陈妮
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
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- HSP70 siRNA对宫颈癌HeLa细胞HSP70表达及细胞增殖与凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的通过体外实验观察HSP70的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响,探讨HSP70在HeLa细胞增殖和凋亡中的功能。方法针对HSP70基因设计siRNA序列,克隆到空载体pTZU6+1中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。在脂质体2000的介导下转染HeLa细胞,同时转染空载体为阴性对照及不加任何试剂的空白对照。转染48h后,应用半定量RT-PCR,Westernblot检测HeLa细胞HSP70mRNA及蛋白的表达情况;MTT法检测HeLa细胞的生长抑制率;AO/EB染色法观察HeLa细胞形态学变化;流式细胞术检测HeLa细胞的凋亡率和细胞周期分布情况。结果与对照组相比,转染pHSP70-siRNA组HSP70的mRNA及蛋白表达均明显下降(P<0.01),表明Phsp70-siRNA质粒转染能有效降低HSP70的表达;细胞生长抑制率明显增高(P<0.05),且在48h时细胞抑制率达到最大;在荧光显微镜下观察到HeLa细胞出现凋亡形态;流式细胞术结果显示pHSP70-siRNA组细胞凋亡率显著高于对照组,且G0/G1期细胞减少,G2/M和S期细胞增多。结论HSP70siRNA可以有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,促进HeLa细胞凋亡;HSP70可能成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点。
- 韩建红赖国旗陈妮易发平黄爱龙
- 关键词：HSP70热休克蛋白质类HELA细胞
- 乳腺良恶性病灶超声造影定性及定量分析
- 目的:总结乳腺良恶性病灶超声造影特点，探讨超声造影技术在乳腺良恶性肿块中的鉴别诊断价值。 方法:对2013年3月～2013年11月我院107例乳腺肿块患者进行超声造影检查，对肿块的增强方式及时间-强度曲线进行分析，总结...
- 陈妮
- 关键词：超声造影乳腺肿块
- 文献传递
- 小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的:构建小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)基因干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)重组腺病毒载体并在NIH3T3细胞中验证其干扰作用.方法:人工合成靶向CHD5的siRNA干扰序列,用分子克隆的方法插入到穿梭载体pSES-HUS上,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-SES-HUS-CHD5siRNA重组质粒,在HEK293细胞中包装成重组腺病毒Adr-simCHD5,然后感染NIH3T3细胞,用RT-PCR和Western Blot方法检测其对CHD5mRNA和蛋白表达的干扰效果.结果:得到高滴度Adr-CHD5siRNA重组腺病毒,RT-PCR和Western Blot结果表明该重组腺病毒能有效地降低CHD5基因的表达.结论:成功构建Adr-CHD5siRNA重组腺病毒载体,并在NIH3T3细胞上实现CHD5基因表达抑制,为进一步研究CHD5基因功能奠定了基础.
- 陈妮左国伟潘玥赖国旗杨根岭向廷秀韩建红黄云
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体
- CHD5在宫颈癌中的表达与功能初步研究
- 目的:在多种肿瘤中存在CHD5(chromodomain helicaseDNA-binding5)基因缺失、突变或甲基化,其中包括宫颈癌,该基因在抑制癌症发生发展中有重要作用。研究表明CHD5基因可通过p19Arf/5...
- 陈妮
- 关键词：重组腺病毒载体流式细胞术检测细胞周期分布腺病毒感染免疫组织化学检测免疫组织化学方法
- 真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24的构建及其在宫颈癌细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因和白细胞介素24(Interleutin-24,IL-24)基因的真核双基因表达载体,并观察其对宫颈癌细胞生长的影响情况。方法:采用分子克隆技术,将IL-24基因插入真核表达载体pBud-TRAIL中,构建双表达质粒pBud-TRAIL-IL-24,经酶切和测序鉴定后,转染宫颈癌HeLa细胞。荧光显微镜和免疫荧光双标技术检测TRAIL和IL-24在HeLa细胞中的表达。MTT法检测重组质粒对HeLa细胞生长状况的影响。结果:成功构建了真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24,并在宫颈癌细胞中表达;转染48 h后可见重组质粒对宫颈癌细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。结论:构建的双表达载体pBud-TRAIL-IL-24能在宫颈癌细胞中表达,并可有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,为进一步研究TRAIL和IL-24联合应用于宫颈癌的基因治疗奠定了基础。
- 潘玥向廷秀章海林陈妮陈飞兰赖国旗
- 关键词：宫颈癌细胞TRAIL基因IL-24基因
