阙晓枫
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
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- 免疫小鼠制备植物病毒腹水抗体的研究和应用
- 1989年
- 南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草花叶病毒(TMV)经 PEG 沉淀、差速离心、梯度离心纯化后,以每只鼠0.1、0.5、1 0、1.5、2mg 剂量,每周一次,共三次分别免疫小鼠,末次免疫后8天注射鼠腹水癌细胞(S_(180)),8～13天后鼠腹部膨大,抽取腹水,离心,取上清液,即为特异腹水抗体。实验证明:每只小鼠免疫0.1mg 抗原,获得抗体滴度1:200万(ELISA);免疫1.5mg,可获得最高滴度1:3200万的特异抗体。同时,还研制了大豆花叶病在毒(SMV)、马铃薯×病毒(PVX),马铃薯 Y 病毒(PVY),蚕豆萎蔫病毒(BBWV)、花生矮花病毒(PSV)、芜菁花叶病毒(T_uMV)腹水抗体,滴度为1:400万～3200万。一般一只小鼠可以获得20～40ml,最多66ml 腹水抗体,其抗体性质与同种抗原免疫兔、鼠制备的抗血清相同。这是用微量抗原制备多量特异抗体的好方法。用鼠腹水抗体与兔抗血清组合异种动物抗体双夹心酶联试验,可得到与经典的双抗体夹心法相当或略好的检测效果,又不需自制特异抗体酶标记物,适用于检测大量样品,为植物检疫提供一个好的检验手段。
- 张成良张作芳陆家理陈京宋淑敏阙晓枫
- 关键词：植物病毒抗体免疫小鼠
- ELISA检测植物病毒过程中减少非特异反应的有效方法——酶联板处理被引量：3
- 1989年
- 酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种快速、准确、经济、简便的免疫学检测手段,并具有作大规模检测和灵敏度高的优点。但用于植物病毒粗汁液检测,往往存在着病健样品的吸收值之比(P/N)太低,阴阳性反应难以判别的问题。酶联板的处理能消除或大大减缓此问題。在本实验中,我们用氢氧化钠/乙醇液处理酶联板,效果十分显著。在对不同组10种植物病毒粗汁液的检测中,使用处理板并设未处理板作对照,结果前者无一例外的大大提高了病毒特异性吸收值及P/N值,从而使ELISA检测植物病毒粗汁液的特异性吸收值提高0.8～5倍,灵敏度提高10～1000倍。
- 由雪娟阙晓枫
- 关键词：植物病毒
- 用聚乙二醇沉淀法粗提纯植物病毒被引量：10
- 1989年
- 南方菜豆花叶病毒(SBMV)经两次PEG沉淀提纯的粗提纯病毒制剂和经密度梯度提纯的精提纯病毒制剂,在电镜下均能观察到大量的球状病毒,且均具有典型的核蛋白吸收图谱。两种方法提纯的病毒制剂免疫家兔,都能制备出效价高达1/1024(免疫双扩散法)的抗血清。此外,烟草花叶病毒(TMV),黄瓜花叶病毒(CMV),马铃薯Y病毒(N株系)(PVY^N),苜蓿花叶病毒(AMV)和烟草坏死病毒(TNV)用PEG沉淀法粗提纯病毒也均获得良好的效果。
- 胡伟贞由雪娟张作芳张成良阙晓枫赵瑞生
- 关键词：植物病毒提纯聚乙二醇沉淀法
- 对一株从国际花展截获的烟草花叶病毒抗原决定簇的分析
- 1989年
- 从北京国际花展上截获烟草花叶病毒(TMV)仙人指分离物,与仙人掌病毒复合感染仙人指,使原来生长很好的仙人指,短期内发生急性坏死,并导致仙人指死亡。为了解分离物的抗原特性,在用常规血清学方法鉴定的基础上,又采用单克隆抗体进一步与TMV中、日、美六个典型株系进行比较鉴定。结果表明该分离物的抗原性接近中国番茄和日本番茄株系,但在外壳蛋白表面抗原结构上,尚有细微的差异,而与OM株,U_1株,中国普通株及U_2株有较大的差异。
- 阙晓枫张成良张作芳
- 关键词：花叶病毒植物检疫
- 生物素抗生物素酶联法检测植物病毒的研究
- 1990年
- 生物素抗生物素引入酶联免疫吸咐试验(ELISA)检测南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草花叶病毒(TMV)抗原和抗体,可使灵敏度提高10倍以上,非特异反应弱,尤其是检测周期由8小时缩短为3小时,在植物检疫、单克隆抗体阳性杂交瘤细胞检测筛选中应用,是一个快速、准确的好方法。
- 张成良张作芳陆家珏阙晓枫田波季良
- 关键词：植物病毒烟草花叶病毒酶联法抗体滴度
- 分泌抗玉米细菌性枯萎菌单克隆抗体细胞瘤株的建立及抗体测定被引量：2
- 1990年
- 用玉米细菌性枯萎菌(745)免疫BALB/C小鼠得到的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0—Ag14融合,获得G_5、C_2和D_13株稳定分泌抗745菌的单克隆抗体的细胞瘤株。用ELISA间接法测定抗体滴度为1:25600。其中G_5和D_1能与所有供试的9个745菌株系有不同程度的反应,而C_2只与7个745菌株反应。3个单克隆抗体均不与供试的同属其它菌反应。
- 陈京阙晓枫张作芳张成良
- 关键词：玉米单克隆抗体
