董宣
- 作品数：23 被引量：54H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 海兰鸡内源性白血病病毒位点序列鉴定与分析被引量：1
- 2015年
- 鉴定和比较海兰鸡基因组中内源性禽白血病病毒(ALV)位点。使用超嗜热古菌Thermococcus sp.4557来源重组表达的Pol B DNA聚合酶,通过一次PCR反应从海兰鸡的基因组DNA中扩增到了包括gag、pol、env基因部分片段及3′-LTR的内源性ALV位点,将其命名为HL-E1。序列比较表明,其env基因与E亚群内源性ALV高度同源;与完整的ALV基因组相比,其gag、pol、env三个主要功能基因分别缺失了93、1 960和805个碱基。海兰鸡基因组中存在4 663bp的缺陷型ALV基因组片段,其env基因和LTR都与鸡基因组上经典的ev1位点的相应基因有96.8%和97.4%的相似性,表明这是整合进海兰鸡染色体基因组中的一个内源性E亚群ALV片段构成的ev位点,这是又一个ev位点的全序列报道。
- 陈孜孟董宣苏帅崔宁李卓崔治中
- 关键词：PCR基因缺失染色体位点
- J亚群禽白血病病毒NX0101株的TCID_(50)与p27抗原之间的相关性研究被引量：5
- 2011年
- 为了研究J亚群禽白血病病毒在细胞上接种后的半数细胞培养物感染量(TCID_(50))与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,并探讨其意义。本试验将J亚群禽白血病病毒NX0101株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID_(50)值与p27抗原的S/P值之间的相关性。同时,将该毒株在DF-1细胞系上传代至20代,取其中的第1代、第5代、第10代、第15代和第20代分别进行TCID_(50)滴度的测定和p27抗原检测。结果表明:在CEF细胞上接种的NX0101株J亚群禽白血病病毒连续10d的TCID_(50)值与p27抗原之间存在显著的相关性(r=0.85277;P<0.0001)呈正相关;在DF-1细胞系上传的不同代数之间也呈显著正相关(r=0.93000;P=0.0220)。由此可以推测J亚群禽白血病病毒的TCID_(50)与p27抗原呈显著正相关,因而可以用ELISA法测得的p27抗原的S/P值对病毒的TCID_(50)值进行估测。
- 董宣刘娟赵鹏苏帅杜燕李薛崔治中
- 关键词：J亚群禽白血病病毒TCID50P27抗原
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒准种多样性在抗体选择压下的演变
- 为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒株SD0612准种的多样性，将野毒株SD0612原始毒的细胞培养物提取RNA并扩增和克隆其高度易变的ORF5基因，选取所有阳性克隆子测序并以DNAStar软件对序列进行分析，以ORF5序...
- 赵鹏马诚太董宣崔治中
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因克隆免疫系统
- IFA和ELISA检测J亚群禽白血病病毒的比较研究被引量：6
- 2014年
- 为比较3种禽白血病病毒（ALV）抗原检测ELISA试剂盒的特异性和灵敏度,将J亚群禽白血病病毒（ALV-J）传染性克隆rNX0101株以病毒原液（9×103 TCID50）、10倍病毒稀释液（9×102 TCID50）、100倍病毒稀释液（90 TCID50）接种培养于6孔板的DF1细胞,每孔均提前放入灭菌的细胞爬片,于接种后第1～6天每天取上清用3种ELISA试剂盒（A、B、C）检测ALV p27抗原,同时在接种后的第3天和第6天取出细胞爬片进行间接免疫荧光法（IFA）检测.结果表明,IFA方法对高、中、低剂量接种3d后均可检出ALV-J的感染,而ELISA试剂盒中只有A试剂盒在高剂量接种时才能检出,试剂盒B和试剂盒C最早要在第4天才可捡出;中、低剂量接种,3种试剂盒在第4～5天才能检出;第6天时,由于病毒的明显复制,无论IFA方法还是3种ELISA试剂盒都可检出ALV-J的感染.本研究结果为正确选择商品化禽白血病抗原检测试剂盒提供了借鉴.
- 董宣刘娟李德庆崔治中赵鹏
- 关键词：J亚群禽白血病病毒间接免疫荧光酶联免疫吸附试验
- 稳定表达施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的BHK-21细胞系的建立被引量：3
- 2015年
- 为建立稳定表达施马伦贝格病毒(SBV)核衣壳(N)蛋白的BHK-21细胞系,本研究在SBV-N蛋白编码基因的C端加入6个组氨酸(6×His)标签,将其克隆至慢病毒载体p LV-EGFP-C中构建重组慢病毒质粒p LV-EGFP-SBV-N,将其与慢病毒包装质粒p Helper1.0和p Helper2.0共转染HEK-293T细胞,包装表达SBV-N蛋白的慢病毒。将重组慢病毒在聚凝胺(Polybrene)的介导下感染BHK-21细胞,采用嘌呤霉素(Puromycin)法和细胞有限稀释法筛选出一株稳定表达SBV-N蛋白的BHK-21细胞系,命名为BHK-21-EGFP-SBV-N。间接免疫荧光试验进一步表明,该细胞系能够被SBV抗体阳性动物血清和特异性单克隆抗体2C8识别。稳定表达SBV-N蛋白的BHK-21细胞系的建立,为SBV血清学检测方法的建立提供材料。
- 张永宁吴绍强宋姗姗董宣林祥梅
- 关键词：施马伦贝格病毒核衣壳蛋白慢病毒载体
- 黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的影响试验
- 2010年
- 随着我国养殖业的不断发展，研究能增强机体免疫力、提高抗病力的新型微生物添加剂势在必行，该研究针对黄芪多糖微生物制剂对鸡的免疫增强作用进行了研究试验，取得了令人满意的结果，为推广利用黄芪微生态作为饲料添加剂提供了理论依据和技术支撑。
- 李德庆石峰赵占召鹿双双董宣牛钟相
- 关键词：微生态制剂黄芪多糖免疫功能微生物添加剂免疫增强作用机体免疫力
- 不同检测方法在禽白血病病毒测定中的应用及其灵敏度比较
- 为比较不同禽白血病病毒(ALV)抗原ELISA检测试剂盒和胶体金试纸条的灵敏度，我们将A、B、J三种不同ALV亚群分别以50 TCID50、 100 TCID50、 500 TCID50三种剂量接种培养于DF1细胞上，接...
