郭柏鸿
- 作品数:27 被引量:62H指数:4
- 供职机构:甘肃省人民医院更多>>
- 发文基金:甘肃省自然科学基金甘肃省兰州市科技计划项目兰州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术电子电信更多>>
- 用SSH方法构建BTCC患者尿脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库被引量:1
- 2008年
- 目的:应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建膀胱移行细胞癌(BTCC)患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因cDNA消减文库。方法:分别从BTCC患者与正常人尿液中提取总mRNA,用SMART技术反转录成cDNA,经过HaeⅢ酶切后将BTCC尿脱落细胞cDNA分为两组并接上接头,再与过量正常膀胱尿脱落细胞cD-NA进行两轮消减杂交及两轮抑制性聚合酶链反应(PCR),使得差异表达的DNA片段得以富集。PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌JM109构建成差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后,随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。结果:PCR鉴定有317个克隆载有主要在200~900bp之间呈随机分布的插入片段,片段插入率达82.6%,证实建库成功。对20个质粒测序结果经同源性比对分析,其中20个片段源于17个已知基因,1个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列,表明它们可能为BTCC差异表达的新基因。结论:该消减杂交文库质量可靠,其成功构建为进一步筛选、克隆BTCC差异表达基因提供了依据。
- 郭柏鸿车团结张冲李琳史葆光王建伟陈一戎
- 关键词:膀胱移行细胞癌基因差异表达抑制性消减杂交
- RUNX3基因启动子甲基化与膀胱移行细胞癌发生的关系被引量:2
- 2009年
- 目的检测抑癌基因RUNX3启动子区CpG岛甲基化状态及其在BTCC中mRNA和蛋白表达水平。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation—specific PCR,MSP)技术检测BTCC中RUNX3基因启动子区域甲基化状态,RT—PCR和Western blot法分别检测其mRNA和蛋白表达水平。结果RUNX3基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在BTCC组织中甲基化频率占46.9%(15/32),并且随着肿瘤分级、分期的增加。其甲基化水平逐渐升高,差异有统计学意义(P〈0.01)。在15例启动子异常甲基化的癌组织标本中,14例同时伴有RUNX3基因表达缺失或下调,二者存在明显的相关性(r=0.6472。P=0.012)。RUNX3 mRNA和蛋白表达在正常膀胱组织和BTCC组织分别为93.8%(30/32)、34.4%(11/32),二组间表达差异有统计学意义(P〈0.01),不同病理分级、临床分期间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论RUNX3基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其mRNA和蛋白表达减少甚至缺失,这可能是导致膀胱癌发生和转移的原因之一。
- 张志华郭柏鸿车团结史葆光陈一戎
- 关键词:移行性细胞膀胱肿瘤操纵子甲基化
- TMS1/ASC基因CpG岛甲基化与膀胱移行细胞癌发生的关系被引量:1
- 2009年
- 目的检测抑癌基因TMS1/ASC启动子区5′CpG岛甲基化状态及其在膀胱移行细胞癌(BTCC)中mRNA和蛋白表达水平。方法应用MSP技术检测膀胱移行细胞癌中TMS1/ASC基因启动子区甲基化状态,RT-PCR和Western blot法分别检测其mRNA和蛋白表达水平。结果TMS1/ASC基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在癌组织中甲基化频率为46.9%(15/32),并且随着肿瘤分级、分期的增加,其甲基化水平逐渐升高(χ2=23.106,P<0.05)。在15例启动子异常甲基化的BTCC标本中,14例同时伴有TMS1/ASC基因表达缺失或下调,两者存在明显的相关性(γ=0.5842,P<0.05)。TMS1/ASC mRNA和蛋白表达在正常膀胱组织和BTCC组织中分别为81.3%(26/32)、18.8%(6/32)(P<0.01),不同病理分级、临床分期间差异有统计学意义(P<0.05)。结论TMS1/ASC基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其mRNA和蛋白表达减少,甚至缺失,这可能是膀胱癌发生、发展的原因之一。
- 张志华郭柏鸿车团结郭利君王锦明李元陈一戎
- 关键词:膀胱移行细胞癌DNA甲基化
- 非那雄胺和乙烯雌酚联合应用对减少经尿道前列腺切除术出血的临床观察被引量:1
- 2009年
- 目的评价术前使用非那雄胺和乙烯雌酚对经尿道前列腺切除术(TURP)中出血的影响及作用机制。方法将拟行TURP的良性前列腺增生患者分为两组,实验组76例术前口服非那雄胺,连续7~10 d,5 mg/次,2次/d,同时肌注乙烯雌酚2 mg,1次/d,共7~10 d;对照组48例采用空白对照。所有手术由同一组医师实施,逐一记录手术时间、术中切除前列腺组织重量及冲洗液量;计算术中出血总量、出血指数、出血强度。逆转录聚合酶链式反应测定实验组与对照组前列腺组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果实验组术中平均出血总量、平均出血指数、平均出血强度较对照组明显减少;VEGF阳性表达率,实验组明显低于对照组。结论术前联合应用非那雄胺和乙烯雌酚能有效减少TURP术中出血,其机制可能与抑制了增生前列腺组织中的血管生成有关。
- 张冲郭柏鸿颜东文车团结陈一戎
- 关键词:非那雄胺乙烯雌酚良性前列腺增生出血
- 应用SSH和cDNA基因芯片技术筛查和鉴定膀胱癌尿脱落细胞特异性基因
- 目的:筛选和鉴定BTCC患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因并对部分基因进行多样本的验证分析。方法:选取甘肃省人民医院泌尿外科2005年12月-2007年10月确诊的10例BTCC患者术前晨起中段尿200m1,术前均未做化...
