许剑锋
- 作品数:18 被引量:71H指数:5
- 供职机构:江苏省血液中心更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 腺病毒介导的RNA干扰降低VEGF及其受体KDR,FLT转录抑制血管形成的研究
- 血管新生对于肿瘤的生长、浸润和转移过程是十分重要的。肿瘤依靠新生血管来提供营养/(包括氧气/)和排泄废物,转移灶的形成和发展也依赖于新生血管的形成。临床研究显示,肿瘤诱导血管新生的能力决定了其生长和转移的能力。如能有效抑...
- 许剑锋
- 关键词:血管生成
- 文献传递
- 江苏地区HBsAg-/HBV DNA+献血者血清学和分子生物学特点分析被引量:10
- 2016年
- 目的了解江苏地区HBs Ag-/HBV DNA+献血者感染的HBV血清学及其HBV DNA S区分子生物学特点。方法选取2013年度常规初筛HBs Ag阴性、NAT阳性标本,经化学免疫发光法检测HBV感染的血清学指标,确认HBs Ag-/HBV DNA+标本48例;采用巢式PCR扩增HBV DNA S区,对测序结果进行基因型、血清型及其突变分析;用SPSS 11.0软件比较HBV基因型和血清型的分布,并分析献血者感染的HBV基因型、血清学和病毒特征之间的关系。结果江苏地区HBs Ag-献血人群HBV DNA+感染率为0.6‰。48例标本血清病毒载量<20 IU/m L-2 510 IU/m L。43例标本成功扩增出HBV S区基因,根据测序结果分析共有B型21例、C型19例和D型2例,未能定型1例;其血清型共3种包括:19例adr;23例adw(adw2,21;adw3,2);1例ayr。献血者HBV血清学特征、年龄、性别、ALT值以及病毒载量与基因型均之间均无相关性。8例(18.6%)标本发生突变,其HBV"a"决定簇的突变位于Q111R/H,S117C,G119R,T126M,Q129L/H/P,G130R,N133R,F134L,C147Y。结论江苏地区HBs Ag-/HBV DNA+献血者感染的HBV多为低病毒载量的隐匿性感染,其基因型以B型为主,其次是C型;adw为主要血清型。HBV S区的突变与HBs Ag-/HBV DNA+或OBI之间的关系有待进一步调查。
- 林红蒋昵真汤心怡许剑锋朱绍汶黄成垠赵红
- 关键词:献血者乙型肝炎病毒血清型
- PCR-SSP法用于Dombrock血型Do^a/Do^b的基因分型被引量:4
- 2009年
- 目的:了解Dombrock血型Doa和Dob基因在汉族人群中的分布。方法:采用PCR-SSP技术对Dombrock血型进行Doa和Dob基因分型。结果:248例Dombrock血型Doa的基因频率为0.0867,Dob的基因频率为0.9133。结论:248例Dombrock血型Doa及Dob的基因频率分别为0.0867和0.9133。PCR-SSP技术可以较好的对Dombrock血型进行DO基因分型。
- 刘衍春许剑锋吴敏慧
- 关键词:血型
- 全自动血型仪在血型检测中的应用被引量:8
- 2014年
- 目的探讨全自动血型分析仪在血型检测中的应用。方法同时用全自动血型仪与U型微板法对14 260份血液标本进行平行血型检测和对比分析。结果全自动血型仪与U型微校法检测ABO血型的正确率分别为99.87%、99.89%;检测Rh血型的准确率均为100.00%。结论对血液标本进行常规的ABO和Rh血型检测是每家采供血机构检验科所必要进行的重要检测项目,全自动血型仪可以有效降低实验者的工作强度,防止人为性错误,降低生物危险性,同时提高实验效率和判读结果的准确率。为安全输血提供可靠保障,有助于采供血机构进行大批量标本的血型鉴定。
- 陈显刘洲君朱绍汶许剑锋毛平缪锡凤孙宁王金花黄成垠孙俊
- 关键词:血型
- 腺病毒介导的RNA干扰降低VEGF转录抑制血管形成的研究
- 2007年
- 用细菌内同源重组的方法构建了针对VEGF的siRNA表达重组腺病毒AdH1-siRNA/VEGF,感染HUVEC细胞,观察该病毒对HUVEC细胞体外增殖和形成微血管的干扰作用.通过Real-timeRT-PCR实验表明,AdH1-siRNA/VEGF可特异性地下调血管内皮细胞(HUVEC)中的VEGFmRNA水平.与对照组相比,VEGF的mRNA水平下降为50%,AdH1-siRNA/VEGF对HUVEC细胞增殖有干扰作用.加入病毒9d后,对照组的细胞平均计数为31.5×104/μL,干扰病毒对照组为28×104/μL,AdH1-siRNA/VEGF干扰组为21.5×104/μL.AdH1-siRNA/VEGF对HUVEC细胞在Matrigel上形成微血管有干扰作用,对照组每HPF形成微血管数量为10.75条,干扰病毒对照组为10.25条,实验组AdH1-siRNA/VEGF每HPF形成微血管数量为7条.证明AdH1-siRNA/VEGF可以干扰血管形成.
