羊东晔
- 作品数:25 被引量:58H指数:4
- 供职机构:香港大学深圳医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肝细胞靶向基因药物分子构形和表达效率的研究
- 2002年
- 目的 :用调整肝细胞靶向基因药物分子构形的方法 ,以期提高外源转入基因在目标细胞的表达效率。方法 :加入特定辅料分子至基因药物中 ,用电镜观察其液态分子构形。在转入体外培养的人肝癌细胞株BEL 74 0 2中后 ,用ELISA方法检测基因表达产物IFN r的浓度 ,筛选最佳表达外源基因药物分子的构形。结果 :肝细胞靶向基因药物在辅料分子不同浓度中构形发生改变 ,显现出絮状、球形、串蛛状及杆状与类染色体形的混合体。筛选出了具最佳表达的杆形和类染色体混合体分子构形。该构形的药物分子在体外培养细胞中的表达显著高于脂质体转运载体携带的同一基因 ,且不需要抑制溶酶的活性。结论 :用于基因治疗的药物分子构形对其转入靶细胞的表达效率有重要的影响。杆状和类染色体复合分子构形 。
- 卢放根刘小伟欧阳春晖羊东晔吴晓英
- 关键词:基因治疗肝细胞肝脏靶向基因
- 体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法被引量:2
- 2014年
- 背景:肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干/祖细胞,但其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性。目的:探索大鼠肝卵圆细胞体外长期培养的方法。方法:构建2-乙酰胺基芴/部分肝切除肝再生大鼠模型,通过酶消化和Percoll梯度离心分离纯化大鼠异质卵圆细胞并进行免疫染色鉴定,用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外长期培养,后撤去表皮生长因子、白血病抑制因子,通过形态学的观察和分子标志物的检测判断其能否保持干/祖细胞活性。结果与结论:采用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外培养卵圆细胞4个月后,大鼠异质卵圆细胞仍能表达肝细胞标志物ALB、胆管上皮细胞标志物CK-19,经不含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养液继续培养后,卵圆细胞胎肝标志AFP表达量迅速下降。该研究结果表明大鼠肝卵圆细胞在表皮生长因子、白血病抑制因子等培养条件下可长期增殖并保持干细胞活性。
- 尹寿新周震马美雪杨景波羊东晔
- 关键词:肝细胞表皮生长因子白血病抑制因子卵圆细胞国家自然科学基金
- 5种常见肿瘤标记物在霉菌性胃溃疡和溃疡型胃腺癌中的对比研究被引量:5
- 2013年
- 目的比较5种胃癌相关的肿瘤标记物PGC、PTEN、HER-2、CEA及CA72-4在霉菌性胃溃疡和溃疡型胃腺癌组织中的差异表达,探讨其临床病理鉴别诊断价值。方法收集中南大学湘雅二医院病理科2002年3月-2009年12月保存完好的石蜡标本,包括胃镜下胃黏膜活检以及术后胃标本,且已经病理确诊的霉菌性胃溃疡31例,溃疡型胃腺癌35例,以及正常胃黏膜标本10例,采用Elivision免疫组化方法检测PGC、PTEN、HER-2、CEA及CA72-4在各个胃组织标本中的表达。结果在溃疡型胃腺癌中,PGC和PTEN的表达阳性率均低于其在霉菌性胃溃疡中的表达,而HER-2、CEA及CA72-4的表达阳性率则均高于其在霉菌性胃溃疡中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);与正常胃黏膜组织相比,霉菌性胃溃疡组织中PGC和PTEN的表达阳性率有所下降,而HER-2、CEA及CA72-4的表达阳性率稍有升高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论检测PGC、PTEN、HER-2、CEA及CA72-4 5种肿瘤标记物,特别是联合检测对鉴别诊断霉菌性胃溃疡和溃疡型胃腺癌具有较大临床价值。
- 杨景波李彩虹羊东晔梁洁玲周震马美雪
- 关键词:肿瘤标记物霉菌性胃溃疡
- 小肠克罗恩病合并弥漫性肺泡出血一例被引量:1
- 2014年
- 患者男,44岁,因反复腹痛10余年,再发加重1d于2013年12月21日就诊.患者2004年因右下腹持续性绞痛入当地医院,结肠镜检查示回盲部肿块,行部分回肠及升结肠切除术.术后病理提示小肠管壁及黏膜炎性改变并广泛脓肿形成,肠黏膜面多发性溃疡,符合CD改变.术后患者症状缓解.2004年3月至2012年7月脐周隐痛持续存在,间断加重,每次腹痛加重时即自行服用柳氮磺吡啶(具体剂量不详),腹痛可缓解,缓解后维持一段时间,之后自行停药(每次总疗程1个月左右),并间断予中药调理.
