·L-1)的氟化钠培养液,培养48 h后,采用Cell Counting Kit 8(CCK-8)试剂盒检测各组细胞的活性,流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响,激光扫描共聚焦显微镜、Western blot试验和实时荧光定量聚合酶链反应技术检测过量氟诱导大鼠成釉细胞内Ca2+浓度和钙网蛋白表达的变化。结果氟化钠浓度高于1.6 mmol·L-1时,可抑制成釉细胞的活性,成釉细胞内Ca2+浓度升高,钙网蛋白表达上调,细胞早期凋亡数量增加,并且随着浓度的增加,细胞凋亡的数量也随之增加。结论过量氟可引起成釉细胞内钙超载,诱导成釉细胞凋亡。
- 张颖马林李健钟鸣张凯强顾何锋
- 关键词：氟成釉细胞钙超载钙网蛋白细胞凋亡
- 氟对大鼠成釉细胞GRP-78和caspase-12表达的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:研究GRP-78和caspase-12在氟致大鼠成釉细胞内质网应激和细胞凋亡中的作用,探讨氟所介导的内质网应激是否导致细胞凋亡。方法:应用CCK8和流式细胞术观察不同浓度的氟对成釉细胞活性及凋亡数量的影响,以实时定量PCR和Western印迹法检测氟对内质网伴侣分子GRP-78和caspase-12基因和蛋白表达的影响,应用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着氟浓度的不断增加,大鼠成釉细胞活性呈逐渐下降趋势,流式细胞术同样显示发生凋亡的细胞数量逐渐上升;实时定量RT-PCR和Western印迹结果显示,GRP-78和caspase-12的表达量随着氟浓度增加而增加。结论:过量氟介导了大鼠成釉细胞内质网应激,并且通过内质网应激,引起细胞凋亡。
- 李健张颖马林张凯强雷双顾何锋
- 关键词：氟成釉细胞内质网应激
- 氟对体外培养大鼠成釉细胞活性和细胞凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:观察氟对体外培养的大鼠成釉细胞活性的影响,为探讨氟斑牙的形成机制提供依据。方法 :取对数生长期的大鼠成釉细胞,在培养液中加入浓度为0、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mmol/L的NaF溶液,培养24、48、72 h后,采用CCK-8检测各组细胞的活性。荧光显微镜下观察成釉细胞核形态的变化,流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:1NaF浓度为0.4、0.8 mmol/L时,对成釉细胞有促增殖作用;NaF浓度为1.6、3.2、6.4 mmol/L时,对成釉细胞的活性有抑制作用,随着NaF浓度的增加,对细胞的抑制作用也逐渐增强,并且这种双向调节作用呈时间依赖性。2NaF浓度为0.4、0.8 mmol/L时,鲜见核破碎;NaF浓度为1.6、3.2 mmol/L时,存在核破碎,并且随着浓度的提高,核破碎的数量随之增加,即1.6 mmol/L浓度的NaF可引起成釉细胞凋亡,随着浓度的增加,细胞凋亡的数量随之增加。结论:1氟对体外培养成釉细胞的增殖具有双向调节作用,即低浓度促进,高浓度抑制。2浓度超过1.6 mmol/L时,NaF诱导成釉细胞凋亡。
- 马林张颖钟鸣朱莉张凯强顾何锋刘璐张思宇程睿波
- 关键词：氟成釉细胞流式细胞术
- 氟对大鼠成骨细胞内质网伴侣分子表达影响研究被引量：4
- 2014年
