霍思维
- 作品数：14 被引量：31H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
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- 人胎盘间充质干细胞对脐血CD34^+细胞迁移作用的影响被引量：2
- 2010年
- 人胎盘作为间充质干细胞的新来源在调控造血干/祖细胞(CD34+细胞)发育与分化方面具有重要作用,但其在移植中是否对CD34+细胞迁移起作用尚不清楚.为此,本研究通过胰酶消化法和密度梯度离心法,单克隆筛选培养出人胎盘来源间充质干细胞,RT-PCR检测其与造血和趋化相关的细胞因子和黏附分子的表达;进一步利用transwell体系检测其对脐血CD34+细胞的迁移作用.结果表明,PDMSCs呈现典型的成纤维样细胞,表达间充质干细胞相关表面抗原CD73,CD90和CD105,不表达造血及内皮细胞表面抗原CD34,CD45,CD31等,PDMSCs具有诱导成脂肪、成骨和成软骨的能力.RT-PCR检测结果显示,PDMSCs表达IL-6,LIF,G-CSF,GM-CSF,M-CSF,FL,SCF,SDF-1,VEGF等多种造血与趋化因子,Integrinβ1,Integrinα5,ICAM-1,ICAM-2,ICAM-3,VCAM-1等多种黏附分子;将PDMSCs按照不同密度接种在transwell体系,4h后脐血CD34+细胞迁移率随着PDMSCs的密度增加而增加;在PDMSCs与SDF-1对CD34+细胞的趋化迁移比较实验中,PDMSCs对CD34+细胞的迁移作用明显高于单纯的SDF-1.上述结果提示,PDMSCs对脐血CD34+细胞具有明显的迁移作用,为今后探讨PDMSCs与脐血CD34+细胞共移植是否促进CD34+细胞的植入提供理论基础与实验依据.
- 霍思维苏永锋刘元林江小霞吴英毛宁张毅
- 关键词：胎盘间充质干细胞脐血CD34^+细胞迁移
- 人胎盘来源间充质干细胞支持脐血造血干细胞体外扩增
- 为研究人胎盘间充质干细胞(MSC)的生物学特性及其在脐血造血干细胞(HSC)移植中的作用，我们用消化法联合密度梯度离心法，从成熟胎盘组织中成功分离纯化出MSC，并对其一般生物学特性及多向分化潜能进行了鉴定;用RT-PCR...
- 霍思维
- 关键词：间充质干细胞胎盘体外扩增脐血造血干细胞
- 文献传递
- 人脐静脉内皮细胞抑制单核细胞源树突状细胞的产生(英文)被引量：2
- 2011年
- 本研究旨在探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对树突状细胞(DC)发育的影响。首先,利用酶消化法从人脐带分离获得HUVEC,从细胞形态、表型和功能进行鉴定;进一步将获得的HUVEC结合细胞因子配伍与CD14+单核细胞共培养,检测HUVEC对CD14+细胞向DC分化的影响;流式细胞术检测分化细胞的表型,混合淋巴细胞反应检测分化细胞的免疫学功能;采用中和抗体实验和Western blot检测对细胞增殖和分化起重要调控作用的IL-6和VEGF以及ERK和p38MAPK通路的改变。结果表明,从脐静脉分离获得的细胞呈长梭形形态,细胞表型为vWF+CD31+CD73+CD45-HLA-DR-CD86-CD34low,Dil-Ac-LDL吸收实验为阳性,且细胞可诱导形成血管样结构,提示分离获得了HUVEC;进一步将HUVEC与CD14+单核细胞共培养,流式细胞仪检测结果表明HUVEC可抑制CD14+单核细胞向DC的分化,诱导获得的细胞CD1a表达显著降低,混合淋巴细胞检测结果显示,与HUVEC共培养获得的DC刺激T细胞增殖作用显著降低,且具有剂量依赖性;中和抗体实验分析其可能的作用机制表明,IL-6和VEGF在CD14+单核细胞向DC分化过程中具有重要调控作用,Western blot检测结果说明其主要通过ERK和p38通路完成调控作用。结论:人内皮细胞参与DC的发育,且起到抑制作用。
- 刘元林江小霞苏永锋霍思维朱恒吴英毛宁张毅
- 关键词：脐静脉内皮细胞树突状细胞单核细胞
- 胎盘来源间充质干细胞对脐血CD34+细胞增殖分化的影响及其机制的初步研究
- ＜正＞目的：目前间充质干细胞在造血干细胞移植中已经广泛应用。以往报道从胎盘中分离培养的间充质干细胞可有效的支持造血干细胞的体外扩增,但是胎盘间充质干细胞在体内是否具有相同的作用,及其调控造血干细胞增殖分化的分子机
- 霍思维苏永峰张毅毛宁
- 文献传递
- 蛋白质功能研究的有利工具—化学遗传学被引量：1
- 2004年
- 化学遗传学是利用细胞渗透性的生物活性小分子作为分子探针进行生物学研究的方法。对化学遗传学的基本思路和策略 ,以及与传统遗传学方法的比较 ,作了简要介绍 ,并强调了其优越性及其用途。
- 苗俊英王洁赵静霍思维解琨赵宝祥
- 关键词：遗传学蛋白质功能分子探针生物学研究小分子
- 一种免疫耐受型树突状细胞及其制备方法与专用培养基
- 本发明公开了一种免疫耐受型树突状细胞及其制备方法与专用其培养基。所述培养基是在树突状细胞的培养基中加入间充质干细胞。所述制备方法是往所述培养基中，加入树突状细胞的前体细胞和诱导因子。所述间充质干细胞与树突状细胞的前体细胞...
