路玲玲
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：河南中医药大学更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金郑州市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 以脂肪细胞分泌因子脂联素为靶点的具有减肥作用中药的初步筛选
- 目的：肥胖症严重危害着人们的健康，与糖尿病/(DM/)、冠心病/(CHD/)、高血压/(HBP/)、脂代谢紊乱及动脉粥样硬化/(AS/)等疾病的发生密切相关。脂肪组织的变化是肥胖症发生的根本原因，脂联素/(adipone...
- 路玲玲
- 关键词：MTT荧光素酶报告基因中药
- 文献传递
- PAI-1启动子序列与荧光素酶报告基因扩增及载体连接问题分析
- 2014年
- 目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)启动子荧光素酶表达质粒构建中扩增、转化、酶切及连接的问题。方法利用PCR技术扩增1100 bp长度PAI-1启动子片段,与PUC-19T载体连接,将PUC19T-PAI-1 1100质粒,及荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒转染大肠肝菌(DH5a)后扩增,提取并纯化;以BglⅡ,MluⅠ酶切,电泳并回收PAI-1 1100片段和pGL3-Basic酶切大片段,将PAI-1 1100片段插入荧光素酶报告基因pGL3-Basic中,构建含PAI-1 1100片段荧光素酶质粒。结果扩增PAI-11100 bp片段成功,目的片段与载体PUC19T,pGL3-Basic载体连接条件较苛刻,需要增加连接时间及效率的摸索。结论控制扩增时DNA浓度,胶回收,感受态质量,LB平板质量,内切酶,连接时间及质量比等问题都可增加连接成功概率。
- 张莎莎崔琳宰军华李强路玲玲
- 关键词：PAI-1启动子荧光素酶报告基因
- 脂联素调控序列荧光素酶报告基因荧光素酶活性的分析被引量：3
- 2013年
- 目的:通过将1 100 bp长度的人脂联素(adiponectin,AD)启动子上游的调控基因(包括启动子,-1066 To+4 bp)插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,构建成含启动子调控序列的荧光素酶报告基因(pGL3-Basic-ADI1100),用于脂联素在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达调控研究。方法:利用PCR技术扩增1 100 bp长度AD启动子片段,与PUC19T载体连接,将PUC19T-ADI1100质粒,及荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒转染大肠肝菌(DH5a)后扩增,提取并纯化PUC19T-ADI1100和pGL3-Basic;分别以KpnI,XhoI酶切pGL3-Basic;电泳并回收ADI1100片段和pGL3-Basic酶切大片段,在T4 DNA连接酶的作用下,将ADI1100片段插入荧光素酶报告基因pGL3-Basic中,并转染CHO细胞,检测荧光素酶报告基因活性。结果:通过酶切及基因测序的方法证实所构建质粒含有脂联素启动子上游调控序列;瞬时转染实验显示AD启动子在CHO细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后48 h的双报告基因活性是pGL3-Basic的30倍。结论:该荧光素酶报告基因构建成功,为后续筛选有抑制肥胖作用的中药提供基础。
- 崔琳李强路玲玲宰军华张莎莎
- 关键词：脂联素启动子荧光素酶报告基因
- 从中西医角度对肥胖症进行探讨
- 2012年
- 随着人们生活水平的不断提高,肥胖症的发病率逐年上升,在世界范围内,该问题已经成为最为重要的公共健康问题之一[1]。据WHO统计,欧美等发达国家的发病率已达20%,全球肥胖症患者已经超过3亿人,11亿人体重过重,每年由此造成的直接或间接死亡人数约30万,成为仅次于吸烟之后的第2个可预防的致死危险因素,被列为与癌症并列的21世纪威胁人类健康最严重的疾病。有调查显示我国肥胖病发病率位居全球第10位,据有关专家预测我国的肥胖人群在10年内可能超过两个亿[2]。
- 路玲玲宰军华
- 关键词：肥胖
- 人脂联素基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建被引量：3
- 2013年
- 目的:克隆不同长度人脂联素基因(AD)启动子片段,构建含人AD启动子片段的荧光素酶报告基因载体并进行测序鉴定。方法:利用PCR技术从人全血基因组DNA中扩增出AD启动子片段,经纯化酶切后克隆入载体pGL-3 basic中,形成重组质粒,筛选阳性克隆进行测序,并与GenBank比对。结果:从人全血基因组DNA中PCR扩增得到1.1 kb和2.1 kb AD启动子片段,构建2种报告基因载体,将其命名为AD promoter1.1-pGL-3 basic和AD promoter2.1-pGL-3 basic,经测序证实所插入的目的片段与GenBank检索的人AD启动子序列99.6%匹配。结论:成功构建了含人AD启动子片段的报告基因载体。
- 路玲玲宰军华崔琳李强张莎莎金小琴
- 关键词：脂联素基因启动子克隆人基因组DNA荧光素酶报告基因
- 脂联素与肥胖相关性探讨被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨脂联素与肥胖的相关性。方法:总结、归纳近年来的相关文献。结果:肥胖病在世界各国迅速发展着,严重影响人类健康。脂联素是近年新发现的由脂肪组织分泌的一种特异性蛋白,在机体脂质和血糖代谢中起着重要的调节作用,亦成为中医学治疗肥胖的新靶点。结论:脂联素可能与肥胖及其相关疾病的发生有着密切的关系,进一步阐明其相关性的分子机制,可能为防治肥胖提供重要理论依据和全新治疗方法。
- 宰军华路玲玲
- 关键词：肥胖脂联素脂肪组织胰岛素抵抗
