韩霜
- 作品数：24 被引量：81H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家自然科学基金创新研究群体项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1对缺氧诱导因子-1转录活性调节机制的研究被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶- 1 (MKP -1)参与缺氧诱导因子- 1 (HIF- 1)转录活性调节的机制。方法 采用Western印迹检测常氧及缺氧状态下磷酸化细胞外信号调节激酶ERK和总ERK在胃癌细胞系SGC7901中的表达;利用脂质体将正义真核表达载体及针对MKP-1的小干扰RNA载体转入SGC7901细胞;借助双荧光素酶基因报告系统(dualluciferasereporter, DLR)检测ERK通路抑制剂PD98059对SGC7901细胞中HIF 1转录活性的影响。结果 ( 1 )缺氧时磷酸化ERK在SGC7901中的含量增加,而总ERK的表达不变; (2)缺氧12h时不同浓度的PD98059均能抑制HIF -1的转录活性;而p38通路抑制剂SB203580对HIF -1的转录活性无影响; (3)将针对MKP 1的小干扰RNA载体和空载体分别瞬时转入SGC7901细胞,转染24h后, 缺氧12h时磷酸化ERK在小干扰RNA载体转染细胞(U6M2)的表达高于空载体转染细胞(U6); (4)不同浓度的PD98059均能够抑制U6和U6M2细胞中HIF- 1的转录活性,当PD98059浓度达50μmol/L以上时,U6和U6M2细胞中HIF- 1的转录活性差异无统计学意义。(5)不同浓度的PD98059均能够抑制U6和U6M2细胞血管内皮生长因子(VEGF)的产生,当PD98059浓度达50μmol/L以上时,VEGF的分泌量在U6和U6M2细胞中差异无统计学意义。结论 在胃癌细胞系SGC7901中。
- 乔泰东刘长江时永全杜昱蕾韩霜樊代明
- 关键词：转录活性PD98059缺氧诱导因子-1HIF-1丝裂原活化蛋白激酶荧光素酶基因
- 黄芪与川芎嗪注射液加免疫化学治疗转移性肾癌的临床观察被引量：10
- 2005年
- 目的:比较黄芪、川芎嗪注射液加免疫化学治疗(治疗组)与单纯免疫化学疗法(对照组)对转移性肾癌的疗效.方法:对照组18例,进行免疫化学治疗.白介素2(IL-2)5～20 MU,每周3次皮下注射、干扰素(IFN-α)6～9 MU每周3次皮下注射、氟尿嘧啶(5-Fu)每次500～750 mg静脉滴注,1～5 d.治疗组18例,在对照组方案的基础上同时加用川芎嗪注射液320mg、黄芪注射液20 ml溶于生理盐水250 ml中每天1次.连用28 d为1个周期,所有病人均接受3个周期以上的治疗.结果:治疗组有效率50%,对照组33.3%;治疗组肿瘤进展率5.6%对照组27.8%.两组比较有统计学差异(P＜0.05).结论:黄芪、川芎嗪注射液与免疫化学药物联用治疗转移性肾癌是有效的手段.
- 韩子敏王巧凤高福音任玉川王玉涛杨凯军韩霜
- 关键词：转移性肾癌免疫化疗黄芪注射液川芎嗪注射液免疫化学治疗皮下注射
- Id1真核表达载体的构建及胃黏膜上皮细胞系的转染
- 2004年
- 目的 :扩增Id1基因 ,构建Id1真核表达载体pcD NA3.1 /V5HisA Id1 .方法 :以胃癌细胞SGC790 1cDNA为模板 ,以Id1基因编码区外的两段特异性序列为引物 ,获得Id1基因的全长 .将目的基因插入载体pUCm T ,经序列测定证实后 ,亚克隆至pcDNA3.1 /V5HisA并经酶切鉴定 .采用脂质体转染的方法将重组质粒稳定转染至胃粘膜上皮永生化细胞系GES 1中 .结果 :经RT PCR方法扩增出大小为 6 0 8bp的基因片断 ,序列测定其编码序列及读框正确 .亚克隆经酶切鉴定正确 .经过 8wkG4 1 8筛选后 ,获得稳定表达Id1的细胞亚系 .经Westernblotting证实 ,Id1蛋白表达水平高于对照组 .结论 :成功地构建了Id1真核表达载体 。
- 韩霜丁杰郭长存韩者艺申慧琴陈瑜扎西措姆乔泰东吴开春樊代明
- 关键词：胃肿瘤ID1
- 由Id1介导的MMP-2、MMP-9对胃癌生成的调控作用被引量：10
- 2011年
