袁维峰
- 作品数:122 被引量:245H指数:9
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>
- 一种牛结核病检测用防断试剂卡
- 本实用新型公开了一种牛结核病检测用防断试剂卡,属于检测技术领域,包括外壳,外壳的右内壁固定连接有固定杆,固定杆的圆周表面滑动连接有一组滑筒,一组滑筒的圆周表面通过铰轴活动铰接有两组连杆,且两组连杆之间呈交错分布,两组连杆...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递
- CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用被引量:5
- 2017年
- 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
- 刘畅刘畅刘存王静刘存梁琳王静钱爱东刘琪
- 关键词:多重PCR犬瘟热病毒犬细小病毒犬副流感病毒
- 鸭坦布苏病毒可视化RT-LAMP快速检测方法的建立与初步应用被引量:9
- 2017年
- 为实现鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的快速检测,本研究根据GenBank中公布的DTMUV E蛋白基因的高度保守序列设计了1套引物,通过优化反应体系各组分的浓度、反应时间和温度,建立了一种灵敏、便捷的RT-LAMP扩增方法。结果显示,在最佳条件下甜菜碱对反应体系影响不明显;该方法灵敏度是常规RT-PCR的100倍;只能特异性扩增坦布苏病毒,对于其他常见的禽源病毒无特异性扩增;检测结果可直接通过肉眼观察来判断;对临床74份疑似病料,可检出65份。本试验建立的方法灵敏性高、特异性强,可用于鸭坦布苏病毒病的临床诊断和流行病学调查。
- 吴植夏文龙蔡树东郭长明袁维峰王永娟
- 关键词:环介导等温扩增可视化
- 动物用质粒DNA内毒素去除方法的建立及其质量检验被引量:9
- 2009年
- 用自行改进设计的TritonX-114方法去除动物用重组质粒DNA中的内毒素,鲎试剂检测方法确定每毫克质粒DNA中内毒素的含量为50 EU。将3种不同方法制备的重组质粒pEGFPN1包裹后转染COS-7、MDCK和Marc145细胞,结果表明,经TritonX-114去除内毒素后的质粒DNA(A)与无热源质粒提取试剂盒制备的质粒DNA(B)的转染效率相当,比未经内毒素去除的质粒DNA(C)的转染效率高。将上述3种方法制备的pcDNAlacZ经PEI包裹后尾静脉注射小鼠,注射后每隔2 d扑杀小鼠,取其心、肝、脾、肺和肾组织,定量检测β-半乳糖苷酶的表达和持续时间,结果显示报告基因仅在小鼠的心、脾和肝组织中表达至第8天,A与B的表达水平接近,且明显高于C制备的pcDNALacZ的表达水平,提示经TritonX-114去除内毒素后的质粒DNA可提高转染效率和表达水平。多种动物体内注射重组质粒后,无体温升高等异常临床表征,进一步说明了使用经TritonX-114去除内毒素的质粒DNA具备良好的安全性。
- 张泉袁燕袁维峰孙怀昌朱鸿飞
- 关键词:内毒素转染效率安全性
- 一种牛结核病检疫注射装置
- 本实用新型公开了一种牛结核病检疫注射装置,属于兽医设备技术领域,包括针筒,针筒内活动插接有活塞,活塞的右端固定连接有推杆,推杆的右端固定连接有把手,针筒的左端螺纹连接有第二螺纹环,第二螺纹环的左端固定连接有连接头,连接头...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递
- 细粒棘球蚴EG95s重组蛋白免疫原性分析
- 目的:分析EG95s重组蛋白的免疫原性。方法:本研究分别诱导表达含有1、2、3拷贝EG95s的pET-1EG95s、pET-2EG95S和pET-3EG95s重组质粒,并用Hi S亲和纯化HIS-lEG95 S、HIS-...
- 贾红袁维峰侯绍华郭晓宇马世春朱鸿飞
- 关键词:基因工程疫苗细粒棘球蚴重组蛋白免疫原性哺乳动物
- 对《中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金管理办法》修订内容的解析及思考被引量:4
- 2016年
- 基本科研业务费主要用于支持公益性科研机构等的优秀人才或团队开展自主选题研究,基本科研业务费的设立,在一定程度上缓解了财政性科研经费的竞争压力,初步形成了长期稳定支持的机制,对科研院所的持续发展和自主创新能力的提高,特别是培养优秀青年科研人才发挥了重要的作用。文章简要介绍了基本科研业务费项目的来历及发展现状,对比分析了新、原《中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金管理办法》,提出了新《中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金管理办法》实施后面临的新问题,以期为各科研机构制定符合本单位实际的资金管理实施细则提供理论借鉴。
- 王涌鑫张军民刘涛徐哲周凌云袁维峰
- 关键词:基本科研业务费
- 一种免疫佐剂标准品制备用装置
- 本实用新型公开一种免疫佐剂标准品制备用装置,包括:箱体,箱体顶端设置有箱盖,箱盖的一侧与箱体铰接,箱体一侧外壁固接有控制面板;震荡机构,震荡机构包括支撑板、限位滑动部和往复驱动部,箱体一相对内壁均固接有限位滑动部,支撑板...
- 吉日木图贾红朱鸿飞庞忠宝姜一曈袁维峰黄颖翟文竹何宇恒蒋思文李鸿洋
- 一种含复合益生菌的断奶仔猪用配合饲料及其应用
- 本发明涉及饲料制备技术领域,具体公开了一种含复合益生菌的断奶仔猪用配合饲料及其应用。本发明通过在基础饲粮中添加适当比例的嗜热链球菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母复合益生菌,使得所述饲料中,嗜热链球菌的活菌浓度为1.2×10<S...
- 袁维峰唐湘方张军民
- 文献传递
- 一种牛结核病检测用多层试剂盒
- 本实用新型公开了一种牛结核病检测用多层试剂盒,属于试剂盒技术领域,包括盒体,所述盒体的侧壁安装有限位环,所述限位环的内部安装有横杆,所述横杆上套接有移动板,所述移动板的上端连接有连板,所述连板的上端连接有承托板,所述承托...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递