谢佳
- 作品数：7 被引量：36H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乳腺癌残存细胞通过表达乳腺癌干细胞样特性促进裸鼠移植瘤的形成被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨化疗后乳腺癌残存细胞（drug surviving cells,DSCs）的干细胞样特性及其对裸鼠移植瘤的影响,阐明DSCs细胞的潜在生物学特性。方法 以0.5μg/mL浓度的多西紫杉醇（docetaxel,DTX）每周1次药物处理乳腺癌细胞MCF-7,分别获得处理4次后的DSCs,记为DSCs（1~4）组,未处理的MCF-7细胞为空白对照组。流式细胞仪检测空白对照组及DSCs（1~4）组中细胞周期分布。无血清悬浮培养法培养MCF-7细胞和DSCs（1~4）细胞,获得乳腺癌干细胞（breast cancer stem cells,BCSCs）微球体,荧光定量PCR和Western blot法分别检测MCF-7细胞和DSCs（1~4）细胞中乳腺癌干细胞标志物ALDH1、CD44、CD24及ABCG2 mRNA和蛋白表达水平;采用裸鼠移植瘤实验比较MCF-7细胞及DSCs（1~4）细胞的成瘤时间、成瘤率及瘤体大小。结果 与MCF-7细胞相比,药物处理后得到的DSCs（2~4）细胞中处于静止期（G0/G1期）的细胞比例明显升高。DSCs（2~4）细胞形成乳腺癌干细胞微球体的能力更强,表达的干细胞标志物ALDH1、CD44＋/CD24-和ABCG2显著增多,差异均有统计学意义（P〈0.05）;DSCs（2~4）细胞的成瘤能力更强,瘤体体积较MCF-7细胞明显升高（P〈0.05）。DSCs（1）细胞与MCF-7细胞相比无明显差异。结论 经多西紫杉醇药物筛选后的DSCs表达乳腺癌干细胞样特性,促进裸鼠移植瘤的生成。
- 谢佳刘红余腾骅刘毫张澍李聪吴诚义
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞裸鼠移植瘤
- 沉默HIF-2α对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰（RNAi）沉默HIF-2α表达对低氧下接种乳腺球细胞的裸鼠移植瘤生长的影响。方法将慢病毒介导HIF-2α基因RNAi载体质粒和空载体质粒转染至MCF-7细胞株，G418筛选获得稳定转染细胞株。将空载体组及干扰组MCF-7细胞注射接种至裸鼠左右侧背部近后肢皮下，比较成瘤时间，肿瘤体积及瘤体重量等；Western印迹检测移植瘤组织中HIF-2α、CIM4、OCT-4及KLF4蛋白表达。结果成功构建HIF-2α基因RNAi慢病毒载体，沉默HIF-2α表达降低乳腺球的形成；与空载体组比较，干扰组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低（P〈0．05）。Western印迹显示干扰组HIF-2α蛋白表达量（0．42±0．01）明显低于空载体组（0．89±0．03，P〈0．05），CD44蛋白表达量（0．21±0．01）明显低于空载体组（0．78±0．03，P〈0．05），OCT-4蛋白表达量（0．134-0．01）明显低于空载体组（0．68±0．03，P〈0．05），KLF4蛋白表达量（0．34±0．01）明显低于空载体组（0．72±0．03，P〈0．05）。结论RNAi沉默HIF-2α表达明显抑制低氧下乳腺球细胞裸鼠移植瘤生长，其机制可能通过下调干细胞标志物表达抑制乳腺癌细胞自我更新和增殖，HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗新的靶点。
- 屈洪波范原铭韩明利曾妮朱之坤刘红谢佳吴诚义汤为学
- 关键词：RNA干扰移植物
- Oct4在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞侵袭性的影响被引量：2
- 2013年
- 探讨转录因子Oct4(octamer-binding transcription factor 4)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞侵袭性的影响。该研究选取27例乳腺癌组织病人的肿瘤组织及癌旁组织,通过Western blot方法检测Oct4的蛋白水平。通过慢病毒介导的是shRNA干扰技术靶向沉默oct4基因的表达,Westernblot方法验证oct4基因沉默效果。细胞划痕实验和细胞侵袭实验检测oct4沉默对细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测oct4沉默对上皮–间质转化(EMT)的多个标志物的影响。结果显示,74%病人(20/27)中Oct4蛋白在乳腺癌组织的表达显著高于癌旁组织。慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞Oct4蛋白的水平。oct4基因沉默能抑制乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力。oct4沉默后上皮细胞标志物E-cadhrin、alpha-catenin明显上调;而间质细胞标志物vimentin、N-cadherin则明显下降。以上结果表明,Oct4蛋白在乳腺癌组织的表达明显增高;oct4沉默可以显著抑制乳腺癌细胞的迁移及侵袭。