- 目的观察不同质量浓度氟化物对大鼠股骨成骨细胞内质网伴侣分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及半胱天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达的影响,探讨内质网应激在氟骨症形成中的可能作用。方法 2012年6月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室将48只Wistar大鼠随机分成4组,对照组(A组)饮用常规自来水,染氟组(B、C、D组)分别饮用含氟化钠质量浓度为50、100、150 mg/L的自来水,建立氟中毒动物模型。观察大鼠股骨成骨细胞形态学改变及内质网伴侣分子GRP78及caspase-12表达情况。采用SPSS13.0软件包和Meta Morph显微图像分析软件进行统计学分析。结果实验组大鼠切牙出现不同程度氟牙症表现,其骨组织免疫组化结果显示,GRP78、Caspase-12呈阳性表达,随着氟浓度增加,其阳性表达均增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠股骨成骨细胞在一定质量浓度氟化物作用下,GRP78与Caspase-12均出现过表达,表明在高浓度氟作用下,成骨细胞出现内质网应激,进而导致细胞凋亡。
- 顾何锋张颖张凯强刘璐马林程睿波张思宇
- 关键词：氟成骨细胞葡萄糖调节蛋白78
- 过量氟对大鼠牙及骨代谢的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:观察氟对大鼠牙及骨代谢的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为4组,每组12只。染氟组分别饮用含氟化钠浓度为50、100、150 mg/L的自来水,对照组饮用常规自来水。8周后麻醉处死,观察大鼠氟斑牙的发病情况。应用放射免疫法测定血清骨钙素(OC)、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)水平:氟离子选择电极法测定血氟及牙氟浓度,生化方法测定大鼠血清钙含量。采用SPSS13.0软件包对氟斑牙检出率进行x^2检验,单因素方差分析比较各指标组间差异。结果:各染氟组大鼠血氟、牙氟含量显著高于对照组(P<0.05),差异具有显著性,而且各组氟含量随饮水氟浓度的增高而逐渐增高(F值分别为11.234、275.148,P<0.01)。染氟组大鼠血清钙含量显著低于对照组(P<0.05),且各组血钙含量随饮水氟浓度的增高而逐渐降低(F=3.906,P<0.05)。中、高剂量组大鼠血清PTH、OC含量显著高于对照组,差异具有显著性(P<0.01);各组含量随饮水氟浓度的增高而逐渐增高,组间差异显著(F值分别为8.548、3.801,P<0.05)。低、中剂量组大鼠血清CT呈下降趋势,但与对照组相比并无显著差异(P>0.05);而高氟剂量组CT比对照组显著下降(P<0.01)。各组血清CT含量的组间差异显著(F=5.121,P<0.05)。结论:氟影响大鼠的牙及骨代谢.OC、PTH及CT在氟牙症发病中起着重要作用。
- 刘璐张颖顾何锋张凯强马林程睿波张思宇
- 关键词：氟斑牙骨钙素甲状旁腺素降钙素
- 沈阳市铁西区3岁儿童口腔健康流行病学调查结果分析被引量：9
- 2012年
- 目的了解辽宁省沈阳市铁西区3岁儿童口腔健康行为和口腔健康状况,从而为制定相应的龋齿预防措施提供参考。方法通过临床检查与问卷调查相结合的方式,于2011年11月至2012年2月对随机抽取的沈阳市铁西区10所幼儿园共计473名3岁儿童进行龋病流行病学调查,并对结果进行分析。临床检查参照世界卫生组织口腔健康调查标准。结果本次共抽样调查3岁儿童473人,其中患龋者236人,占调查总人数49.9%。被调查儿童龋面均(DMFS)为3.53。最易患龋的牙面为上颌中切牙近中面。Logistic回归分析显示:儿童缩短使用奶瓶时间和家长协助儿童刷牙可有效降低牙齿患龋率。结论沈阳市铁西区3岁儿童患龋率较高,充填率低。建议加大该区口腔教育宣传,推广牙病防治适宜技术,减少儿童口腔疾病的发生。
- 张凯强张颖张思宇张阳马林顾何锋潘晓忠
- 关键词：儿童龋病口腔健康行为
- 内质网应激与细胞凋亡研究进展被引量：14
- 2013年
