郭泽建
- 作品数：82 被引量：620H指数：16
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自然科学总论轻工技术与工程更多>>
- 表达Cryptogein基因的烟草抗病性和耐盐性增强被引量：8
- 2004年
- 隐地蛋白(cryptogein, Crypt)是由隐地疫霉(Phytophthora cryptogea)分泌的一种分子量约为10 kD的蛋白类激发子. 用农杆菌介导的叶盘转化法获转Crypt (PAL::Crypt)和CryK13V (CaMV35S::CryK13V) 基因的烟草植株. 接种试验结果表明, T2代转基因烟草株系对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var nicotiana, Ppn)、赤星病菌(Alternaria alternata)和野火病菌(Pseudomonas syringae pv tabaci)的抗性显著增强. Northern杂交和RT-PCR分析结果表明, 低水平的表达转化基因Crypt和CryK13V就足以激活PR-1a和PR-5等防卫反应相关基因的表达; 在PAL::Crypt转化系统中, 病原菌Ppn能快速和高水平诱导PR-1a等病程相关基因的表达, 表明诱导型PAL启动子对入侵病原菌能及时识别并快速、有效地激活防卫反应, 从而赋予转基因植株抵抗病原菌侵染的能力. 研究还发现, 表达Crypt和CryK13V基因的烟草植株耐盐性比对照明显提高, 转化株系中高水平组成型表达PR基因和转录因子可能与耐盐性增强有一定正相关性. 上述结果表明, 植物对生物和非生物逆境的抗性途径和机制存在着交叉.
- 蒋冬花陈旭君吴坤陆郭泽建
- 关键词：耐盐性抗病性基因工程烟草病原菌
- 水稻WRKY19基因启动子功能研究初报被引量：3
- 2007年
- 利用已获得的水稻WRKY19基因启动子(OsW19p::GUS)的转基因植株进行研究,分析了OsW19p在T1代苗期时的诱导表达特性,GUS荧光测定结果表明:OsW19p的表达可被ABA(100μmol/L)、SA(500μmol/L)、高温(42℃)、低温(5℃)和伤处理增强;被2,4-D(1μmol/L)、NaCl(200mmol/L)和PEG4000(25%)处理抑制;IAA(5μmol/L)、MeJA(100μmol/L)和紫外线照射处理对OsW19p的表达几乎没有影响。OsW19p在转基因植株根中的表达水平高于35s,但在叶片中低于35s。OsW19p在转基因水稻扬花期茎部中表达水平最高,其次是花、叶鞘和叶片,在根部表达水平最低。
- 郝中娜王海华吴学龙郭泽建
- 关键词：水稻WRKY基因启动子
- 谷胱苷肽及其类似物诱导大豆活性氧和植保素的积累被引量：2
- 2007年
- 谷胱苷肽(Glutathione,GSH)是一种重要的抗氧化剂,但它能诱导一些豆科等植物的防卫反应。本文采用大豆悬浮细胞体系分析了GSH及其衍生物诱导大豆活性氧和大豆植保素大豆素(glyceollin)的积累。GSH诱导大豆素和黄苷元的积累,并有一定的剂量关系。N-乙酰半胱氨酸、巯基乙醇、二硫苏糖醇没有激发子活性,但氧化型谷胱苷肽能激发大豆的防卫反应。在巯基被修饰的化合物中,S-对叠氮苯甲基谷胱苷肽和S-对氯苯甲基谷胱苷肽能够诱导大豆素和H2O2的产生,S-己基谷胱苷肽也能诱导一定量的H2O2积累。水杨酸和蛋白酶抑制剂DFP能增强芫菁素或者酵母细胞壁激发子诱导的大豆素积累,但对GSH没有相似的增强效果。这些结果表明GSH中的巯基并不是激发所必需的,大疏水基团能弥补巯基的作用。另外,GSH诱导大豆素积累信号传导途径可能与芫菁素的不同。
- 刘文奇陈旭君郭泽建
- 关键词：活性氧植保素大豆
- 水稻WRKY89中的亮氨酸拉链结构增强蛋白与W盒元件的相互作用被引量：8
- 2005年
- WRKY蛋白是一类参与植物生物和非生物胁迫反应、代谢、发育等过程的转录调节因子.水稻WRKY89与其他的WRKY成员同源性较低,推测由263个氨基酸组成,其N端带1个可能的亮氨酸拉链结构.采用pET-29b载体原核表达了OsWRKY89和其3个N端缺失的衍生物,并采用Ni柱的方法对表达的蛋白进行了纯化.凝胶阻滞结果表明,OsWRKY89能与含顺式元件W盒的DNA序列特异结合,而缺失N端亮氨酸拉链的OsWRKY89与该元件的结合能力显著下降.酵母双杂交结果表明,亮氨酸拉链样结构参与OsWRKY89蛋白的同源相互作用.进一步缺失OsWRKY89至部分WRKY结构域导致表达的蛋白完全丧失与上述元件的结合活性,表明WRKY结构域是DNA结合中不可缺少的.这些结果说明亮氨酸拉链结构在蛋白质与蛋白质互作和DNA与蛋白质中起重要作用.
