陈和平
- 作品数:26 被引量:481H指数:11
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- 中国汉族人群检出新的B(A)641T>C等位基因被引量:44
- 2006年
- 目的明确稀有ABO表现型的遗传学基础。方法对ABO血清学常规定型正反不一致的样本,采用PCR-RFLP方法作初步基因分型,对8例血清学表现为AwB,而基因分型具有O基因的个体,进行ABO基因第6和7外显子PCR产物的TA克隆及核苷酸序列测定。结果8例样本除1对为母女关系外,其余无任何亲缘关系,血清学表现相似,红细胞上含有接近正常的B抗原和少量A抗原,H抗原含量较正常B细胞显著增高,血清中存在抗-A,初定为AwB,基因分型均为BO。克隆测序表明除具有正常O1或者O1V基因外,他们的B基因第7外显子在正常B等位基因的基础上,均发生单碱基突变,4例发生nt700C>G点突变,导致Pro234Ala,2例无关个体为nt640A>G点突变,导致Met214Val,1对母女均表现nt641T>C点突变,导致Met214Thr。证实所有8例样本真正血型应为B(A)表现型,其基因型均为B(A)/O型。结论在中国汉族人群中检出3种B(A)血型,除了已在我国台湾首先被发现的B(A)700C>G和笔者以前报道的B(A)640A>G之外,新发现1种B(A)641T>C等位基因。
- 郭忠慧向东朱自严刘曦陈和平刘达庄
- 关键词:ABO亚型B(A)血型等位基因
- 适合移植后嵌合物定量分析的信息STR位点谱的建立及其应用被引量:5
- 2009年
- 本研究选取8个STR位点作为嵌合物定量分析的信息STR位点谱,评估其作为异基因造血干细胞移植(HSCT)后移植物嵌合状态的定量监控指标的作用。采集15对移植供受者血样,提取DNA,分别合成标记D3S3045、D4S2366、D4S2639、D5S818、D13S317、D18S1002、D20S481、D22S689的引物,建立PCR扩增体系,在ABI3100仪上检测这些位点的扩增片段,筛选得到理想的信息位点;制备梯度供者/受者DNA混合品和移植后不同日期采集的标本,进行信息位点的检测;获取峰高或峰面积进行移植嵌合率的计算。结果显示,根据梯度混合DNA的结果获得标准曲线,计算得到的嵌合率和配制浓度中的嵌合比例基本一致;用峰高和峰面积同时计算,两者基本一致;成功获得了15例移植后病人的嵌合状态变化数据,并帮助诊断了1例复发病人。结论:本研究建立的信息STR位点谱及检测方法,可以较准确地定量监控嵌合状态,成功用于临床干细胞移植工作,与商品化试剂相比,更便宜,在使用上更灵活。
- 杨颖吴文王玲玲陈和平朱自严
- 关键词:嵌合状态异基因造血干细胞移植
- Celline1000高效快速生产单克隆抗体被引量:2
- 2002年
- 马东礼陈和平张雄民
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤技术异种蛋白
- 220例患者血型不规则抗体分析被引量:68
- 2003年
- 目的 对上海地区患者中不规则抗体检出情况进行回顾性总结。方法 对 2 0 0 0年以来上海各医院送检的免疫血液学标本 2 1 49例 ,应用盐水、抗球蛋白法、聚凝胺法检测不规则抗体。结果 共鉴定确认血型不规则抗体 2 2 0例。其中自身抗体 66例、确定同种特异性抗体 1 5 4例 ,分别为 :抗 -D41例、抗 -E3 7例、抗 -c E1 9例、抗 -Ce4例、抗 -CD3例、抗 -c4例、抗 -M 1 5例、抗 -N 3例、抗 -P1 2例、抗 -Lea 1例、抗 -Leb 4例、抗 -Lex 1例、抗 -Mur 3例、抗 -S 2例、抗 -HI 1 1例、抗 -Jkb 1例、抗 -Fyb 1例、抗 -Tja1例、抗 -I1例。结论 检出的不规则抗体与国外数据存在较大差异 ,国外常见的抗 -K、抗 -Fya 在国内较少见。产生抗体的患者 (不包括孕妇 )以女性居多。
- 向东张雄民王健莲沈伟陈和平朱自严刘达庄
- 关键词:血型不规则抗体抗球蛋白法盐水法
- Ax亚型的分子生物学研究被引量:17
- 2004年
- 目的 研究中国汉族人群Ax亚型的分子生物学特点。方法 首先采用双重PCR RLFP方法 ,对 8份血清学试验疑为Ax及AxB的标本 ,做ABO初步基因分型 ,明确其中的A、B或O基因 ;然后用限制性内切酶mobI筛选ABO基因第 7外显子中的T6 4 6A的突变。对不具有该突变而血清学疑为Ax的标本以及血清学和基因分型不一致的标本 ,则进一步对其ABO基因第 6和 7外显子做深入的克隆测序分析。结果 8份标本中有半数含有T6 4 6A点突变 ,剩余 4份中 ,1份为包含C4 0 7T和C4 6 7T错义突变的A weak 0 1等位基因 ,1份为携带新的核苷酸变异的Ax (C4 6 7T和C74 5T)等位基因 ,另外 2份血清学疑为AxB ,初步基因分型为BO的个体 ,克隆测序的结果显示两者均有正常的O基因 ,但是其B等位基因均发生了新的nt6 4 0位A G突变。结论 在中国汉族人群中检测到新的Ax及B(A)