- 内质网应激主要表现为蛋白质合成障碍,会扰乱细胞稳态并最终导致细胞凋亡。该机制在神经变性性疾病、糖尿病、心血管类疾病及细胞肿瘤类疾病等领域研究进展迅速,在口腔疾病领域研究相对滞后。深入研究内质网应激机制在口腔疾病中发挥的作用,有助于该类疾病的预防与治疗。现就内质网应激机制作一阐述。
- 张凯强张颖顾何锋刘璐马林
- 关键词：内质网应激细胞凋亡
- 过量氟致骨相损伤的早期诊断指标分析被引量：5
- 2013年
- 目的探讨过量氟致骨相损伤早期监测和诊断的参考指标。方法将48只Wistar大鼠随机分为四组各12只。染氟低、中、高剂量组分别饮用氟化钠浓度为50、100、150 mg/L的自来水,对照组饮用普通自来水。8周后麻醉处死大鼠取切牙及股骨,HE染色观察切牙成釉细胞和骨组织形态学改变;放射免疫法测定血清骨钙素(OC)水平;生化法测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性;氟离子选择电极法测定血氟浓度。结果各染毒组切牙成釉细胞排列不规则呈多层,高柱状细胞结构变矮或消失,少量细胞发生扭曲,随氟浓度增加以上病理学改变加重;骨组织出现骨小梁增多,排列致密等骨硬化性表现,骨骺板增厚,增殖层软骨细胞排列紊乱,随浓度增加以上病理学改变加重;血氟含量显著高于对照组(P<0.05),且随饮用水氯化钠浓度浓度增加而增加(F=11.234,P<0.01)。中、高剂量组血清OC水平显著高于对照组(P<0.01),亦呈浓度依赖性(F=3.801,P<0.05)。各染毒组ALP活性均呈上升趋势,呈浓度依赖性;但低、中剂量组与对照组比较无统计学差异;高剂量组明显高于低、中剂量组(F=5.759,P<0.01)。结论血清氟、ALP和OC水平可作为氟致骨相损伤早期诊断的参考指标。
- 刘璐张颖顾何锋张凯强马林程睿波张思宇
- 关键词：氟中毒血氟骨钙素碱性磷酸酶
- 过量氟对成牙本质细胞内质网应激作用的动物实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察不同浓度氟化物对大鼠切牙成牙本质内质网伴侣分子表达的影响,探讨氟对成牙本质细胞的损伤机制。方法:随机分组的30只大鼠分别饮用氟化钠浓度为0、75、150×106的自来水,建立慢性氟中毒模型,采用SP免疫组化法检测大鼠成牙本质细胞中Grp78,XBP-1和Caspase-12的表达。利用MetaMorph显微图像分析软件采集数据并使用spss13.0软件分析。结果:随氟化物浓度增加,成牙本质细胞GRP78、XBP-1、Caspase-12的表达强度增加,且各组间具有显著差异(P<0.05)。结论:一定浓度的氟化物可以引起成牙本质细胞内质网应激,Grp78和XBP-1过表达,高强度的内质网应激会诱导成牙本质细胞通过活化Caspase-12导致成牙本质细胞凋亡。
- 张凯强张颖程瑞波刘璐张思宇顾何锋马林
- 关键词：氟斑牙成牙本质细胞
- 氟对大鼠切牙成釉细胞内质网伴侣分子表达的影响被引量：6
- 2013年
- 目的:研究不同浓度氟化物对大鼠切牙成釉细胞的影响,探讨内质网应激在氟斑牙形成中的作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为3组,建立氟斑牙动物模型。观察大鼠切牙成釉细胞的形态学和GRP78、XBP-1、CRT和caspase-12表达的改变,采用MetaMorph显微图像分析软件和SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着饮水氟离子浓度的升高,切牙逐渐出现氟斑牙症状。免疫组化结果显示,CRT(F=11.72,P<0.05)、GRP78(F=27.42,P<0.05)、XBP-1(F=139.7,P<0.05)、caspase-12(F=43.91,P<0.05)表达随氟离子浓度的升高而升高,且各组间均具有显著性差异。结论:成釉细胞在一定浓度的氟化物作用下,其CRT、GRP78、XBP-1和caspase-12均过表达,表明成釉细胞处于内质网应激状态,且caspase-12是导致细胞凋亡的重要途径。
- 张凯强张颖刘璐顾何锋马林
- 关键词：氟成釉细胞