- 曹勇张蕴蕴谢佳曾晓华吴诚义
- 关键词：乳腺癌肿瘤细胞系肿瘤侵袭OCT4
- 三磷酸腺苷结合盒转运体G2与乳腺癌干细胞多药耐药性的关系
- 2013年
- 乳腺癌患者产生多药耐药性已经成为困扰肿瘤化学治疗的棘手问题。其中三磷酸腺苷结合盒转运体G2（ABCG2）的高表达是导致患者产生多药耐药性的重要原因。新近研究发现它还高表达于肿瘤侧群（side population,SP）干细胞,这一发现将肿瘤的耐药性与乳腺癌干细胞理论联系了起来,有助于我们从源头上来研究肿瘤多药耐药性的问题。现就近年来有关ABCG2与乳腺癌干细胞多药耐药性的研究进展作一综述。
- 谢佳吴诚义朱康生
- 关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体细胞多药耐药性ABCG2肿瘤多药耐药性干细胞理论
- FOXC2调控DLL4/Notch1信号通路对乳腺癌血管生成的影响
- 目的:探讨转录因子FOXC2对乳腺癌MCF-7细胞血管生成的影响及其机制,阐明FOXC2转录因子是通过上调DLL4/Notch1信号通路从而实现其促进肿瘤血管生成的作用.
方法:应用FOXC2慢病毒基因转染技术...
- 刘红谢佳刘毫吴诚义
- 关键词：乳腺癌血管生成细胞迁移
- 文献传递
- 化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性被引量：27
- 2013年
- 目的通过对比化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异,探讨其与乳腺癌干细胞(BCSCs)的相关性。方法免疫组织化学检测化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp及BCSCs标志物CD44及CD24蛋白的表达;免疫荧光检测"BCSCs微球体"细胞中CD44及CD24蛋白表达;有限稀释法检测"BCSCs微球体"细胞单克隆形成能力;Western blot检测"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp、CD44及CD24蛋白的表达。结果与化疗前乳腺癌组织相比,化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp表达与CD44蛋白表达呈正相关(χ2=41.34,r=0.83;χ2=22.81,r=0.61);而其与CD24蛋白表达呈负相关(χ2=-21.25,r=0.72;χ2=-17.26,r=0.65);差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后残存乳腺癌组织中"BCSCs微球体"直径明显增加,且化疗后BCSCs含量是化疗前BCSCs含量的2.5倍;Western blot显示化疗后残存乳腺癌组织"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp及CD44蛋白表达明显升高(P<0.05),而CD24蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论化疗赋予残存乳腺癌组织"癌干细胞样"特征,导致乳腺癌多药耐药产生。
- 屈洪波范原铭韩明利罗浩军谢佳刘红刘毫吴诚义汤为学
- 关键词：乳腺癌干细胞耐药相关蛋白乳腺癌耐药蛋白P-糖蛋白
- FOXC2调控DLL4/Notch1信号通路对乳腺癌MCF-7细胞血管生成的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨转录因子FOXC2对乳腺癌MCF-7细胞血管生成的影响,阐明FOXC2促进肿瘤血管生成的作用机制。方法:应用FOXC2慢病毒基因转染技术将FOXC2基因和空载体基因分别转染至乳腺癌MCF-7细胞株中,获得稳定转染细胞株;实验分为未转染组、空载体组和过表达组。采用Matrigel基质胶血管形成实验和Transwell小室实验检测各组细胞上清作用下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)成管能力和迁移能力,RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中FOXC2、DLL4和Notch1mRNA和蛋白表达。结果:与未转染组和空载体组比较,过表达组MCF-7细胞上清诱导HUVECs闭合小管数和迁移细胞数增加(P<0.05);FOXC2、DLL4和Notch1mRNA和蛋白相对表达水平明显增加(P<0.05)。结论:MCF-7细胞中过表达FOXC2能显著增加HUVECs的成管能力和迁移能力,其机制可能是通过Notch信号通路来实现的。
- 刘红谢佳刘毫郑曰勇吴诚义屈洪波李聪
- 关键词：MCF-7细胞NOTCH信号通路血管生成
