陈知航
- 作品数：38 被引量：67H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 检测重组人鼠嵌合抗VEGFR2单克隆抗体的ELISA方法的建立
- 2016年
- 目的：建立一种新型、快速定量检测食蟹猴血清中抗血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）单克隆抗体浓度的方法.方法：将特异性抗原VEGFR2-His包被在固相载体上,加稀释的受试药品血清,然后加入HRP标记的羊抗人IgG-（h＋1）,再加入TMB显色液,最后加入1 mol/L硫酸终止液,在酶标仪上用双波长读取D4s450/560nm值.结果：建立了定量检测食蟹猴血清中抗VEGFR2单克隆抗体浓度的ELISA法,方法的线性范围为400～6.25 ng/mL,定量下限为6.25ng/mL,板内精密度介于-13.6％～8.3％,板间精密度介于-6.1％～6.3％,与Avastin、Actemra、Cetuximab均无交叉,室温稳定性及冻融稳定性良好,无稀释效应.结论：通过方法学的确证,本实验建立的方法可满足抗VEGFR2单克隆抗体在食蟹猴体内的药代动力学研究要求,可用于抗VEGFR2单克隆抗体的检测.
- 鲁杰李慧张茂桃刘运龙陈知航李丽刘学龙程远国
- 关键词：血管内皮生长因子受体2酶联免疫吸附法药代动力学
- 醋酸艾塞那肽在大鼠体内的代谢分布(英文)
- 2008年
- 目的研究醋酸艾塞那肽(exendin-4)在大鼠体内的组织分布。方法Iodo-GenTM法制备[125I]exendin-4,大鼠皮下注射[125I]exendin-4后,分别测定血浆或组织中的总放射性含量和酸沉淀放射性含量。结果[125I]exendin-4的酸沉淀放射性分布从高到低的顺序为肾脏>肺>膀胱>胰腺>肠>血浆>肾上腺>空肠>淋巴结>肝>脾>心脏>骨髓>胸腺>睾丸>脑>肌肉>脂肪。结论[125I]ex-endin-4的分布快速而广泛,其中以肾脏中最高,而在脑组织只发现微量的[125I]exendin-4。
- 艾国陈知航单成启车津晶候禹男程远国
- 关键词：药代动力学
- 表皮生长因子对人子宫颈癌细胞形态及噻唑蓝还原的影响
- 2000年
- 表皮生长因子 (EGF) 10 μg/L作用于人子宫颈癌 (Hela)细胞 ,2 4h、 4 8h未见细胞数量改变 ,第 5d时可观察到细胞由原来的呈椭圆形克隆样生长变为有树突样胞质突出的长梭状较均匀地分布生长 :EGF作用下 ,Hela细胞噻唑蓝还原呈剂量依赖性增加。提示EGF不能促进Hela细胞增殖 ,但可引起细胞形态改变及线粒体脱氢酶活性增高 。
- 陈新志洪新陈知航卢永科仲来福
- 关键词：子宫颈癌表皮生长因子细胞形态
- 重组人ω-干扰素在金黄地鼠和Wistar大鼠体内的组织分布和排泄被引量：2
- 2007年
- 目的:为进一步的临床试验提供重组人ω-干扰素(rhIFN-ω)的分布和排泄试验数据。方法:用125I同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法测定各主要器官组织的总放射性浓度和酸沉淀部分放射性浓度,获得rhIFN-ω的尿粪排泄和胆汁排泄数据。结果:各主要器官组织的总放射性浓度AUC0-4h排序由大到小依次为:尿、胸腺、胆囊、膀胱、肾、肾上腺、肠内容物、肠淋巴结、空肠、肺脏、血清、卵巢、脾、肝、肌肉、心脏、骨髓/股骨、睾丸、脂肪、脑。皮下注射125I-rhIFN-ω后48h尿和粪的累计排出量分别达到注入放射量的87.9%±2.8%和4.0%±1.6%,尿粪合计排出量占注入放射性量的91.9%±2.1%,而皮下注射125I-rhIFN-ω后20h内胆汁排泄放射性量占注入放射性量的3.34%。结论:rhIFN-ω在泌尿系统分布比较高,与血清蛋白结合比较少,在脑、脂肪和肌肉等组织的药物浓度最低。rhIFN-ω主要以尿的形式排泄。
- 宋艳霞陈知航单成启侯禹男陈微余长明汤仲明程远国
- 关键词：排泄
