陈武
- 作品数:27 被引量:40H指数:4
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- 人纤溶酶原kringle区缺失突变体的毕赤酵母表达、产物纯化及鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的研究人纤溶酶原kringle区缺失突变体(PLGAK)的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达、产物纯化及理化性质鉴定。方法采用7.5L发酵罐对工程菌PLG△K/GS115进行高密度培养、甲醇诱导表达,培液经离心、超滤、离子交换层析、凝胶滤过、透析后冷冻干燥。等电聚焦电泳、HPLC、质谱分别检测PLG△K等电点、纯度和分子量;纤维蛋白平板、肽底物S-2403分别测定PLG△K激活后的纤维蛋白和酰胺水解活性。结果7.5L高密度发酵可获得约为400mg/L培液的表达量,经三步纯化后制备的PLG△K纯度大于96%。理化分析显示PLG△K的等电点为7.5~7.8,分子量:27.787kD,比活性:23.6U/mg。结论初步建立了PLG△K的酵母高密度发酵及纯化工艺,所制备半成品活性与血浆提取的PLG相近,具备放大生产和应用的潜力。
- 陈武莫炜张艳玲宋钢宋后燕
- 关键词:毕赤酵母纤溶酶原缺失突变体纯化
- 组织型纤溶酶原激活剂体外激活纤溶酶原及重组人微小纤溶酶原诱导大鼠玻璃体后脱离
- 目的:通过组织型纤溶酶原激活剂(tPA)体外激活纤溶酶原及重组人微小纤溶酶原产生纤溶酶和微小纤溶酶,并研究其诱导大鼠玻璃体后脱离的安全和效率。方法:总共100只雄性SD大鼠随机分成8个组:1至6组每组12只大鼠,7、 8...
- 陈武莫炜黄欣张艳玲王文吉宋后燕
- 文献传递
- 头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因研究被引量:8
- 2010年
- 目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不动杆菌205株,除头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在18.0%,黏菌素全部敏感之外,对其他抗菌药物的耐药率均约90.0%;20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌通过PCR检出blaTEM、blaPER、blaVEB、blaCARB、blaGIM、blaDHA;未检出blaSHV、blaOXA、blaGES、blaSPM、blaVIM、blaIMP、oprD2基因。结论目前分离株对黏菌素全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感性相对较高,对其他抗菌药物的敏感性较低,多药耐药鲍氏不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物。
- 杨宏伟侯玲俐吕军张吉才陶建蜀陈武高波余宗涛
- 关键词:医院感染鲍氏不动杆菌多药耐药耐药基因
- 肿瘤坏死因子和干扰素对体外培养乳鼠雪旺氏细胞的增殖影响被引量:1
- 2004年
- 目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF -α)与干扰素 (IFN -γ)联合应用对体外乳鼠雪旺氏细胞增殖的抑制作用。方法 :建立体外乳鼠雪旺氏细胞培养体系 ;经分离、纯化、传代的雪旺氏细胞通过免疫组化、电镜鉴定后 ,纯度达到90 %以上后进行实验。实验分为空白组、对照组、TNF -α组、IFN -γ组及TNF -α +IFN -γ组 ,分别作用 72h后 ,应用四氮唑蓝 (MTT)比色法测定各组的OD值 ,计算其抑制率。结果 :TNF -α和IFN -γ对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖均有直接抑制作用 ,其中TNF -α在 10 0~ 2 0 0 0U/ml浓度范围内对正常雪旺氏细胞增殖有抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,在10 0 0U/ml抑制率达到最大。联合用药能明显提高TNF -α对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖的抑制效应。结论 :TNF -α对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖起抑制作用 ,并呈剂量依赖性。IFN -γ与TNF -α联合用药有明显的协同抑制效应。
- 党洪胜陈武
- 关键词:雪旺氏细胞乳鼠增殖肿瘤坏死因子体外培养抑制率
- 纤溶酶Kringle区缺失突变体对兔眼玻璃体视网膜界面的作用被引量:2
- 2010年
- 目的研究纤溶酶Kringle区缺失突变体(Plm△K)对兔眼玻璃体视网膜界面的作用。方法Plm△K由毕赤酵母表达的纤溶酶原Kringle区缺失突变体(Plg△K)经组织纤溶酶原激活剂(tPA)激活产生,并通过发色底物S2403测定其蛋白水解活性。0.5、1.0、1.5μmol/min Plm△K100μL分别注入16只新西兰白兔的玻璃体腔内,注射后1d、7d在光镜下和扫描电镜下检查,并行大体检查、眼部B型超声和光学相干断层扫描(OCT)检查,观察玻璃体视网膜界面情况。结果还原性SDS-PAGE凝胶成像分析证实,Plg△K被激活后产生相对分子质量约26000和5000的2条肽链,且具有纤溶酶活性。4种检测结果均显示Plm△K诱导玻璃体皮质与视网膜的分离。视网膜内表面皮质残留量与Plm△K的剂量呈负相关(r=-0.9516,P=0.048),完全性分离可产生光滑的视网膜内表面。Plm△K注射眼与对照眼的视网膜外层结构均未发现明显的差异。视网膜内表面皮质残留量与药物作用时间有一定的关系,但差异无统计学意义(r=-0.720,P=0.470)。对照组和Plm△K处理组间视网膜外层的形态学无明显不同。Plm△K玻璃体注射后未发现视网膜发生药物相关的不良反应。结论玻璃体腔单独注射Plm△K可有效诱导玻璃体与视网膜的完全性分离,而对外层视网膜结构无明显影响。
