- 稀土离子和钙调蛋白重组的紫外差光谱及电泳研究被引量:4
- 1996年
- 对稀土的生物学效应研究表明,稀土元素能促进农作物的生长,增加产量;稀土在一定的浓度下对动物组织具有一定的毒性.目前对稀土在生物体中的作用机理还不很清楚,许多学者认为,稀土离子(Ln^(3+)在生物体内与拮抗Ca^(2+)有关.钙调蛋白(CaM)是一种动植物中普遍存在的非常重要的钙离子受体,它能调节多种酶的活性(如,环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase、等).这预示着 Ln^(3+)与CaM之间存在着一定的关系.CaM不含色氨酸,它有5条精细的特征峰结构(253,259,265,269,277nm).紫外光谱滴定实验表明,猪脑CaM的两个Tyr残基位于不同的环境:Tyr-99位于分子表面,Tyr-138埋藏于分子内部.Yazawa等发现Ca^(2+)由于影响了CaM中Tyr-138的环境而诱导了286nm负的差谱.本文利用了紫外差光谱法(测定蛋白质在两种环境下的吸收度差)来研究Ln^(3+)对CaM的构象影响.此外,还采用PAGE活性电泳以及SDS-PAGE方法来研究Ln^(3+)和CaM的重组.结果表明.Ln^(3+)与CaM的结合所引起的构象变化与Ca^(2+)的相类似.Ln^(3+)结合CaM后导致CaM的C末端的两个Tyr残基(Try-99,Tyr-138)环境变得更加亲水,明显显示出286nm和279nm负的差谱.由其离子滴定引起这2个差谱的变化大小推测Ln^(3+)能与脱钙CaM(Apo-CaM)的钙结合位点结合.其第1个Ln~(
- 陈旭周玉祥徐育敏
- 关键词:钙调蛋白稀土离子电泳
- 轻稀土离子对钙调蛋白激活的磷酸二酯酶活力作用的影响被引量:15
- 1996年
- 研究了轻稀土离子(Ln3+)对钙调蛋白(CaM)调控的磷酸二酯酶(PDE)活力的影响。结果表明,在无Ca2+的CaM(Apo—CaM)体系中,由CaM调节的PDE的活力随Ln3+浓度的变化曲线是双相效应,即在高浓度时,Ln3+具有抑制CaM调节PDE活力的能力;低浓度的Ln3+可以提高CaM调节PDE活力的能力。在Ca2+4-CaM-PDE体系中,高浓度的Ln3+的加入能抑制ChM调节PDE活力的能力,其抑制程度因其离子不同而异。CaM的两类拮抗剂JuA(非竞争性抑制剂)和TFP(竞争性抑制剂)都能抑制CaM-Ln3+-PDE系统的活性。最后对Ln3+和CaM相互作用的分子机制进行了初步的讨论。
- 陈旭周玉祥徐育敏
- 关键词:磷酸二酯酶钙调蛋白