- 猕猴皮下注射重组人甲状旁腺激素的药代动力学研究(英文)
- 2008年
- 研究猕猴皮下注射重组人甲状旁腺激素[rhPYH(1-34)]后的药代动力学及生物利用度。猕猴皮下注射rhPTH(1-34) 10,20和40μg/kg,静脉注射rhPYH(1-34)20μg/kg以及连续皮下注射rhPTH(1-34)40μg/kg(每天一次,连续14天),应用放免方法(IRMA)检测血浆样本中药物浓度,然后采用非房室模型计算药代动力学参数。IRMA方法检测血浆中rhPTH(1-34)的线性范围为0.027～2.22 ng/mL。日内和日间精密度都小于15%,并且平均回收率约为93.0%±8.6%～116.5%±14.0%。猕猴皮下注射rhPTH(1-34)10,20和40μg/kg后,平均达峰时间T_(max)分别为0.67,0.5和0.83 h,峰浓度C_(max)分别为1.85±0.05,3.23±0.25和7.15±1.19ng/mL,曲线下面积AUC_(0-∞)分别为3.4±0.6,10.7±1.3和12.6±1.5 ng/h/mL,末端相消除半衰期T_(1/2)分别为0.72±0.10,1.15±0.10和1.03±0.06h。猕猴皮下注射rhPTH(1-34)20μg/kg的绝对生物利用度为46.96%。连续注射猕猴rhPTH(1-34)后无药物蓄积。IRMA方法具有高灵敏度及专属性,适用于猕猴皮下注射rhPTH(1-34)后的药物药代动力学研究。在给予剂量范围内,猕猴体内的rhPTH(1-34)药物代谢符合线性动力学特征。
- 宋雪伟陈知航车津晶单成启侯禹男郑仁玖程远国
- 关键词：重组人甲状旁腺激素药代动力学IRMA猕猴
- 重组抗CD20单克隆抗体ELISA检测新方法的建立被引量：3
- 2011年
- 目的:建立一种检测重组抗CD20单克隆抗体的新的ELISA方法,以便快捷、简便、灵敏地检测生物体液中的重组抗CD20单抗。方法:采用双抗夹心ELISA法对重组抗CD20单克隆抗体进行定量检测,包被抗体用猴血清吸附的羊抗人IgG,检测抗体用猴血清吸附的羊抗人IgG-HRP,最后加底物显色剂,终止后在酶标仪450 nm下读数。结果:按照新药临床前药代动力学中方法学确认的要求进行验证,获得了检测重组抗CD20单克隆抗体的高灵敏度和稳定的ELISA方法。结论:该ELISA方法简便、稳定、灵敏度高,可用于重组抗CD20单克隆抗体的检测。
- 刘若瑞陈知航许先兴孙丽丽刘运龙程远国
- 关键词：酶联免疫吸附测定药代动力学
- 用长距PCR法构建恶性疟原虫cDNA表达文库被引量：15
- 2002年
- 目的 构建恶性疟原虫cDNA表达文库。方法 用Trizol试剂盒提取总RNA ,以经修饰的SMART寡聚核苷酸引物 CDSⅢ引物直接用总RNA选择性地反转录成单链cDNA ,再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA ,经蛋白酶K消化和酶切后 ,用玻璃奶试剂盒回收 2 0 0bp以上DNA片断 ,经与载体λTriplEX2连接和蛋白抽提物体外包装后 ,构建成cDNA文库并对文库进行了初步的鉴定。结果 构建了高滴度 ,高重组率的恶性疟原虫cDNA表达文库。结论 所构建的疟原虫cDNA文库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋白基因。
- 傅作申程远国张玉静阮承迈单成启古稀波陈知航侯禹男陈泽建李英
- 关键词：恶性疟原虫CDNA表达文库
- LC-MS/MS测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体浓度及其药代动力学研究被引量：3
- 2015年