- 背景与目的:肿瘤血管生成是肿瘤的一大重要特性,肿瘤微血管密度已被作为许多恶性肿瘤预后的一个重要指标。分化抑制因子(Id)是新近发现的与血管生成密切相关的分子。Id1是Id基因家族中研究较多的基因,在促进肿瘤的转移和血管生成中发挥重要的作用。本文研究胃癌中Id1蛋白的表达及其对基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测Id1及MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的表达;采用RT-PCR和Western blot方法检测转染Id1特异性小干扰RNA(Id1-siRNA)的SGC7901细胞中MMP-2和MMP-9的表达,并用明胶酶谱实验进一步检测Id1-siRNA细胞中MMP-2、MMP-9的活性;采用免疫组织化学方法和Western blot检测Id1-siRNA细胞和空载体转染细胞在裸鼠体内成瘤组织中MMP-2、MMP-9的表达;利用MMPs ELISA试剂盒检测不同处理组细胞上清液中MMP-2、MMP-9的含量。结果:免疫组织化学结果显示,在胃癌组织中Id1和MMP-2、MMP-9呈共表达;成功建立表达特异性Id1-siRNA细胞系,Western blot和RT-PCR结果提示不同克隆的转染效率不同;转染Id1-siRNA的SGC7901细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白及mRNA表达水平均低于对照组;明胶酶谱实验显示,Id1-siRNA细胞组的MMP-2、MMP-9的活性较对照细胞组下降;Id1-siRNA细胞处理后的裸鼠体内成瘤组织中MMP-2、MMP-9的表达均显著降低。结论:Id1和MMP-2、MMP-9在胃癌组织中共表达;Id1可正性调控MMP-2、MMP-9的表达水平,抑制Id1的表达可减弱MMP-2、MMP-9的表达。在胃癌发生发展中Id1可能通过调控MMP-2、MMP-9的表达而发挥作用。
- 雷婷韩霜郭雪艳丁杰
- 关键词：胃癌基质金属蛋白酶ID1
- 分化抑制因子1对胃癌细胞恶性生物学行为的影响
- 目的分化抑制因子1(DNA 结合抑制因子1)在包括胃癌的多种肿瘤的发生或进展中发挥重要的作用。我们的前期研究(Cancer Lett．2004;216：63-71)发现：Id1mRNA 和蛋白在胃癌细胞系中表达上调,在胃...
- 韩霜雷婷韩者艺刘杰郭雪艳丁睿吴开春丁杰樊代明
- 文献传递
- 缺氧状态下丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1对缺氧诱导因子1α和p300在体外结合的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨丝裂原活化的蛋白激酶磷酸酶1(MKP1)对缺氧诱导因子1α(HIF1α)和p300在体外结合的影响。方法采用DNA重组技术构建含HIF1α反式激活域(TAD)的原核表达载体并进行原核表达;利用谷胱甘肽琼脂糖珠子纯化原核表达的谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白;利用脂质体将含MKP1的正义真核表达载体和空载体转入SGC7901细胞;借助Pulldown试验和Western印迹检测MKP1或PD98059对HIF1α与协同激活因子p300在体外结合的影响;Western印迹检测MKP1对p300表达的影响。结果(1)成功构建了含HIF1αTAD的原核表达载体,使含HIF1αTAD的GST融合蛋白在BL21大肠杆菌中得到表达。(2)利用谷胱甘肽琼脂糖珠子纯化得到了含HIF1αTAD的GST融合蛋白。(3)缺氧12h后,GST融合蛋白HIF1αTAD从PD98059处理细胞裂解液中洗脱的p300量低于从二甲基亚砜(DMSO)处理细胞和SGC7901细胞裂解液中洗脱的p300。(4)分别将MKP1正义真核表达载体和pcDNA3.1空载体瞬时转入SGC7901细胞;缺氧12h后,GST融合蛋白从MKP1正义真核表达载体转染细胞(SGC7901MKP1)裂解液中洗脱的p300的量低于从空载体转染细胞(SGC7901空载体)和未转染细胞(SGC7901)裂解液中洗脱的p300。(5)缺氧12h后,p300的表达量在SGC7901MKP1、SGC7901空载体和SGC79013组细胞中无变化。结论MKP1抑制HIF1α和p300在体外结合。
- 刘长江时永全杜昱蕾潘阳林梁洁韩霜樊代明
- 关键词：缺氧诱导因子1ΑP300丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶SGC7901细胞体外