- 张毅苏永锋江小霞霍思维刘元林吴英毛宁
- 文献传递
- 活化的T细胞促进间充质干细胞分化为成骨细胞被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在探讨活化的T细胞对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)向成骨细胞分化的影响。将活化的T细胞与MSC共培养,14天后碱性磷酸酶染色,观察成骨细胞的生成。此外,在MSC的培养体系中加入活化的T细胞上清,RT-PCR检测活化的T细胞免疫相关分子的表达,探讨哪些细胞因子参与了MSC向成骨细胞分化。结果表明,活化的T细胞能促进MSC分化为成骨细胞,IL-1β在其中发挥重要的作用,而TNF-α,TGF-β1作用不明显。结论:活化的T细胞促进MSC向成骨细胞分化,MSC与免疫细胞通过细胞因子发生相互作用。
- 刘元林江小霞苏永锋霍思维朱恒吴英李秀森毛宁张毅
- 关键词：间充质干细胞T细胞IL-1Β
- CD34^+细胞来源的树突状细胞对骨髓间充质干细胞的生物学特性影响被引量：3
- 2009年
- 本研究探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在抑制树突状细胞(dendritic cell,DC)发育过程中生物学特性的变化。将CD34+造血干细胞来源的树突状细胞与MSC共培养,用流式细胞术检测共培养后(DC/MSC)的表型变化;RT-PCR检测造血和免疫相关分子的表达;用诱导实验观察其分化潜能的改变。结果表明:DC/MSC不表达CD31、CD34、CD45、CD14、CD86。HLA-ABC、CD29、CD73的表达较对照组明显降低,即对照组与共培养组阳性率分别为93.1%vs 13.44%,98.3%vs 78.8%,95.3% vs 75.9%。另外,DC/MSC表达TGF-β,M-CSF等细胞因子均有所增加;进一步将DC/MSC向脂肪细胞诱导分化,诱导后细胞内不能形成脂滴,但其仍保持向成骨分化的特性。结论:DC发育对MSC的基本特性产生一定影响,导致MSC表面间质性标志表达减少,分化能力降低,而造血及免疫相关因子表达则增加。
- 苏永锋霍思维江小霞刘元林吴英毛宁张毅
- 关键词：树突状细胞间充质干细胞免疫抑制
- 活化的T细胞促进间充质干细胞分化为成骨细胞
- ＜正＞目的:探讨活化的T细胞对间充质干细胞（MesenchymalStem Cell,MSC）向成骨细胞分化的影响。方法:1、MSC的分离培养:取健康成人骨髓5 ml,PBS稀释后,加到Percoll（1.073g/ml...
- 刘元林江小霞苏永锋霍思维朱恒吴英李秀森张毅毛宁
- 文献传递
- 胚胎大鼠中枢神经系统神经干细胞分离培养方法研究被引量：7
- 2004年
- 为了建立经济实用的神经干细胞培养方法 ,以Wistar大鼠胚龄 1 4～ 1 5天的胚胎为实验材料 ,选取中枢神经系统的大脑和小脑神经组织 ,经 0 1 2 5 %胰酶消化处理 ,在生长因子 (aFGF和bFGF)作用下 ,采用无血清培养法进行培养。通过倒置相差显微镜进行观察 ,可观察到明显的干细胞的不对称分裂图像。神经干细胞在培养一段时间后均出现细胞团 ,细胞团贴壁后可进行分化 ,形态上表现为神经元样和神经胶质样细胞。利用激光扫描共聚焦显微镜对其进行鉴定 ,可检测到神经干细胞标志性蛋白—Nestin蛋白。采用此法可以分离得到具有干细胞特征和多分化潜能的神经干细胞 ,建立了一套神经干细胞的分离、培养和鉴定的方法 ,这将对更好地理解神经系统的发育机制 。
- 吕欣王楠霍思维张尚立解琨苗俊英
- 关键词：神经干细胞体外培养
