赵玉龙
- 作品数:15 被引量:47H指数:4
- 供职机构:南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 利用环介导恒温扩增方法特异性鉴定食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌被引量:9
- 2010年
- 介绍一种便捷、灵敏而又特异的用于检测治病细菌小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)的环介导恒温扩增基因检测技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),该技术分别使用特异对应于16S-23S rDNA间区(16S-23S rDNA internal transcribed spacer,ITS)靶序列中6个基因区段的3对引物,在Bst聚合酶的作用下对靶序列进行恒温扩增,整个检测反应只需1 h.利用这种技术检测小肠结肠炎耶尔森氏菌基因,阳性结果可通过直接观察反应液中有无焦磷酸镁白色沉淀,而无需经电泳检测.试验结果表明,LAMP对Y.enterocolitica的检测灵敏度可达到8 CFU/反应.
- 赵玉龙张宏伟刘伟刘寅郑文杰魏亚东叶露萌黄熙泰
- 关键词:耶尔森氏菌16S-23SRDNA间区
- 利用环介导等温扩增技术对沙门氏菌进行检测被引量:22
- 2009年
- 提出食品中沙门菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法。针对沙门菌特异性基因invA,设计了4条沙门菌LAMP检测特异性引物,建立食品中沙门菌LAMP检测方法。用16个血清型45株沙门菌,58株近源菌验证试验表明,所建立的LAMP方法准确且灵敏度高。加菌试验表明,食品样品中沙门菌检测低限为1.5CFU/100g;新建的LAMP方法与FDABAM方法比较试验表明,二种方法的检测结果完全符合。本方法特异性好、灵敏度高、与传统方法相比可节省大量时间且对实验仪器和操作人员的要求低,非常适于在实际工作推广。
- 张宏伟叶露萌彭杨思赵玉龙赵良娟郑文杰刘寅
- 关键词:沙门菌LAMP
- 植物内源蛋白激酶对转脂蛋白BP-10磷酸化的研究
- <正>在植物识别病原体并激活防御反应的信号传递过程中,蛋白激酶起到非常重要的作用。近年来,发现有多种蛋白参与植物抗性反应如:防御素、硫素、几丁质酶等。植物转脂蛋白也作为抗性蛋白家族的一员被国际组织命名为“病程相关蛋白-1...
- 谢万钦赵玉龙胡文全李翠凤
- 文献传递
- 钙调素对钙调素结合蛋白-10和玉米非特异性脂转移蛋白与脂质结合活性的影响被引量:9
- 2006年
- 荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件下,CaM对两者的影响均有不同之处,W-7和TFP能消除CaM的影响。提示CaM不仅与CaMBP-10和玉米nsLTP特异性相互作用,而且对2种脂转移蛋白可能具有不同的调节机制。
- 谢万钦赵立青白文艳李振鹏赵玉龙李翠凤
- 关键词:钙调素
- CaMBP-10分子中钙调素结合位点的鉴定
- <正>CaMBP-10是从白菜中分离到的一种分子量约为10 kD的钙调素结合蛋白,其与钙调素(CaM) 的结合具有不依赖于钙的特性,即在有钙和无钙(存在EGTA)条件下均能与CaM结合。通过序列比对和生化性质比较,确认C...
- 李振鹏谢万钦白文艳赵玉龙李翠凤
- 文献传递
- 环介导等温扩增方法检测绿脓杆菌的试剂盒及方法
- 本发明公开了一种运用环介导恒温PCR技术检测化妆品中绿脓杆菌的方法,属于化妆品卫生领域,具体涉及一种运用环介导恒温PCR技术检测化妆品中绿脓杆菌的方法。其技术方案是以绿脓杆菌的16S-23S间区为目的检测序列,设计涵盖整...
- 张宏伟赵玉龙刘伟郑文杰赵宏赵良娟阎煜侯丽萍
- 文献传递
- 豌豆质膜内源CDPK对植物转脂蛋白CaMBP-10的磷酸化及CaMBP-10对激酶自磷酸化的影响被引量:2
- 2009年
- 植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物.虽然LTPs的确切功能至今仍不完全清楚,但它参与植物生物、非生物胁迫反应以及它的抗性功能已成为近年来的研究热点.关于LTPs功能的调节机制目前几乎一无所知.最近,从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,并且,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为了深入了解转脂蛋白功能的调节机制,本文研究了CaMBP-10的磷酸化作用,发现CaMBP-10可被豌豆质膜内源性蛋白激酶磷酸化,钙离子(Ca2+)能刺激磷酸化,钙螯合剂EGTA以及CaM拮抗剂W-7和TFP均能显著抑制磷酸化.免疫印迹分析最终确定该激酶为CDPK家族成员.构建突变体进一步研究了CaMBP-10的磷酸化位点,发现其位于蛋白的C-末端区域,并与已确定的CaM结合位点重合.同时,分析结果表明CaM能抑制CaMBP-10的磷酸化.反之,CaMBP-10的磷酸化又能阻断其与CaM的结合,显示出两种调节方式相互竞争的特点.为深入研究磷酸化作用对CaMBP-10脂质结合活性的影响,构建突变体(Ser83Asp,Ser85Asp)以模拟磷酸化状态.实验结果显示,磷酸化作用能显著增强CaMBP-10的脂质结合活性,而且突变体的脂质结合活性不受CaM的影响.采用胶内磷酸化测定法(in-gelkinaseassay)研究了激酶的自磷酸化特点以及CaMBP-10对激酶自磷酸化的影响,发现CaMBP-10能激活激酶的自磷酸化,激酶的自磷酸化又能促进其对底物的磷酸化作用.这样,激酶的自磷酸化与底物的磷酸化形成一种"正反馈环"的调节模式.综合研究结果,本文首次证明了LTP受CaM结合和CDPK磷酸化的双重调节.而且,CaM结合位点与磷酸化位点的重合预示可能存在特殊的调节机制,以协同应答胞内的Ca2+信号.
- 赵玉龙谢万钦胡文全张映熠张蕊李翠凤
- 关键词:磷酸化自磷酸化
- 以核糖体RNA基因间区为靶序列的物种分子生物学鉴定研究
- 核糖体RNA基因间区是研究物种分子生物学鉴定的常用重要指标,它含量大,并且普遍存在于各种生物当中,是物种系统分类学研究中最有用和最常用的靶基因序列。检测手段的创新能够迅速推动物种鉴定领域的发展。本文介绍了三种基于DNA水...
- 赵玉龙
- 关键词:小肠结肠炎耶尔森菌生物学检测核糖体
- 文献传递
- 环介导等温扩增方法检测绿脓杆菌的试剂盒及方法
- 本发明公开了一种运用环介导恒温PCR技术检测化妆品中绿脓杆菌的方法,属于化妆品卫生领域,具体涉及一种运用环介导恒温PCR技术检测化妆品中绿脓杆菌的方法。其技术方案是以绿脓杆菌的16S-23S间区为目的检测序列,设计涵盖整...
- 张宏伟赵玉龙刘伟郑文杰赵宏赵良娟阎煜侯丽萍
- 文献传递
- 洋葱及烟草转脂蛋白的克隆、表达及钙调素结合活性分析
- <正>近期研究表明,钙调素结合蛋白BP-10(CaMBP-10)是植物非特异性转脂蛋白(nsLTPs)家族成员,拟南芥非特异性转脂蛋白1(At-nsLTP1)和玉米非特异性转脂蛋白(Zm-nsLTP)具有与 BP-10相...
- 李振鹏谢万钦白文艳赵玉龙李翠凤
- 文献传递