- 王海华郝中娜谢科吴坤陆郭泽建
- 关键词：相互作用增强蛋白水稻转录调节因子胁迫反应顺式元件
- 信号传导拮抗物对大豆细胞植保素和异黄酮积累的影响被引量：3
- 2003年
- 磷酸酶的抑制剂花萼海绵诱癌素A、芫菁素和冈田酸都能诱导大豆植保素 (大豆素 )的积累。相反 ,激酶的抑制剂K2 5 2a几乎完全阻止它们诱导大豆素的合成。与磷酸酶抑制剂相比较 ,酵母细胞壁激发子 (YE)有利于诱导黄苷元、染料木苷等异黄酮中间体的积累 ,而磷酸酶的抑制剂有利于大豆素的合成。YE和芫菁素还呈现出协同诱导大豆素积累的效果。通过磷脂酶A2 的抑制剂与阻止线粒体ATP合酶活性的化合物的分别处理 ,发现茉莉酸信号传导途径是参与调控大豆植保素合成的重要途径之一 ,而植保素的合成需要线粒体提供能量。
- 刘文奇郭泽建
- 关键词：异黄酮植保素大豆
- 玉米纹枯病菌细胞核纯化与原生质体转化的探讨被引量：1
- 2014年
- 引起玉米纹枯病的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani K(u|¨)hn)多为多核杂核真菌,也难以通过有性态使其细胞核进行单一化。利用原生质体再生的方法对单核玉米纹枯病菌JN的细胞核进行同核纯化,比较从单个原生质体再生菌获得的rDNAITS序列,发现序列间存在差异,说明其细胞核没有达到预期纯化的效果。继而扩增了双核和多核玉米纹枯病菌的rDNAITS序列,发现它们自身的rDNA-ITS序列也存在差异,因此认为立枯丝核菌的这种rDNA-ITS序列的差异可能是长期未经过有性阶段的结果且与其细胞核数目无关。使用转化丝状真菌的载体转化纹枯菌未获得稳定的转化子,进而对载体进行了改造,用纹枯菌(AG-3)actin基因的启动子和终止子控制潮霉素基因构建了载体pRsA。利用PEG介导的原生质体转化方法,实现了对单核纹枯菌的转化,PCR验证得到3个转化子。但在PDA培养基连续继代5代后,转化子的潮霉素抗性消失。结果对改进纹枯菌的转化方法有借鉴意义。
- 张眉周善跃陈旭君李宝笃郭泽建
- 关键词：玉米纹枯病菌原生质体
- 生防制剂与诱导植物抗病性
- 分析了植物生防制剂及其使用特点,重点介绍了植物生防制剂菌株的改良途径,对植物诱导抗病性概念、特点、产生机理进行了概述,同时对植物诱导抗病性的应用前景作了展望。
- 刘士旺郭泽建
- 关键词：生防制剂植物抗病性
- 文献传递
- 激发素与植物互作及抗病防卫信号传导被引量：4
- 2004年
- 激发素是一类由疫霉属 Phytophthora 等真菌分泌的,可诱导茄科、十字花科等植物过敏性反应和系统获得抗病性的蛋白类激发子。激发素与植物的互作系统为研究植物抗病防卫信号传导途径提供了一个极好的模式。最近发现:激发素具有转移甾醇的活性,而形成甾醇和激发素复合物又是激发素与受体蛋白互作和激活抗病防卫信号传导途径的前提条件,也是对最近提出的病原激发子与受体互作“保卫假说”的支持。用^(125)I 标记法,找到了激发素的受体蛋白,由分子量约为160kD 和50kD 的2个亚基构成,被认为是 Ca^(2+)通道。在激发素激活的烟草抗病防卫信号传导途径中,蛋白质的磷酸化起着至关重要的作用,抑制蛋白激酶的活性,可阻止离子交换、活性氧进发、植保素合成等多种防卫反应;Ca^(2+)参与诱导活性氧进发和植保素合成,活性氧进发与细胞死亡相关连,而植保素的合成与活性氧进发无关,过敏性反应对抗病防卫反应的建立不是必需的。激发素抗病基因工程在广谱抗病育种中具有广泛的应用前景。
- 蒋冬花郭泽建
- 关键词：植物信号传导系统获得抗病性蛋白质磷酸化过敏性反应疫霉
- 表达的hrmA蛋白质具有诱导水稻细胞产生防卫反应的活性被引量：1
- 2005年
- 将丁香假单胞菌hrmA基因构建到原核表达载体pET 29中,得到重组载体pET hrmA。将重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,获得了以包含体形式存在的融合蛋白。复性的融合蛋白能诱导水稻悬浮细胞的活性氧迸发,处理20min后达到峰值。Northern杂交结果表明hrmA蛋白能显著地诱导PBZ1基因在水稻悬浮细胞中表达,在所观察的时间内PBZ1基因表达丰度随处理时间延长而增加,用hrmA处理水稻植株,诱导了PAL基因的表达。实验结果表明hrmA融合蛋白具有激活水稻细胞防卫反应的活性。
- 程志强吴学龙陈旭君李德葆郭泽建
- 关键词：蛋白质表达激发子
- 水稻水杨酸羟基化酶及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种水稻水杨酸羟基化酶及其编码基因和应用。本发明对四个水稻水杨酸羟基化酶及其编码基因的功能进行了研究，并构建了单敲、双敲、四基因敲除突变体。实验结果表明，水稻水杨酸羟基化酶敲除突变体中，参与植物抗病的樱花素含...
- 陈旭君梁兵兵郭泽建王含
- 文献传递
