胡卫东
- 作品数:9 被引量:21H指数:3
- 供职机构:四川理工学院化学与制药工程学院更多>>
- 发文基金:四川省教育厅重点项目国家大学生创新性实验计划新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一株兔源耐药性肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定被引量:11
- 2013年
- 本试验旨在对从患呼吸道感染和腹泻的仔兔血液中分离的1株疑似病原菌进行鉴定。采用分离培养、镜检、生化检测、荚膜染色、16S rDNA序列测序、药敏试验和动物体内感染等方法,对该疑似菌进行了分析。结果显示,该疑似菌呈杆状、含有丰富的荚膜多糖,其16S rDNA序列与肺炎克雷伯氏菌标准菌株序列相似性达到99%,且对链霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和氯霉素均表现出不同程度的显著抗性。腹腔注射该菌(109CFU/mL),仔兔全部死亡;而口腔灌喂,仔兔有较强的耐受性(无死亡)。结果表明,从患病仔兔血液中分离到1株肺炎克雷伯氏菌且具有致病性。
- 张智李再新曾光菊李丙超胡卫东赵志平刘章琴陈欲云
- 关键词:肺炎克雷伯氏菌耐药性
- DNA疫苗及其在卵黄抗体制备中的应用
- 2014年
- DNA疫苗技术由于其独特的作用和优势,现已成为最有发展潜力的新兴免疫技术之一。将DNA疫苗技术和卵黄抗体技术联合起来,可获得效价更高、亲和性更好和成本更低的卵黄抗体。就DNA疫苗和卵黄抗体的各自特点以及DNA疫苗技术在卵黄抗体制备中的应用优势进行综述。
- 李再新李丙超胡卫东唐文才文倩张智
- 关键词:DNA疫苗卵黄抗体免疫
- 人A组轮状病毒结构蛋白VP7原核表达及其卵黄抗体效价的研究被引量:2
- 2014年
- 为获得人A组轮状病毒重组结构蛋白VP7及其高效价的卵黄抗体,使用PCR技术扩增VP7 DNA片段并将其克隆到原核表达载体pET28a上形成重组质粒pET28a-VP7。将重组质粒转化基因工程菌E.Coil BL21(DE3),用0.5 mM IPTG诱导VP7重组蛋白的表达。通过包涵体纯化和蛋白复性后,将VP7重组蛋白与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡,收集鸡蛋。用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体IgY。进一步应用SDS-PAGE、ELISA和点杂交技术,分析该卵黄抗体的纯度、效价和特异性。结果表明在基因工程菌E.coli BL21(DE3)中能够实现VP7重组抗原的表达,将重组抗原VP7免疫产蛋鸡,提取纯化得到滴度为1:100 000的抗VP7卵黄抗体,且特异性的识别野生型A组轮状病毒。
- 李丙超李再新胡卫东黄永生唐文才张智
- 关键词:VP7原核表达
- 一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法
- 本发明公开了一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法,通过基因工程菌在体外大量表达和纯化兔病毒性出血症病毒RHDV衣壳蛋白VP60抗原,将纯化的VP60抗原与适宜的佐剂制备成疫苗免疫产蛋鸡,并从鸡蛋中提取高效价...
- 张智李再新谢万如胡卫东李天有邹晓阳李丙超陆仕海
- 文献传递
- 传统发酵香肠中菌种的分子生物学鉴定被引量:4
- 2015年
- 为探究发酵香肠的微生物菌群的作用机理,利用传统的微生物学平板稀释分离法,分离出发酵香肠中酵母、大肠杆菌和乳酸菌等微生物,并提取其DNA,PCR扩增16S rDNA、ITS后测序,将测序结果与NCBI基因库中序列进行比对,MegAlign软件进行序列分析并构建系统发育树,结果表明,发酵香肠中富含德氏酵母、YSY1-6腐生葡萄球菌、德式乳酸乳杆菌亚种。
- 李丙超胡卫东唐文才李兴玲钟强李再新张智
- 关键词:发酵香肠ITS同源性比较
- 一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法
- 本发明公开了一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法,通过基因工程菌在体外大量表达和纯化兔病毒性出血症病毒RHDV衣壳蛋白VP60抗原,将纯化的VP60抗原与适宜的佐剂制备成疫苗免疫产蛋鸡,并从鸡蛋中提取高效价...
- 张智李再新谢万如胡卫东李天有邹晓阳李丙超陆仕海
- 文献传递
- 人A组轮状病毒结构蛋白VP8的卵黄抗体制备与活性检测被引量:4
- 2014年
- 目的:制备人A组轮状病毒VP4结构蛋白N端的刺突蛋白VP8卵黄抗体IgY,并检测其生物学特征。方法以轮状病毒VP4基因的DNA为模板,采用PCR方法扩增VP8 DNA序列。将VP8片段克隆到原核表达载体 pET28a 上,形成重组质粒pET28a-VP8,转化基因工程菌E.coli BL21,完成VP8重组蛋白的诱导表达。 VP8包涵体蛋白经纯化和蛋白复性后,与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡,收集鸡蛋,用水稀释-超滤法纯化卵黄抗体IgY。通过SDS-PAGE、Western blot、ELISA和点杂交等技术方法,分析该抗体的生物学特性,包括抗体的纯度、滴度、特异性和稳定性。结果 VP8在基因工程菌E.coli BL21中主要以包涵体蛋白形式表达,相对分子质量约为35×10^3,在pH8.0的Tris-HCI缓冲体系其复性效率可达90%。将重组抗原VP8免疫产蛋鸡,获得VP8抗原特异性的卵黄抗体IgY,抗体滴度达到1∶100000,且特异性地识别野生型A组轮状病毒。结论本研究采用基因工程和免疫技术制备的VP8卵黄抗体IgY,具有较高的抗体滴度和特异性,为婴幼儿轮状病毒感染性腹泻的诊断和防治提供了新的思路。
- 张智胡卫东邹晓阳李天有李丙超李再新
- 关键词:卵黄抗体
- 一种抗人A组轮状病毒的鸡卵黄抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开一种抗人A组轮状病毒鸡卵黄抗体及其制备方法和应用,该方法包括:体外表达纯化人A组轮状病毒结构蛋白VP7或VP8,并免疫产蛋鸡,收集鸡蛋,分离纯化出VP7或VP8卵黄抗体。制备得到的鸡卵黄抗体可冻干制备成用作预防...
- 李再新张智胡卫东李丙超李天有邹晓阳唐文才
- 文献传递