- 目的：建立测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体的高效液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）法,并进行荷瘤裸鼠体内药代动力学研究。方法：采用YMC C18（100 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱,流动相B为0.025%氨水乙腈,A为0.025%氨水,在线脱气,流速0.8 m L/min。梯度洗脱：0~2 min,B相85%~85%;2~4 min,B相85%~10%;4~6 min,B相10%~85%;6~8 min,B相85%~85%,柱温40℃。进样量10μL。质谱条件：离子源电喷雾电离源（ESI）,负离子电离模式,扫描方式多级反应监测（MRM）,监测离子对m/z和厚朴酚（265.0→223.0）和内标（253.0→225.0）。结果：血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品的分析时间为8 min;和厚朴酚在0.500~1000 ng/m L呈良好的线性关系,定量下限为0.500 ng/m L,日内、日间精密度RSD均小于15%,低、中、高3种浓度的提取回收率〉64.71%。稳定性实验中,在各种贮存条件下血浆中和厚朴酚均较稳定。结论：本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于和厚朴酚脂质体的药代动力学研究,以期为临床应用提供参考。
- 丁士雯马红霞李娴刘运龙陈知航单成启程远国陈俐娟
- 关键词：液质联用梯度洗脱药代动力学
- 重组人鼠嵌合抗CD20单克隆抗体免疫原性检测方法的建立被引量：3
- 2015年
- 目的：建立一种灵敏、特异、操作简单的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中抗CD20单克隆抗体的免疫原性。方法：首先采用桥连ELISA法对抗药物抗体（ADA）进行定性筛选,以抗CD20单克隆抗体作为包被抗体,以生物素标记的抗CD20单克隆抗体作为检测抗体,二者共同结合血清中存在的ADA,以D450/560nm值超过临界值作为阳性判断标准;初筛为阳性的样本采用免疫清除法进一步确证,并同时进行免疫交叉试验考察ADA对供试品和原研对照品的免疫反应有无差异。结果：建立了检测ADA的筛选方法和确证方法,确定了检测的临界值和归一化因子,血清中抗药物抗体的检测灵敏度达3.5 ng/m L,批内/批间精密度介于3.1%~7.4%,准确度介于-1.2%~9.5%;食蟹猴连续给药后,部分个体产生特异性抗体,且抗体滴度随时间延长而增高。结论：建立的ADA筛选方法和确证方法可用于毒性试验的免疫原性检测;动物给药剂量对抗体的产生有较大影响,低剂量连续给药更易诱发特异性抗体产生。
- 孟庆芳马志强陈知航李丽刘运龙单成启钱小红程远国
- 关键词：抗CD20单克隆抗体免疫原性
- 检测HSA-GLP-1融合蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：2
- 2013年
- 目的：为检测血清中HSA-GLP-1融合蛋白整体分子的浓度，建立一种特异、灵敏的定量检测食蟹猴体内HSA-GLP-1融合蛋白浓度的双抗体夹心ELISA的方法。方法：采用双抗体夹心ELISA方法，以GLP-1单克隆抗体为包被抗体、HSA-GLP-1融合蛋白为夹心抗原、anti-HSA-Biotin为检测抗体，用Streptavidin-HRP进行免疫放大，TMB显色。结果：建立了检测HSA-GLP-1融合蛋白的ELISA方法，其线性范围为15.6~1000 ng/mL，最低检测限为15.6 ng/mL，与GLP-1、HSA、IL2-HSA均无交叉反应，板内和板间精密度均小于15%，准确度为±15%，冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论：建立的HSA-GLP-1蛋白检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求，可用于HSA-GLP-1融合蛋白在临床前药代动力学试验的定量检测。
- 王秋实刘运龙张玉民陈知航钱爱东程远国
- 关键词：双抗体夹心ELISA
