陈媛 作品数:14 被引量:27 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院国家生物医学分析中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市科技新星计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
慢病毒感染方法构建稳定干涉PDRG1的HeLa细胞系 被引量:3 2013年 PDRG1(p53 and DNA-damage regulated 1)是实验室通过文库筛选发现的参与NF-kB信号通路调控的一个新基因。已知PDRG1在多种肿瘤中高表达,并参与p53信号通路;同时该基因受UV以及基因毒性等刺激调控。但其在NF-κB信号通路中作用尚未见报道,为了深入研究PDRG1对NF-κB信号通路的调控机理,构建了稳定干涉PDRG1的HeLa细胞系。选择了基于慢病毒载体pLKO.1的感染体系,该慢病毒体系可以同时感染分裂期与非分裂期的细胞,将目的基因干涉序列稳定整合至靶细胞基因组中;再经过抗生素压力筛选后在短时间内获得稳定干涉目的基因表达的细胞株。设计合成PDRG1干涉序列并克隆至pLKO.1载体,转染病毒包装细胞293TN后收集慢病毒上清感染HeLa细胞系,进一步经过嘌呤霉素压力筛选成功获得稳定表达PDRG1干涉序列的细胞株。该稳定细胞株的建立为PDRG1的功能研究提供了必要的实验工具。 巩伟丽 徐广 韩秋影 陈媛关键词:慢病毒感染 CUEDC1的克隆表达及其对PRB和ERα转录活性的影响 被引量:3 2009年 为了研究CUEDomain Containing1(CUEDC1)蛋白质功能,构建了pcDNA3.0-Flag-CUEDC1表达载体,并且成功表达Flag-CUEDC1蛋白质。通过双荧光报告系统,对比CUEDC1与CUEDC2对PRB和ERα转录活性的影响。其结果显示,CUEDC2能够抑制PRB和ERα转录活性,而CUEDC1对PRB和ERα转录活性的影响不显著。 穆蕊 赵洁 陈媛 张佩景 李慧艳 周涛 张学敏 李爱玲关键词:CUEDC2 转录活性 UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性 被引量:4 2012年 UBE2W(ubiquitin-conjugating enzyme E2W)是一新的泛素结合酶,关于其功能研究甚少。采用双荧光报告系统和Western blot等方法,分别干涉和过表达UBE2W,分析UBE2W对TNF(刺激下NF-(B转录活性的影响。结果显示UBE2W能够显著抑制TNFα诱导的NF-κB的转录活性,提示该基因可能参与NF-κB相关功能的调控。 王少鑫 巩伟丽 陈媛 靳宝锋关键词:NF-ΚB TNFΑ 胆碱干预对低氧暴露小鼠学习记忆的改善及其tau蛋白机制研究 研究目的: 高原地区属于我国战略要地,其低压、低氧、寒冷等环境因素对人体多个系统产生影响,其中中枢神经系统是对缺氧敏感的重要系统。低氧环境能够对神经系统造成影响已经得到证实,高原低氧对神经系统、认知功能的影响机制作为热... 陈媛关键词:低氧暴露 学习记忆 TAU蛋白 胆碱 B族维生素 基于液质联用技术的环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立与评估 2020年 目的:建立基于液质联用技术的定量检测环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP)的方法体系,用于评价细胞内DNA感受器环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)的活性。方法:在人白血病单核细胞系U937中,以脂质体转染鲱鱼精DNA(HT-DNA)的方式诱导cGAMP合成,采用甲醇-乙腈萃取法提取细胞中的cGAMP分子,真空干燥后利用液相色谱-质谱多反应监测技术(LC-MS/MRM)对cGAMP进行定量检测。同时利用蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR体系对细胞中cGAMP产生后的常规生物学效应指标进行检测,以评价该方法的可靠性。