谌贺宽子
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院新元医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省大学生创新创业孵化资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A33启动子结肠癌特异性探究及SV40增强子对其转录活性影响被引量：1
- 2011年
- 为了探究A33核心启动子结肠癌特异性及SV40增强子对其转录水平的影响,该研究通过构建A33核心启动子和带SV40增强子的A33核心启动子(eA33)的荧光素酶报告基因载体pGL3-A33和pGL3-eA33,与内参照pRL-SV40质粒共转染至不同的细胞系中,利用双荧光素酶检测系统检测分析了A33和eA33启动子在不同细胞系中的转录活性。结果显示,A33核心启动子在结肠癌细胞系中具有转录活性低,但结肠癌特异性好的特点,而在其他类型癌细胞中基本没有活性。同时发现,eA33在各类癌细胞中的转录水平与A33相比,均呈大幅度提高,有显著性差异(P<0.01),但SV40增强子能显著增强A33启动子转录活性的同时减低了其结肠癌特异性。这为靶向癌症基因—病毒治疗策略在结肠癌的生物治疗应用中寻找结肠癌特异性的启动子奠定了研究基础。
- 钟丹郑水娣谌贺宽子袁素敬章康健
- A33启动子介导的溶瘤腺病毒携带IL-24对结肠襄癌的抗癌作用研究
- 随着社会的发展和科学的进步,很多疾病已经能够治愈,恶性肿瘤则成为人类致死的头号杀手,是国际科研领域内投入最多、研究最深入的疾病之一。结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)作为人类高发恶性肿瘤,其发病率一直...
- 谌贺宽子
- 关键词：白细胞介素24
- 文献传递
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合ZD55-TRAIL溶瘤腺病毒对肝癌细胞杀伤作用的研究
- 2012年
- 研究组蛋白去乙酰化抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)联合ZD55-TRAIL对人肝癌细胞株的体外杀伤效果,实验采用MTT法检测SAHA、ZD55-TRAIL以及二者联合对肝癌细胞株Huh-7、Bel-7404、Hep3B以及人正常肝细胞株QSG-7701增殖的抑制作用;利用Hoechst33342染色对联合处理的细胞进行凋亡形态学观察;通过结晶紫实验进一步检测联合用药对肿瘤细胞的杀伤情况;通过Western blot实验在蛋白水平上检测一些凋亡相关蛋白表达情况的变化。实验结果表明:SAHA联合ZD55-TRAIL处理3d后对肝癌细胞株Huh-7的增殖抑制率达到50%,对Hep3B、Bel-7404也达到近40%的杀伤效率,并且联合治疗后对人正常细胞株QSG-7701未见明显的毒副作用。同时结晶紫实验也证明联合治疗对肿瘤细胞的杀伤力强于用SAHA或ZD55-TRAIL单独使用。Western blot实验证明了药物和病毒的联合作用使促凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-xL的表达量明显减少,caspase-8和caspase-9蛋白也有相应剪切现象的发生。流式细胞仪同样检测出SAHA和ZD55-TRAIL联合作用对肝癌细胞有很好的杀伤作用。
- 仇庆谢国良谌贺宽子李敏周秀梅
- 关键词：SAHA肝癌细胞株
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合溶瘤腺病毒ZD55-IL-24诱导SW480细胞凋亡被引量：4
- 2012年
- 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合溶瘤腺病毒ZD55-IL-24对结肠癌SW480细胞的体外杀伤作用。采用MTT法、结晶紫实验检测SAHA、ZD55-IL-24以及二者联合使用对结肠癌细胞株SW480及人正常肺上皮细胞株Beas-2B的增殖抑制作用;利用Hoechst33342染色对经各种处理的细胞进行凋亡形态学观察,采用流式细胞术对凋亡进行量化;通过Western blot法在蛋白水平上检测SW480细胞中IL-24的表达情况。结果显示SAHA与ZD55-IL-24联合处理对SW480的增殖抑制作用明显优于两者单独使用。10 MOI病毒ZD55-IL-24与0.5μmol/L SAHA联合作用4天,SW480细胞存活率仅为12%,明显低于10 MOI病毒单独处理组细胞的存活率(40%,P<0.05)。然而,正常细胞对于联合给药显示出良好的耐受性。Hoechst33342染色和流式细胞术结果也表明联合处理组的SW480细胞凋亡特征更明显。此外,IL-24在ZD55-IL-24病毒单独感染组及病毒与药物联合组的SW480细胞中均能有效表达。
- 谌贺宽子梁天祥仇庆夏玉龙吴欣欣周秀梅
- 关键词：SAHA溶瘤腺病毒IL-24细胞凋亡
- 融合蛋白sCAR-TSP-1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究
- 2012年
- 根据thrombospondin-1(TSP-1)氨基酸序列(RFYVVMWK),以已有的腺病毒受体sCAR为模板,将8个氨基酸对应基因核苷酸通过PCR扩增于sCAR之后,得到sCAR-TSP-1,连接到表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15后获得工程茵。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白sCAR-TSP-1。包涵体经过尿素变性溶解、PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE分析表明,有一条明显的特异性蛋白条带。同时细胞实验结果表明融合蛋白sCAR-TSP-1对白血病细胞K562有明显凋亡作用。
- 梁天祥谌贺宽子陈磊武虎唐斌
- 关键词：TSP-1原核表达白血病细胞