- 陈武黄欣莫炜王文吉宋后燕
- 关键词:玻璃体视网膜界面纤溶酶缺失突变
- 益气开窍汤联合rt-PA对缺血性脑卒中患者血脂及同型半胱氨酸水平的影响被引量:5
- 2023年
- 目的观察益气开窍汤联合重组人组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)对缺血性脑卒中(IS)血脂和同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响。方法将我院90例IS患者随机分为观察组与对照组各45例。对照组采用rt-PA治疗,观察组在rt-PA基础上联合益气开窍汤治疗,比较两组疗效,治疗前后甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、Hcy、血浆神经肽Y(NPY)水平。结果治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);两组TG、TC、LDL-C、Hcy、NPY水平均降低,HDL-C水平升高,观察组TG、TC、LDL-C、Hcy、NPY水平低于对照组,HDL-C水平高于对照组(P<0.05)。结论益气开窍汤联合rt-PA治疗IS疗效肯定,能显著降低患者血脂、Hcy、NPY水平,临床价值较高。
- 宋亚君王翔陈武
- 关键词:血脂同型半胱氨酸
- 重组葡激酶-水蛭素融合蛋白在体外的抗凝溶栓作用分析
- 2015年
- 目的通过构建STH融合蛋白发酵及分离纯化工艺,用以获取蛋白,并探讨其在体外的抗凝溶栓作用。方法采用琼脂糖-纤维蛋白溶圈法对样品STH的溶栓活性进行测定;SDS-PAGE、Western Blot、发色底物法以及纤维蛋白凝块溶解法分别分析STH和裂解产物的抗凝活性,并根据血栓弹力图来分析STH在体外所具有的溶栓、抗凝作用。结果在STH中,HV2的C-末端对凝血酶仍具有显著的亲和力,使STH对血栓具有较高的靶向性;STH在凝血酶裂解的情况下能将抗凝活性释放开来,是指具有溶栓、抗凝双重作用。结论 STH生产工艺操作起来简便,便于大规模生产;通过分析STH在体外所具有的功能,结果表明:STH在具有溶栓、抗凝作用的基础上,其对血栓也有显著的靶向性,但其出血副作用不大。
- 董耘徐昕李斌柯丽娜陈武
- 关键词:凝血
- 基于列线图模型的多指标检测对缺血性脑卒中预后预测价值分析
- 2023年
- 目的构建多指标列线图模型以预测缺血性脑卒中患者的预后。方法对2019年1月至2021年6月湖北医药学院附属国药东风总医院接诊的126例缺血性脑卒中患者的资料进行回顾性分析。根据格拉斯哥预后评分将患者分为2组:1~3分者为预后不良组,4~5分者为预后良好组。收集可能影响缺血性脑卒中患者预后的因素,比较2组患者各预后因素,并进行多因素分析,根据多因素分析结果构建列线图模型。结果126例患者中,45例预后不良。多因素分析结果显示,有吸烟史、入院时美国国立卫生研究院脑卒中量表评分升高、低密度脂蛋白胆固醇水平升高、神经肽P物质水平升高为缺血性脑卒中预后不良的危险因素(P<0.05);高密度脂蛋白胆固醇水平升高为保护性因素(P<0.05)。根据多因素分析结果构建列线图模型,受试者操作特征曲线下面积为0.892,灵敏度为93.1%,特异度为68.2%,95%CI为0.836~0.949。计算机模拟充分采样法内部验证结果显示,平均绝对误差为0.03,模型表现与理想模型基本拟合,提示模型预测准确度较高。结论缺血性脑卒中患者的预后与吸烟、入院时美国国立卫生研究院脑卒中量表评分、低密度脂蛋白胆固醇水平、神经肽P物质水平等因素有关。根据上述因素构建的列线图模型用于缺血性脑卒中患者预后预测具有较高的准确度与区分度。
- 宋亚君王翔陈武
- 关键词:缺血性脑卒中列线图预后预测
- 抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建与表达被引量:1
- 2015年
- 目的:探讨抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建效果与抗凝溶栓活性表达情况。方法:在间接实验中,选择p BV-重组葡激酶-水蛭素融合蛋白质质粒进行酵母大量表达,再进行两级纯化分析;去纯化的单位进行抗凝溶栓的检测。结果:工程菌酵母发酵培养诱导1 h后就可以检测到重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达,表达量随发酵时间的增加而递增。两级纯化的重复性非常好,纯度经RP-HPLC测定在98%以上。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的溶栓活性明显高于水蛭素与葡激酶的单纯溶栓活性(P<0.05)。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白具有更强的纤溶酶原激活活性,明显高于水蛭素与葡激酶的单纯纤溶酶原激活活性(P<0.05)。结论:重组葡激酶-水蛭素融合蛋白生产工艺具有很好的诱导与纯化效果,重组葡激酶-水蛭素融合蛋白能发挥较好的抗凝与溶栓作用。
- 徐华徐昕杨进国杨剑曾文强刘少帮刘少华陈武
- 关键词:抗凝溶栓
- 重组人微小纤溶酶原的中试及药效学研究
- 玻璃体后脱离/(Posterior Vitreous Detachment,PVD/)是糖尿病视网膜病变和视网膜静脉阻塞的常见并发症,老年及近视人群中也有较高的发病率。玻璃体切割、视网膜复位是有效治疗手段,但手术并发症较...
- 陈武
- 关键词:纤溶酶玻璃体后脱离视网膜静脉阻塞
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