- 郭柏鸿
- 关键词:尿脱落细胞基因差异表达抑制性消减杂交CDNA芯片
- 机器人辅助下同期治疗肾盂输尿管连接处狭窄合并继发性肾结石一例报道被引量:1
- 2022年
- 目的:探讨机器人辅助治疗肾盂输尿管连接处狭窄(Ureteropelvic junction obstruction,UPJO)和同期治疗继发性与多发性肾结石的临床安全性。方法:回顾性分析1例机器人辅助治疗UPJO合并继发性和多发性肾结石患者的临床资料,包括术前一般检查、围手术期和术后复查资料。结果:患者顺利完成机器人辅助腹腔镜下左侧肾盂输尿管成形术+左侧肾盂切开取石术,术后复查结果提示所有继发性肾结石完全取净。结论:机器人辅助治疗UPJO合并继发性和多发性肾结石的手术是安全、可行的,且手术创伤小,无需二期处理继发性肾结石。
- 刘强照张晓峰马得茸郗新生郭柏鸿吕海迪张冲尹永生周逢海
- 关键词:机器人辅助手术肾盂输尿管连接处狭窄肾结石微创
- 机器人辅助经阴道多脏器切除治疗多发性尿路上皮癌一例报道
- 2022年
- 机器人辅助腹腔镜手术是尿路上皮癌最主要的微创治疗方式之一。甘肃省人民医院于2020年11月24日收治1例右侧输尿管恶性肿瘤合并膀胱恶性肿瘤患者,行机器人辅助腹腔镜膀胱根治性切除术+右侧肾、输尿管切除+子宫、附件切除+左侧输尿管皮肤造口术,手术多脏器标本经阴道取出,术后疗效满意,患者恢复可,美容效果佳。
- 张发张晓峰周逢海吕海迪郗新生刘强照郭柏鸿
- 关键词:机器人手术经自然腔道内镜手术输尿管肿瘤
- 膀胱癌患者尿脱落细胞抑制消减文库的构建及差异基因的初步筛选
- 2009年
- 目的应用抑制性消减杂交方法筛选膀胱移行细胞癌患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因。方法分离膀胱移行细胞癌患者与正常人尿液中总mRNA,用SMART技术反转录成cDNA,经过酶切、接头连接、两轮消减杂交及两轮抑制性PCR,使得差异表达的DNA片段得以富集。PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌XL-blue构建差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。结果PCR鉴定有317个克隆载有主要在200~900bp之间呈随机分布的插入片段,片段插入率达93.2%,证实建库成功。对20个质粒测序结果经同源性比对分析,其中20个片段源于17个已知基因,1个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列,表明它们可能为BTCC差异表达的新基因。结论该消减杂交文库质量可靠,它的成功构建为进一步筛选、克隆膀胱肿瘤差异表达基因提供了依据,也为膀胱肿瘤诊断基因芯片的研究与开发奠定了基础。
- 张冲郭柏鸿张志华史葆光车团结陈一戎
- 关键词:膀胱肿瘤基因
- 机器人辅助腹腔镜下横膈副神经节瘤切除术1例
- 2023年
- 嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma, PHEO)和副神经节瘤(paraganglioma, PGL)是分别起源于肾上腺髓质和肾上腺以外交感或副交感神经节的神经内分泌肿瘤,其中PHEO占80%~85%,PGL占15%~20%[1]。相比于PHEO,PGL临床少见却不罕见,但因其侵犯部位更为广泛,临床表现更为多样且严重程度不一,对PGL的诊疗造成极大的困扰。
- 黄韵翰莫国恺冯彬吕海迪张晓峰周逢海郭柏鸿
- 关键词:副交感神经节侵犯部位横膈机器人辅助腹腔镜
- PTEN、MDM2和c-erbB-2基因在膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究
- 2009年
- 目的探讨PTEN、MDM2和c-erbB-2基因在膀胱移行细胞癌发生发展中的临床意义。方法采用RT-PCR技术,检测32例膀胱移行细胞癌癌组织、癌旁组织及正常膀胱组织中PTEN、MDM2、c-erbB-2基因的表达。结果PTEN、MDM2和c-erbB-2在膀胱癌组织中阳性表达率分别为31.3%、50.0%、78.1%(P<0.05)。PTEN在正常组织中呈高表达,随肿瘤分级、分期的增加呈递减趋势(P=0.002)。MDM2在正常组织中表达率是3.1%,而在G1级膀胱癌组织中呈高表达,并且随肿瘤分级、分期的增加呈递减趋势(P<0.01)。c-erbB-2在正常组织中不表达,而在肿瘤组织中呈高表达,并且随肿瘤分级、分期的增加呈递增趋势(P<0.01)。PTEN与MDM2表达、c-erbB-2表达均呈负相关(γ=-0.572,P=0.015;γ=-0.653,P=0.025),MDM2与c-erbB-2无相关性(P>0.05)。结论PTEN、MDM2和c-erbB-2基因的表达异常及协同作用在膀胱移行细胞癌的发生和发展过程中起重要作用。
- 翟星全张志华郭柏鸿史葆光车团结陈一戎李元
- 关键词:膀胱移行细胞癌PTEN基因MDM2基因C-ERBB-2基因