- 许剑锋沈维干彭琬昕李朝军
- 关键词:血管生成RNA干扰
- 多重PCR-SSP方法在RHD基因检测中的应用被引量:7
- 2013年
- 目的应用分子生物学诊断方法分析RhD阴性献血者的RHD基因。方法首先采用多重PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)方法扩增377名RhD阴性无偿献血者的RHD基因特异性内含子4和外显子7,对扩增结果为阴性的标本则继续采用PCR-SSP检测RHD基因启动子和外显子10。结果 337名RhD阴性无偿献血者中,24.92%(84/337)为RHD基因内含子4和外显子7阳性,余253例内含子4和外显子7阴性标本中的8.69%(22/253)为启动子和外显子10阳性;本组RhD阴性无偿献血者的RHD基因阳性率为31.45%(106/337)。结论多重PCR-SSP方法检测RHD基因简单易行,可用于对血清学RhD阴性者的RHD基因确认。
- 肖建宇曾荣史广耀郁心许剑锋陈青黄成垠
- 关键词:RH血型RHD阴性RHD基因PCR-SSP
- 腺病毒介导的RNA干扰降低VEGF受体FLT-1,KDR转录抑制血管形成
- 2014年
- 本研究用细菌内同源重组的方法构建了针对VEGF受体FLT-1,KDR的siRNA表达重组腺病毒Ad H1-siRNA/FLT-1和Ad H1-siRNA/KDR,感染HUVEC细胞,观察两种病毒对HUVEC细胞体外增殖和形成微血管的干扰作用.通过RT-PCR实验表明,Ad H1-siRNA/FLT-1和Ad H1-siRNA/KDR均可特异性地下调血管内皮细胞(HUVEC)中的FLT-1mRNA和KDR mRNA水平.与对照组相比,FLT-1的mRNA水平下降为40%,KDR的mRNA水平下降为52%.Ad H1-siRNA/FLT-1和Ad H1-siRNA/KDR对HUVEC细胞增殖均有干扰作用,加入病毒9 d后,对照组的细胞平均计数为31.5×104/μL,Ad H1-siRNA/FLT-1干扰病毒对照组为28×104/μL,Ad H1-siRNA/KDR干扰组为21.5×104/μL.Ad H1-siRNA/FLT-1和Ad H1-siRNA/KDR对HUVEC细胞在Matrigel上形成微血管均有干扰作用,对照组每HPF形成微血管数量为10.75条,Ad H1-siRNA/FLT-1干扰病毒对照组为10.25条,实验组Ad H1-siRNA/KDR每HPF形成微血管数量为7条.证明Ad H1-siRNA/FLT-1,Ad H1-siRNA/KDR均可干扰血管形成.
- 许剑锋沈维干彭琬昕
- 关键词:血管生成血管内皮生长因子受体RNA干扰
- 南京地区RhD阴性个体RHD基因多态性及与RhC抗原表达关系的研究被引量:3
- 2011年
- 目的:研究南京地区表型为RhD阴性汉族人群中,RHD基因外显子1~10的多态性以及D基因外显子与C抗原表达之间的关系。方法:随机抽取血清学为RhD阴性的RhCC/Cc标本116例,Rhcc标本117例,PCR-SSP方法检测RHD外显子1、3、4、5、6、7、9、10和RHD内含子2、4v,10以及RHCE内含子2、4。结果:在116例血清学为CC/Cc的RhD阴性标本中,RHD外显子完整者有70例,占60.35%;25例(21.55%)RHD外显子完全缺失;而另有21例(18.10%)RHD外显子部分完整,其中的20例为RHD1-CE(2-9)-D10杂化基因;1例含有D1,Cin2,D9,D10,Din10基因。而在117例血清学为cc的RhD阴性标本中,6例(5.13%)RHD外显子完整;110例(94.02%)RHD外显子完全缺失;1例(0.85%)除D1缺失外,其他RHD2~10外显子均有。结论:南京地区汉族人群RHD基因表现出明显的多态性。cc表型的RHD基因外显子全部缺失的比率(94.02%)为CC/Cc的(21.55%)4倍多,而CC/Cc的RHD外显子完整的比率(60.35%)约为cc的(5.13%)12倍。RHD1-CE(2-9)-D10杂化基因均为CC或Cc表型,在RhD阴性表型中还有少数RHD基因变异型有待研究。
- 马玲刘衍春吴敏慧刘毅郑凌薛敏许剑锋
- 关键词:RHD外显子基因多态性
- 丙型病毒性肝炎的基因分型方法及临床意义被引量:7
- 2012年
- 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是一种高度异质性且主要经血液传播的RNA病毒,目前可分为6个基因型和多种亚型。HCV基因分型方法主要有PCR和血清学方法,由于HCV基因型与病程及治疗过程关系紧密,本文就该问题的研究状况进行综述。
- 陈显黄成垠朱绍汶许剑锋陈慧唐荣才魏鹏
- 关键词:丙型病毒性肝炎HCV基因型
- HCV感染献血者的血小板抗原(HPA)1-18等位基因多态性初步分析被引量:1
- 2015年
- 目的探讨HCV感染与血小板抗原基因之间的关系。方法提取114例抗-HCV ELISA双试剂检测均有反应性的献血者血清标本的RNA,做HCV RNA荧光定量检测,随访后将其分为HCV持续感染组(39例)和HCV自限清除组(75例);提取人基因组,用PCR-SSP方法对人血小板抗原(HPA)基因进行分型;比较HCV感染献血者与本地合格献血者和其他地区合格献血者HPA基因分型情况,分析HCV感染与HPA分型之间的关联性。结果与合格献血者相比,HCV感染献血者的HPA分型有不同表现(P>0.05);HPA基因多态性在HCV感染不同转归献血者中明显不同(P<0.05)。HCV持续感染组和对照组相比,HPA等位基因多态性有明显差异(P>0.05);HCV自限清除组和对照组的HPA-3a和HPA-3b基因频率分别为:40.70%vs 61.00%和59.30%vs 39.00%(P<0.01)。结论HPA-3的基因多态性与HCV易感性和自限清除是否具有一定的关联性,值得进一步研究。
- 林红薛敏许剑锋胡文佳王金花刘衍春
- 关键词:基因多态性献血者PCR-SSP