结果与结论:建立的基于液质联用技术检测方法实现了对细胞中cGAMP分子的定量分析。该方法具有特异性好、灵敏度高的特点,为深入研究cGAS的活性调控机制提供了技术支撑。 郭增林 韩秋影 毛劼 王娜 周涛 陈媛应用流式细胞分选技术分离人外周血原代单核细胞 被引量:5 2012年 巨噬细胞是机体重要的免疫细胞,具有免疫调节、抗感染和抗肿瘤等重要功能。快速、有效地分离得到高纯度的人外周血单核细胞,是研究巨噬细胞功能的前提。利用细胞大小及胞内颗粒度属性对单核细胞与其他白细胞组分进行区分。通过流式细胞分选,获得了较高纯度单核细胞。单核细胞表面标志物CD14染色分析显示,该方法对单核细胞的分选效率达85%以上。进一步实验证明,分选得到的单核细胞能够在体外正常分化为巨噬细胞。 陈媛 巩伟丽 湛小燕 卓海龙 张飒 戴倩倩 李涛关键词:人外周血 逆转录病毒感染结合流式细胞分选方法构建稳定过表达CUEDC2的MCF-10A细胞系 被引量:4 2012年 CUEDC2(CUE domain containing protein 2)是本实验室发现的功能未知蛋白质。已有研究证明CUEDC2通过抑制孕激素受体PR影响乳腺癌细胞的生长,同时CUEDC2的高表达能够降解雌激素受体ER而导致乳腺癌内分泌治疗耐药。为了深入研究CUEDC2在乳腺癌中的功能,构建了稳定过表达CUEDC2的MCF-10A细胞系。利用逆转录病毒将非融合形式的绿色荧光蛋白质GFP和CUEDC2基因稳定整合至靶细胞的基因组中,经过流式分选获得GFP阳性细胞,即为稳定表达CUEDC2的细胞株。上述方法高效快捷,极大提高了稳定细胞株的构建效率。同时该稳定细胞株的建立为CUEDC2的功能研究提供了必要的工具。 陈媛 巩伟丽 韩秋影 张飒 李涛关键词:CUEDC2 稳定细胞系 科研创新开拓传染病防控新范式 被引量:3 2020年 人类健康是社会文明进步的基础。习近平总书记强调,只有构建起强大的公共卫生体系,健全预警响应机制,全面提升防控和救治能力,织密防护网、筑牢筑实隔离墙,才能切实为维护人民健康提供有力保障。此次新冠肺炎疫情阻击战的“中国答卷”表明,只有依靠科学防控、立足科技创新才能建立起坚实的公共卫生安全屏障。鉴于此,《中国科学院院刊》在编委、中国科学院生物物理研究所阎锡蕴院士的指导推进下,策划组织了“公共卫生应急体系建设的战略思考”专题,以期为我国公共卫生应急体系建设贡献更多科技支撑、科学思想,从而增强我国抵御重大公共卫生安全事件的综合防范能力,为早日实现健康中国提供政策思路。 陈亮 陈媛 张学敏关键词:传染病防控 公共卫生安全 隔离墙 公共卫生体系 安全事件 EWS抑制TRIF和IKKε激活的IRF3的转录活性 2010年 为了研究EWS蛋白质对IRF3转录活性的影响,以及EWS蛋白对IRF3信号通路的调节,在真核细胞293T中表达Flag-EWS蛋白质,通过双荧光报告系统研究EWS对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示Flag-EWS蛋白质能够在真核细胞293T中正确表达,过表达EWS,能够抑制TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性,而且能够直接抑制IRF3的转录活性。 魏传宇 王晨辉 李文龙 陈亮 陈媛 穆蕊 方迪峰 李爱玲 靳宝峰 李慧艳 巩伟丽 周涛关键词:EWS 转录活性 14-3-3η抑制TRIF和IKKε激活的IRF3的转录活性 2010年 为了研究14-3-3蛋白是否参与了IRF3信号通路,以及14-3-3蛋白质对IRF3转录活性的影响,在真核细胞293T中表达14-3-3蛋白质的三种亚型,并且通过双荧光报告系统研究14-3-3蛋白对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示14-3-3蛋白质能够在真核细胞293T中正确表达,过表达14-3-3η能够抑制TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性,而且能够直接抑制IRF3转录活性。 魏传宇 王晨辉 李文龙 陈亮 陈媛 穆蕊 方迪峰 李爱玲 靳宝峰 李慧艳 巩伟丽 周涛关键词:转录活性