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重组人促红细胞生成素对离体培养视网膜神经节细胞的影响: 2007年; 目的研究重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoiain，rhEPO）对培养的视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）存活、突起生长及生长相关蛋白43（growth associmed protein43，GAP-43）表达的影响，探讨rhEPO对培养RGCs可能的作用机制。方法分别用DMEM及含有rhEPO的DMEM对RGCs进行离体培养，观察RGCs在体外存活的时间，测量2d、4d、6dRGCs的最长突起长度；免疫细胞化学检测GAP-43蛋白表达，并测定平均灰度值。结果DMEM组离体培养RGCs于6～8d死亡，而rhEPO组RGCs能存活10～12d，存活时间较DMEM组显著延长（P〈0．01）。培养2d、4d、6d时，DMEM组最长突起长度依次为（42．90±4．71）μm、（79．74±8．49）μm、（110．02±10．79）μm，rhEPO组依次为（55．47±7．07）μm、（100．16±7．78）μm、（118．63±11．50）μm，培养2d、4d时rhEPO组与DMEM组相比差异非常显著（P〈0．01），6d时差异显著（P〈0．05）。2组细胞在培养2d时GAP-43蛋白的表达水平较高，4d时GAP-43蛋白表达到高峰。6d时GAP-43蛋白的表达水平明显降低。各时间点rhEPO组RGCsGAP-43蛋白的表达均较DMEM组有明显增高，与DMEM组相比均有非常显著差异（P〈0．01）。结论rhEPO可延长离体培养RGCs的存活时间和促进其突起的生长。上调离体培养RGCs GAP-43蛋白的表达。rhEPO促进RGCs突起生长的作用可能通过上调RGCs GAP-43蛋白的表达来实现。[眼科新进展2007；27（3）：138-192]; 牛建军曾玉晓王一阴正勤王仕军陈中山刘康; 关键词：重组人促红细胞生成素视网膜神经节细胞细胞培养生长相关蛋白-43

培养大鼠视网膜神经节细胞的形态学与电生理学特性△被引量：2: 2006年; 目的比较不同培养天数大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)形态学特性与电生理功能,探讨其形态与功能的最佳培养时期。方法采用出生后0dLong Evans大鼠,取视网膜培养神经节细胞,分别于培养后第1d、4d、7d3个时间点观察细胞形态,并行膜片钳全细胞记录研究其静息膜电位(resting membrane potential,RMP)和动作电位(action potential,AP)的阈值、幅度及波宽。结果共记录到53个RGCs,根据AP类型RGCs分为单峰型(39个)、瞬变型(11个)和持续型(3个),其中以单峰型为主(占73.6%)。培养1d RGCs不易诱发AP,多数细胞需增加刺激强度后方可诱发出AP;培养4d时绝大多数RGCs给予20PA的刺激即可诱发出AP;培养7d时虽较容易诱发AP,但由于此时细胞存活状态较差,部分细胞(共记录28个细胞,其中8个不能诱发AP)给予不同强度的刺激,均不能诱发出AP。不同培养时期的RGCs静息膜电位和AP的特性无显著差异。结论随着培养时间的延长RGCs形态逐渐趋于成熟,但电生理功能仍处于幼稚状态;培养4d的RGCs形态和电生理状态最好。; 曾玉晓陈中山王仕军陈丽峰牛建军阴正勤; 关键词：视网膜神经节细胞细胞形态学电生理学

视网膜变性过程中神经节细胞钠电流和纳通道蛋白特性研究: 目的：研究 RCS 大鼠视网膜变性过程中神经节细胞 (RGCs)钠通道电流特性,以及钠通道蛋白的改变,探索感光细胞输入障碍致视网膜内层神经元变性的可能机制。方法：1、取出生后21天(P21d)、60天(P60d)和90天; 陈中山阴正勤; 文献传递

视网膜色素变性大鼠闪光视网膜电图及神经节细胞动作电位改变被引量：2: 2007年; 皇家外科学院大矗土（RCS）为遗传性视网膜色素变性的经典动物模型，随着感光细胞的变性死亡，包括视网膜神经节细胞（RGC）在内的内层神经元电生理功能究竟发生了怎样的改变，至今知之甚少。RGC以动作电位（AP）的方式将来自于感光细胞的信息向上传递，视网膜变性过程中RGC电生理特性的变化尚未见报道。; 陈中山阴正勤王仕军曾玉晓; 关键词：视网膜神经节细胞膜片钳术