- 孟凡峰崔贺范建华徐步时建蓬董宣常爽崔治中赵鹏
- 关键词：禽白血病病毒斑点杂交间接免疫荧光酶联免疫吸附试验TCID50
- 免疫抑制性病毒感染肉鸡群继发大肠杆菌的分离鉴定及多样性研究被引量：3
- 2014年
- 旨在了解免疫抑制性病毒感染肉鸡群后继发大肠杆菌的血清型及其耐药性的多样性。用J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒感染或共感染1日龄商品代肉鸡,对两次重复试验中发生细菌感染而导致死亡的鸡进行麦康凯培养基分离培养。每个病变脏器各随机挑取5个红色菌落或(及)白色菌落,并分别进行生化试验、血清型鉴定和药敏试验。结果从58只呈现肝周炎或(和)心包炎的死亡鸡中分离到典型的红色菌落445个,白色菌落71个。经生化试验鉴定,516个菌落均为大肠杆菌。O抗原血清型鉴定结果表明,这些菌落分别属于12个不同的血清型。对12种常用抗生素的药敏试验(药敏片法和试管稀释法)结果表明,共感染能在较短时间内引起典型的大肠杆菌病,并引起较高的死亡率。从516个大肠杆菌中挑选的17组菌落(来自同一病鸡、同一脏器且经鉴定为同一血清型的5个菌落定义为一组菌落)的试管药敏试验的比较表明,第3组的5个菌落对黏杆菌素的最小抑菌质量浓度的范围为0.05~51.20 mg·mL-1;第17组菌落对丁胺卡那的最小抑菌质量浓度从0.05到51.20mg·mL-1,均相差1 000倍。同一群鸡肝周炎和心包炎的大肠杆菌分离株的高度多样性,证明这是在病毒感染诱发免疫抑制状态下发生条件性致病菌的继发性细菌感染。鸡群中大肠杆菌在耐药性上的多样性,是鸡群在不合理应用抗生素的条件下体内大肠杆菌迅速产生耐药菌株的遗传基础。
- 琚思迪董宣赵鹏李阳孟凡峰孙鹏董向磊高崧崔治中
- 关键词：免疫抑制性病毒肉鸡大肠杆菌血清型
- 黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的影响
- (目的)为了探明黄芪多糖微生态制剂对鸡免疫功能的作用效果。(方法)在鸡饮水中分别添加不同浓度黄芪多糖微生态制剂，并设黄芪多糖和空白对照，自由饮水，测定各组鸡HI抗体效价和免疫器官指数。(结果)经统计试验结果证明，24日龄...
- 李德庆石峰赵占召鹿双双董宣牛钟相
- 关键词：黄芪多糖微生态制剂抗体效价免疫器官指数
- 种蛋中内源性禽白血病病毒的检测和鉴定被引量：19
- 2014年
- 某祖代种鸡群临床表现正常,在开产后用商品化禽白血病抗体检测试剂盒(ALV-Ab)和禽白血病抗原检测试剂盒检测发现血清抗体阳性率及蛋清抗原阳性率均显著高于正常水平,但对种蛋中抗原阳性的23只种鸡分别接种DF1细胞和SPF鸡胚来源的成纤维细胞(CEF)后均未分离到病毒。为探明该鸡群是否存在内源性禽白血病病毒(ALV—E)以及能否干扰商品化抗体检测试剂盒的结果判定,将23只种鸡所产种蛋分别孵化后逐一制备成CEF培养,盲传3代后检测到其中1只鸡的细胞培养上清抗原检测为阳性。从该细胞培养上清液提取RNA,RTPCR扩增其gp85基因,序列分析证明该检出病毒为E亚群ALV。将该E亚群ALV接种SPF鸡胚来源CEF后又可检出p27抗原,显示该内源性ALV具备传染性。同时,对该病毒gp85基因进行了原核表达,表达产物免疫鸡后部分鸡血清经ALV—Ab抗体检测试剂盒检测为阳性。本研究分离到1株对CEF具备传染性的内源性ALV-E,并证明其诱导产生的抗体能够干扰对外源性ALV的鉴别诊断,提示在进行临床类似情况的判定时要结合鸡群实际表现做全面分析。
- 徐海鹏孟凡峰董宣赵鹏崔治中
- 关键词：GP85基因P27抗原
