公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

登革病毒非结构蛋白NS4A的克隆表达及与其相互作用蛋白质的亲和纯化被引量：2: 2013年; 目的克隆表达登革病毒非结构蛋白NS4A，分离纯化与其相互作用的细胞蛋白。方法用特异性引物PCR扩增出FLAG—NS4A-HA基因片段，克隆至真核表达载体pSG5中，将重组质粒通过脂质体法瞬时转染入A549细胞，并通过Western blot检测NS4A融合蛋白的表达情况。利用串联亲和纯化系统（TAP）纯化分离与NS4A相互作用的蛋白，Western blot技术及银染SDS．PAGE验证NS4A蛋白复合物的纯化和分离情况。结果成功构建NS4A蛋白融合表达载体和FLAG、HA串联亲和纯化系统，SDS·PAGE和银染结果显示TAP系统分离得到了NS4A蛋白带和2条可能与NS4A相互作用的蛋白质片段。结论成功分离纯化与NS4A相互作用的细胞蛋白，为进一步研究机体抗登革病毒感染的机制奠定了基础。; 夏君谢炯张佩芬李玉叶刘超黄曦张萍; 关键词：登革病毒 NS4A 串联亲和纯化相互作用

抗病毒蛋白PKR的结构和功能被引量：5: 2013年; 病毒感染后，细胞合成分泌大量的干扰素（In—terferon，IFN），这些IFN通过自分泌或旁分泌的方式与细胞膜上的受体结合。激活STAT／JAK信号级联反应，调控300多个干扰素调控基因（Interferonstimulatedgenes，ISGs）的转录翻译水平，其中包括经典的抗病毒蛋白PKR。PKR即双链RNA依赖性蛋白激酶，是一种丝／苏氨酸蛋白激酶。; 夏君谢炯张萍; 关键词：抗病毒蛋白 PKR 苏氨酸蛋白激酶调控基因病毒感染后合成分泌

固有免疫调控蛋白PKR串联亲和纯化系统的建立及应用被引量：1: 2011年; 目的构建固有免疫调控蛋白——双链RNA（dsRNA）调控的蛋白激酶（PKR）的串联亲和纯化系统（TAP），初步研究PKR蛋白功能，以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析。方法通过PCR扩增PKR目的基因，克隆至真核表达载体pcTAP—A中。将重组质粒pcTAP-PKR通过脂质体法转染PKR稳定沉默（PKRkd）的HeLa细胞，并检测PKR对固有免疫信号通路之一，即促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）激活的调控；最后利用串联亲和纯化试剂盒纯化分离与PKR相互作用的蛋白，验证PKR蛋白复合物的纯化情况。结果将重组质粒pcTAP-PKR转染PKRkd HeLa细胞后，24h后即可检测到PKR融合蛋白，相对分子质量约为75×10^3，其表达量随着转染时间的增加而减少；PKR的过表达可发生自我磷酸化，并引起了MAPK信号通路的激活；Westernblot结果显示，小规模TAP纯化试验成功分离纯化了PKR蛋白。结论成功建立了一个PKR表达和串联亲和纯化系统，并证明PKR具有调控MAPK信号通路活性，为今后鉴定与PKR相互作用的蛋白研究奠定了基础。; 李玉叶梁兆端吴思宇谢炯何军芳吴敏昊黄曦张萍; 关键词：双链RNA 亲和纯化

蛋白激酶PKR的克隆表达及与其相互作用的蛋白质的亲和纯化被引量：2: 2012年; 目的:克隆并表达双链RNA调节的蛋白激酶(PKR)基因,以纯化分离与PKR相互作用的蛋白质。方法:设计特异性引物,PCR扩增分别得到FLAG-PKR-HA和HA-PKR-FLAG基因片段,克隆至表达载体pSG5中。将重组质粒通过脂质体法转染PKR稳定沉默(PKRkd)的HeLa细胞,Western blot检测PKR及标签表达情况;最后,利用HA、FLAG串联亲和纯化系统(TAP)纯化分离与PKR相互作用的蛋白,Western blot技术及银染SDS-PAGE验证PKR蛋白复合物的纯化和分离情况。结果:成功构建了PKR融合蛋白表达载体及FLAG、HA亲和纯化系统,SDS-PAGE和银染结果显示TAP系统分离得到了PKR蛋白带和两条可能与PKR相互作用的蛋白质片段。结论:成功纯化和分离了与PKR相互作用的蛋白质,为进一步研究奠定了基础。; 谢炯夏君张佩芬李玉叶吴敏昊黄曦张萍; 关键词：PKR 亲和纯化相互作用

双链RNA依赖性蛋白激酶及与其相互作用的蛋白质被引量：1: 2012年; 双链RNA依赖性蛋白激酶(PKR)是一个经典的干扰素可诱导蛋白,具有抗病毒活性,并参与了细胞信号转导、细胞生长、分化和凋亡等生理过程。此外,PKR在抗病毒的天然免疫应答中亦发挥着十分重要的调控作用。近来,越来越多的研究发现报道了与PKR相互作用的蛋白质,为阐明PKR功能的分子机制提供了重要依据。本文主要介绍了已被证实与PKR相互作用的蛋白质,并对PKR发挥作用的机制进行探讨。; 谢炯夏君张佩芬张萍; 关键词：PKR 相互作用信号通路

全选清除导出

共1页<1>

谢炯