RCS大鼠病变发展过程中视网膜及神经节细胞电生理特性研究: ＜正＞目的:通过检测RCS大鼠F-ERG及对视网膜神经节细胞（RGCs）行膜片钳全细胞记录,了解随着病变的发展RCS大鼠整体视网膜功能及单个神经元功能状况,进一步认识视网膜变性疾病的发生发展及可能机制,以及为视网膜移植治...; 陈中山阴正勤王仕军曾玉晓; 关键词：RCS大鼠膜片钳视网膜; 文献传递

动物眼视网膜冰冻切片制作方法: 目的：摸索动物眼视网膜的冰冻切片方法,得到高质量的切片。方法：采用 Leica CM1900冰冻切片机,制作猪视网膜片冰冻切片50余例,鼠视网膜片130余例,观察其组织结构。结果：去除其他组织及液体的影响是视网膜切片的关...; 曾玉晓陈中山田春雨李世迎阴正勤; 文献传递

视网膜变性过程中神经节细胞melanopsin蛋白的表达: 目的：研究视网膜变性 RCS 大鼠病变发展过程中含 melan- opsin 在视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs) 上表达和分布的变化。方法：1、取出生后21天(P21d)、 P6...; 陈中山阴正勤翁传煌陈丽峰曾玉晓; 文献传递

动物眼视网膜冰冻切片制作方法被引量：4: 2007年; 目的探索动物眼视网膜的冰冻切片方法,以期得到高质量的切片。方法采用LeicaCM1900冰冻切片机,制作猪视网膜冰冻切片50余例,鼠视网膜冰冻切片130余例,观察其组织结构。结果去除其他组织及液体的影响是视网膜切片的关键,以保持良好的组织形态。结论所有组织和细胞切片的一个重要环节就是尽可能地保存组织和细胞以再现其生活状态,因此切片前固定、脱水及其他处理起着非常关键的作用。; 曾玉晓陈中山田春雨李世迎阴正勤; 关键词：动物视网膜冰冻切片

重组人促红细胞生成素对视神经不完全损伤后视网膜神经元的保护作用被引量：8: 2007年; 目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinat human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视神经(optic nerve,ON)不完全损伤后视网膜神经元凋亡的抑制作用和对视功能修复的影响。方法雄性Long Evans大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只。制作ON不完全损伤模型。实验组和对照组按ON夹伤后不同时间分为伤后1d、3d、5d、7d、14d5个时间点。实验组伤后即时、3d、5d、7d,按5000U·kg-1体重腹腔内注射rhEPO;对照组注射等量生理盐水。伤后1d、3d、5d、7d、14d取材。取材前行闪光视觉诱发电位检测。应用TUNEL法检测视网膜神经元的凋亡。结果伤后7d、14d对照组视网膜凋亡细胞密集分布于视网膜节细胞层及内、外核层。实验组7d、14d视网膜凋亡细胞明显减少,视网膜节细胞层的凋亡细胞与对照组相比有非常显著差异(P<0.01)。2组闪光视觉诱发电位潜伏期各时间点组间比较无显著性差异(P>0.05)。伤后1d、3d、5d、7d实验组P1-N2波振幅和对照组相比无显著性差异(P>0.05);伤后14d时有显著差异(P<0.05)。结论rhEPO对ON不完全损伤后视网膜神经元的凋亡具有抑制作用,可以促进视功能的恢复。; 牛建军王一曾玉晓阴正勤王仕军陈中山; 关键词：重组人促红细胞生成素视神经神经元凋亡闪光视觉诱发电位

视网膜干细胞分化不同阶段电生理膜学特性研究: ＜正＞目的:比较体外培养的大鼠视网膜干细胞（RSCs）不同分化阶段形态学特性、特异性抗原的出现时问与电生理膜学特性之间的关系,了解这些干细胞是否能够发育成为有功能的神经元,探索RSCs移植治疗视网膜变性疾病的最佳时机。方...; 陈丽峰阴正勤曾玉晓陈中山翁传煌田春雨; 文献传递

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陈中山

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