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疟原虫的转染及分子功能研究被引量：1: 2001年; 疟疾是一种严重危害人类健康的寄生虫病 ,疟原虫转染技术的建立 ,为我们在分子水平上研究这种病原体的生物学特性和发病机理 ,并最终能控制这种传染病提供了一种强有力的工具 .; 钱锋潘卫庆; 关键词：疟原虫转染基因功能疟疾生物学特性发病机理

用四环素调控启动子调控表达恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1全合成基因: 2000年; [目的 ]用含四环素调控启动子 (PLtetO 1 启动子 )的pZE11质粒表达恶性疟原虫MSP1全合成基因及其C末端 42kDa片段。 [方法 ]将MSP1全合成基因和MSP1C末端 42kDa片段基因分别克隆入受四环素诱导调控的质粒pZE11上 ,转化大肠杆菌DH5αZ1,质粒经酶切、SDS PAGE电泳和Westernblotting反应鉴定重组质粒的构建和重组质粒在DH5αZ1中的表达。 [结果 ]成功地构建了重组pZE11 MSP1质粒和pZE11 MSP1 42质粒 ,SDS PAGE电泳和免疫印迹 (Westernblotting)反应证明两个重组质粒在DH5αZ1中表达了 190和 42kDa蛋白。 [结论 ]含PLtetO 1 启动子的新型表达载体成功地表达了恶性疟原虫MSP1蛋白 ,降低表达产物对宿主细胞的毒性 ,并可为构建受四环素诱导的疟疾———伤寒口服疫苗株提供依据。; 钱锋潘卫庆; 关键词：大肠杆菌恶性疟原虫

恶性疟原虫TRAP/CSP融合抗原的构建及表达: 2002年; 目的　构建恶性疟原虫红前期融合蛋白 4(PfCP 4)。　方法　通过甘氨酸脯氨酸甘氨酸 (GPG)接点将恶性疟原虫 3D7株血凝素相关匿名蛋白 (TRAP)膜外区序列 (氨基酸 2 6～ 3 3 0 )和环子孢子蛋白 (CSP) 19个 4肽重复区及其羧基末端序列 (氨基酸 199～ 3 83 )连接 ,采用不对称PCR法人工合成 15 77bpPfCP 4基因。将PfCP 4基因克隆在pQE表达质粒上 ,转化大肠杆菌SG13 0 0 9后进行诱导表达 ,用抗CSP的免疫血清进行免疫印迹检测。　结果　免疫印迹检测显示在 5 7kDa处出现特异的表达条带 ,其大小与推算的PfCP 4分子量一致 ,表明PfCP 4合成基因能在大肠杆菌中表达分子量为 5 7kDa的PfCP 4重组蛋白。　结论　成功构建了PfCP 4。; 杜景伶潘卫庆钱锋谢超; 关键词：恶性疟原虫环子孢子蛋白疟疾疟疾疫苗抗原

疟疾疫苗研究进展被引量：3: 2005年; 疫苗是控制乃至消灭传染性疾病的有效手段。疫苗的应用使天花、脊髓灰质炎得以消灭或基本消灭、麻疹流行得到有效控制。虽然致疟疾的病原体疟原虫的生活史及构造远较病毒和细菌复杂,但随着疟原虫的抗药性虫株和抗杀虫剂蚊媒的出现,研制有效的疟疾疫苗仍是控制疟疾发病率和死亡率的首选目标之一。该文就这方面的研究进展作一综述。; 曲莉钱锋; 关键词：疟疾疫苗

恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体制备及功能分析被引量：1: 2006年; 目的制备恶性疟原虫(FCC1/HN株)融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体,分析其生物学特性及功能。方法用PfCP-2.9免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞及SP2/0骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG1500)作用下进行融合,制备单克隆抗体,并分析其特性。结果获得1株能分泌抗PfCP-2.9的小鼠杂交瘤细胞株单克隆抗体F12D,经免疫球蛋白类型和亚类鉴定为IgG1。ELISA和蛋白质印迹法(Westernblotting)显示单克隆抗体F12D能与PfCP-2.9发生特异性反应,F12D所识别的PfCP-2.9抗原表位不能耐受还原剂巯基乙醇,表明F12D识别的是构象表位。间接免疫荧光试验(IFA)显示F12D可识别培养的FCC1/HN。体外抑制试验结果显示,F12D终浓度为0.3mg/ml时,对FCC1/HN的抑制率为56%。结论单克隆抗体F12D能与PfCP-2.9发生特异性反应,其所识别表位为构象表位,F12D可识别体外培养的FCC1/HN,并对其生长具有抑制作用。; 王瑞钱锋曲莉潘卫庆; 关键词：恶性疟原虫疟疾疫苗单克隆抗体免疫显性表位

克隆有恶性疟原虫MSP1基因片断的pQE质粒在减毒鼠伤寒杆菌X4064株中的表达被引量：1: 1998年; 为探讨克隆有恶性疟原虫ＭＳＰ１基因片断的重组ｐＱＥＭ１质粒在减毒鼠伤寒杆菌中的表达。使用转化和转导的方法构建减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）和减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）的表达。实验结果成功地构建了减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１），Ｘ４０６４（ｐＲＥＰ４／ｐＱＥＭ１）的诱导型表达量高于Ｘ４０６４（ｐＱＥＭ１）的组成型表达量。; 钱锋管惟滨方军蒋春雷; 关键词：恶性疟原虫 MSP1 基因片段减毒鼠伤寒杆菌克隆

疟色素及其与氯喹作用机制相关的研究进展: 2004年; 多种机制参与了疟原虫对氯喹的抗药性。通过对疟色素形成、作用、氯喹抗疟作用以及氯喹抗性产生及与疟色素关系等方面的综述 ,力求对氯喹抗性的产生提出较全面的解释 ,为氯喹抗性机制研究提供参考。; 许晶朱淮民钱锋; 关键词：抗药性疟原虫

银染法观察胶体金标记的恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白与人红细胞的结合作用被引量：2: 1996年; 恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白－１，又称Ｐ１９５，与人红细胞膜具有结合作用，这种结合是裂殖子识别红细胞的基础。为了确定Ｐ１９５蛋白与人红细胞的结合位点，我们在大肠杆菌中分８段表达了Ｐ１９５蛋白。各段表达蛋白经过提纯与复性后，用胶体金标记。标记后的各段蛋白分别与人红细胞共孵育。然后将此红细胞加入到银显影液中。结果发现，红细胞在与一段Ｐ１９５蛋白（Ｍ６，氨基酸序列为３８４－５９５）共孵育并加入到银显影液中后，红细胞表面出现黑色银沉淀。而红细胞在与其它各段Ｐ１９５蛋白进行同样操作后，红细胞表面没有出现黑色银沉淀。这表明经胶体金标记后的Ｍ６与人红细胞具有结合作用。Ｍ６所对应的区域可能就是Ｐ１９５蛋白的红细胞结合区域。; 方军戚丽君钱锋何斌管惟滨; 关键词：恶性疟原虫胶体金疟原虫

含恶性疟原虫基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌的免疫效果被引量：2: 2000年; 减毒鼠伤寒杆菌可被用作外源抗原基因经口导入宿主免疫系统的载体,能有效地激发起宿主针对该外源抗原的免疫应答反应.恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(merozoite surfaceprotein 1,MSP1)是恶性疟原虫红内期的重要候选抗原.我们已成功地将克隆有恶性疟原虫MSP1第1号基因片段(M1)的pQE质粒导入了减毒鼠伤寒杆菌x4064株中,构建成x4064(pQEM1)重组菌,测定了其在小鼠体内的稳定性.本文就X4064(pQEM1)重组菌接种小鼠后所激发的针对M1蛋白的免疫应答进行了初步的检测.; 钱锋管惟滨方军蒋春雷; 关键词：减毒鼠伤寒杆菌恶性疟原虫免疫

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钱锋