陈治国
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:江苏省研究生培养创新工程项目国家教育部博士点基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种全人源靶向EGFR/KDR的IgG样双特异性抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及抗表皮生长因子受体(EGFR)和抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR)的IgG样双特异性抗体(Bispecific antibody,Bi‑Ab)的制备方法及用途。本发明利...
- 张娟王旻陈治国金海珍袁锡彬赵虹
- 文献传递
- 一种全人源IgG样抗EGFR/抗KDR双特异性抗体的构建与表达被引量:2
- 2015年
- 为增强抗EGFR或抗VEGFR2(KDR)单克隆抗体的抗肿瘤作用,作者将抗人EGFR单克隆抗体(Cetuximab)可变区基因和抗人KDR单克隆抗体(m Ab-04)可变区基因融合并与人Ig G1的Fc段基因通过柔性肽连接在一起,得到全人源Ig G样抗EGFR/抗KDR双特异性抗体(Bi-Ab)的基因。将Bi-Ab基因插入载体p PICZα,转化毕赤酵母X-33并诱导表达。发酵液经硫酸铵沉淀法初步提取后采用Protein A亲和层析柱进一步分离纯化,得到电泳纯的Bi-Ab蛋白,其产量约为2.3 mg/L发酵液。表面等离子共振法(SPR)分析显示,Bi-Ab与EGFR或KDR的结合亲和力与其亲本Cetuximab或m Ab-04相近,表明该双特异性抗体Bi-Ab能与EGFR和KDR特异性结合,可用于进一步的抗肿瘤活性研究。
- 陈治国邢黎军徐孟怀张娟王旻
- 关键词:表皮生长因子受体血管内皮生长因子受体2双特异性抗体
- 抗KDR单链抗体阻断VEGF/KDR通路的活性研究被引量:1
- 2014年
- 为了阻断VEGF与KDR的结合,抑制VEGF结合KDR后介导的内皮细胞迁移和血管新生,实验室已经从全人源噬菌体展示抗体库中筛选得到几种抗KDR的单链抗体,从中挑选一种亲和力较高的抗体命名为AK506进行周质表达,纯化后经SDS-PAGE鉴定,可获得纯度为95%的电泳纯抗体,产量可以达到每升发酵液1 mg。经表面等离子共振技术测定,AK506与KDR胞外区相互作用的平衡解离常数为7.99×10-9nmol/L。细胞ELISA分析显示,AK506与内皮细胞表面膜受体KDR的结合呈剂量依赖性。采用细胞划痕损伤修复实验和鸡胚尿囊膜实验证明,AK506可以显著抑制内源性VEGF诱导的血管内皮细胞迁移和新血管生成,具有进一步研究开发用于抗肿瘤血管生成治疗的潜力。
- 李海鑫陈治国陈晨金海珍张娟王旻
- 关键词:血管内皮生长因子受体2单链抗体
- 一种全人源靶向EGFR/KDR的IgG样双特异性抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及抗表皮生长因子受体(EGFR)和抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR)的IgG样双特异性抗体(Bispecific?antibody,Bi-Ab)的制备方法及用途。本发明利...
- 张娟王旻陈治国金海珍袁锡彬赵虹
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