- 郭忠慧向东朱自严刘曦沈伟陈和平王健莲张嘉敏刘达庄
- 关键词:AX亚型等位基因AX等位基因
- 抗人红细胞血型糖蛋白A非多态性表位单克隆抗体的制备和鉴定被引量:3
- 2008年
- 目的制备抗人红细胞血型糖蛋白A(Glycophorin A,GPA)非多态性表位单克隆抗体并鉴定其特性。方法用小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术获得分泌单抗-GPA非多态性表位的杂交瘤细胞株;鉴定抗体特异性和亚型;通过和各种酶处理细胞的反应确定单抗结合抗原位点的特性。结果得到的2株抗-GPA非多态性表位的单克隆细胞株Q6D7和Q7C9,均属IgG1亚类、Kappa型轻链,所针对的抗原位点均抗胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶处理,对无花果酶、木瓜酶、唾液酸酶敏感。结论制备获得2株抗-GPA非多态性表位单克隆抗体。
- 张嘉敏陈和平王芬朱自严
- 关键词:单克隆抗体血型糖蛋白A
- 中国类孟买血型FUT1和FUT2基因研究被引量:65
- 2004年
- 目的 研究中国类孟买血型的 FUT1和 FUT2基因构成。方法 10个血清学初步分析为类孟买血型的标本来源于不同地区 ,ABO常规定型 ,吸收放散试验鉴定其红细胞表面少量 A或 B抗原 ,检测唾液中分泌型血型物质 ,或通过 L ewis血型间接了解其分泌状态。聚合酶链反应 -限制性片段长度多态方法进行 ABO基因分型 ,并与血清学结果相互验证。对 FUT1(H)和 FUT2 (SE)的编码区进行 PCR产物直接测序 ,了解其 H及 SE位点基因型及核苷酸序列组成。结果 血清学和分子生物学两种方法证实 10例皆为罕见的类孟买血型。检测到 h1(nt5 4 7- 5 5 2Δag)、h2 (nt880 - 882Δtt)、h3(nt6 5 8c→ t)和 h4 (nt35 c→ t) 4个FUT1座位上的隐性基因 ,同时发现两种新的隐性等位基因 :hnew- 1 (nt5 86 c→t)和 hnew- 2 (nt32 8g→ a)。 10例中国类孟买个体 FU T2位点的研究表明 ,所有被研究标本的 FU T2基因 ,都具有 nt35 7c→ t的同义突变 ,其中 1例为 Seweak等位基因纯合子。结论 H位点的无效等位基因具有较为广泛的遗传多态性。除了已经报道的 h等位基因外 ,在中国类孟买个体中我们检测到两种新的隐性等位基因 ,并检出 1个 Sew的类孟买个体及 Se基因的一种新的 G716 A单核苷酸多态性位点。
- 郭忠慧向东朱自严王健莲张嘉敏刘曦沈伟陈和平
- 关键词:聚合酶链反应
- Olympus微孔板法检测稀有血型的效果被引量:2
- 2008年
- 王晨陈和平朱自严
- 关键词:稀有血型
- 罕见的CisAB与B(A)血型的基因型研究被引量:82
- 2004年
- 目的 研究ABO血型系统中血清定型与基因型不一致的情况 ,通过核苷酸序列分析 ,最终阐明其真正血型。方法 应用吸收放散等实验 ,研究血清学实验中ABO正反定型不一致的情况 ,同时采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法 ,进行ABO初步基因分型 ,对二者结果矛盾的特殊标本则通过克隆测序了解他们的ABO基因第 6和第 7外显子的核苷酸序列构成。结果 在近年来收集到的并且做过基因分型的 3 5例ABO亚型标本中 ,有 7例标本血清学与基因分型不一致 ,血清学为AB亚型但基因分型却具有O基因。4例ABx ,基因分型均为A 10 2 /O ,其A基因在A 10 1的基础上 ,均有nt467(C→T)和nt80 3位 (G→C)的点突变 ,即都属于CisAB 0 1等位基因 ,真正的基因型是CisAB/O ;另外 3例血清学疑为AxB ,基因分型为BO的个体 ,除皆具有正常O基因外 ,其B基因在正常B等位基因的基础上 ,均发生单碱基突变 ,其中 1例存在nt70 0 (C→G) ,属于已经报道的B(A) 70 0等位基因 ;另外 2例无亲缘关系标本的B基因均存在新的nt64 0 (A→G)的点突变 ,导致 2 14位甲硫氨酸被缬氨酸置换。结论 通过核苷酸序列分析 ,证实 7例血清学表现为AB亚型而具有正常O基因的个体 ,4例是罕见的CisAB ,3例为B(A )型 ;同时在中国汉族ABO亚型人群中 ,检出一种新的B(A)
- 郭忠慧向东朱自严刘曦王健莲陈和平张嘉敏沈伟王晨刘达庄
- 关键词:血型B基因单碱基突变甲硫氨酸
- 中国人群RHD基因连传模式的研究
- 朱自严郭忠慧叶璐夷张嘉敏向东陈和平刘曦王晨沈伟王建莲李勤刘达庄
- 本课题名称为“中国人群RHD基因遗传模式的研究”,受上海市卫生局科学研究基金资助(01432),完成时间为2002.1~2004.12,课题负责人朱自严,完成单位为上海市血液中心。 从临床上讲,除ABO血型系外,RHD...
- 关键词:
- 关键词:RHD基因多态性