- TWIST小干扰RNA对胃癌细胞生物学行为影响的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:研究转录因子TWIST对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:构建TWIST小干扰RNA,转染胃癌细胞系SGC7901,经G418筛选和Western blot鉴定TWIST低表达胃癌细胞系,MTT法测定细胞生长曲线,流式细胞仪技术检测细胞凋亡及细胞周期,Western blot法检测bax、bcl-2蛋白表达水平。结果:建立了TWIST低表达的胃癌细胞系SGC7901/pSi-TW,与亲本细胞及空载体转染细胞相比,SGC7901/pSi-TW细胞生长速度减慢、增殖指数降低、细胞凋亡增加、bcl-2表达下降、bax表达升高、bcl-2/bax比值降低。结论:TWIST在胃癌细胞的生长、细胞周期、凋亡中具有重要作用。
- 张燕齐韩霜郭雪艳丁杰
- 关键词：TWIST转录因子小干扰RNA胃癌
- 缺氧诱导胃癌多药耐药的机制研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究缺氧对化疗药物敏感性的影响及药物转运蛋白和凋亡相关蛋白的变化,探讨缺氧条件下胃癌细胞发生多药耐药的机制。方法通过MTT比色法检测胃癌细胞SGC7901在缺氧和常氧状态下对化疗药物敏感性的差异;利用Annexin V/PI染色法检测缺氧对化疗药物诱导的凋亡的影响;利用阿霉素的蓄积和潴留实验检测缺氧与常氧条件下胃癌细胞SGC7901阿霉素的潴留和蓄积的差异;利用Western blot和RT-PCR方法检测不同时间缺氧处理胃癌细胞SGC7901中药物转运蛋白p-gp和MRP的变化以及凋亡相关分子Bcl-2和Bax的变化。结果缺氧能够显著降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性,并能够降低化疗药物诱导的凋亡和药物在细胞内的潴留和蓄积;缺氧能够显著上调MDR1和MRP1基因的表达以及增加其产物p-gp和MRP的蛋白水平;缺氧能够显著增加抗凋亡分子Bcl-2 mRNA和蛋白水平以及降低促凋亡分子Bax的表达。结论缺氧加剧胃癌细胞的多药耐药表型,其主要是通过上调药物转运蛋白的表达及增加抗凋亡分子Bcl-2/Bax的比例实现的。
- 雷婷刘理礼韩霜郭雪艳丁杰
- 关键词：缺氧多药耐药胃癌
- 环7肽库筛选胃癌耐药细胞特异性结合短肽被引量：1
- 2006年
- 目的获得与胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR特异结合的抑制耐药短肽,作为提高胃癌化疗效果的先导化合物。方法以SGC7901/VCR细胞为靶细胞,胃粘膜永生化上皮细胞GES,胃癌药敏细胞SGC7901为吸附细胞对噬菌体7肽库进行消减筛选,用细胞ELISA鉴定阳性噬菌体克隆并测序,利用竞争抑制试验确定阳性克隆的结合部位是否为外源性肽段。结果经4轮筛选,从随机挑选的30个噬菌体克隆中得到14个能特异性与SGC7901/VCR结合而不与胃癌药敏细胞结合的阳性克隆,确定其氨基酸序列分别为SY1和SY2(筛选所得安基酸序列正在专利申请中),含SY1为阳性克隆。结论用噬菌体环7肽库成功筛选到能特异性结合胃癌耐药细胞株的短肽,为肿瘤治疗或药物靶向治疗奠定基础。
- 王鹏林涛丁杰梁树辉韩霜曹珊珊葛伏林白飞虎樊代明
- 关键词：噬菌体肽库短肽多药耐药胃癌
- 抗转移多肽对人胃癌腹膜高转移细胞侵袭转移的抑制作用被引量：3
- 2006年
- 目的研究多肽PⅢ对人胃癌腹膜高转移细胞系GC9811-P腹膜转移的作用。方法利用体外细胞基质粘附和体外细胞侵袭实验,分别检测多肽PⅢ对GC9811-P细胞粘附及侵袭能力。体内实验采用胃浆膜下裸鼠原位接种转移模型,观察多肽PⅢ对胃癌细胞GC9811-P腹膜转移能力的影响。裸鼠分多肽PⅢ治疗组、0．9%氯化钠溶液对照组各12只,荷瘤鼠衰竭处死后观察腹膜转移率、转移灶数目及原发瘤质量。结果40μg多肽PⅢ孵育2h时粘附抑制率达86．3%,多肽PⅢ与GC9811-P细胞共同孵育对层粘连蛋白粘附的抑制作用呈时间依赖性。多肽PⅢ与GC9811-P细胞共孵育48h后侵袭抑制率达81．4%。将肿瘤细胞原位接种于裸鼠后给予多肽PⅢ治疗,与对照组比较腹膜转移灶的数目分别为(3．2±6．5)个和(26．3±5．2)个,腹膜转移率明显下降(P＜0．01)；而原发瘤质量分别为(1．9±1．2)g和(2．1±1．0)g,两者间差异无统计学意义(P＞0．05)。结论多肽PⅢ明显抑制人胃癌腹膜高转移细胞系GC9811-P粘附、侵袭和腹膜转移作用。
- 白飞虎王钧高娟韩霜夏琳靳斌翟惠虹吴开春樊代明
- 关键词：胃肿瘤肿瘤转移腹膜多肽