- 吴双羊东晔李陈婕
- 关键词:小肠克罗恩病弥漫性肺泡出血反复腹痛症状缓解回盲部肿块结肠镜检查
- 人白细胞介素12双亚基共表达载体的构建及表达被引量:3
- 2004年
- 目的 :为了基因治疗研究的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基基因共表达质粒 [(P(+) IL 12 ) ],比较它与单个亚基基因表达质粒 [P(+) P4 0 和P(- ) P35]1∶1共同转染肝癌细胞HepG2后 4 8小时表达结果。方法 :分别克隆hIL 12P4 0 、P35亚基cDNA全长至pcDNA3 1(± )中构建P(+) P4 0 和P(- ) P35,再将两者串联克隆至pcDNA3 1(+)中构建P(+) IL 12。脂质体转染 3种质粒至肝癌细胞HepG2 ,4 8小时后抽取细胞总RNA做半定量RT PCR ,同时取细胞上清做ELISA及Western杂交 ,结果进行比较分析。结果 :两种转染方式均可以表达hIL 12蛋白质且半定量RT PCR显示较未转染组hIL 12的mRNA水平均增加 ;转染后 4 8小时P(+) IL 12组细胞培养上清hIL 12表达量较 [P(+) P4 0 和P(- ) P35]按 1∶1比例共同转染组显著增高(P <0 0 5 )。结论 :人白细胞介素 12双亚基基因串联共表达质粒 [P(+) IL 12 ]能够转入HepG2并表达hIL 12蛋白质 ,并且转染后 4 8小时hIL 12表达量较单个亚基基因表达质粒 [P(+) P4 0 、P(- ) P35]1∶1共转染者显著高。
- 羊东晔卢放根汤熙翔赵水平吴小平刘小伟
- 关键词:人白细胞介素12HEPG2细胞
- GPC3通过活化Wnt/β-catenin通路促进HepG2生长被引量:5
- 2015年
- 目的分析GPC3是否活化Wnt/β-catenin信号通路从而促进肝癌细胞HepG2的生长,以期为进一步基于GPC3的肝癌基因免疫治疗提供依据。方法用携带GPC3基因的质粒转染肝癌细胞HepG2,运用Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路中关键分子和靶基因的表达,判定Wnt/β-catenin信号通路的活化情况,并采用MTT实验对比转染前后HepG2的增殖率。结果GPC3转染过表达的HepG2较未转染组其Wnt/β-catenin信号通路关键分子β-catenin和靶基因c-myc、cyclin D1的表达明显上升,且转染后24、48、72 h MTT实验表明转染组HepG2细胞增殖较未转染组加快(P<0.05)。结论 GPC3促进肝癌细胞HepG2的生长很可能通过过度活化Wnt/β-catenin信号通路实现。
- 尹寿新马美雪周震羊东晔
- 关键词:GPC3HEPG2WNT信号通路Β-CATENIN
- 一种抗肝癌的DNA疫苗
- 本发明公开了一种抗肝癌的DNA疫苗。本发明的抗肝癌的DNA疫苗是基于原发性肝癌高表达的癌胚抗原GPC3具有锚定细胞膜的特性,以机体自身的肿瘤性抗原甲胎蛋白AFP中一个抗原决定簇hAFP542-550作为免疫原构建DNA疫...
- 羊东晔黄来强蓝方
- 文献传递
- 一种抗肝癌的DNA疫苗
- 本发明公开了一种抗肝癌的DNA疫苗。本发明的抗肝癌的DNA疫苗是基于原发性肝癌高表达的癌胚抗原GPC3具有锚定细胞膜的特性,以机体自身的肿瘤性抗原甲胎蛋白AFP中一个抗原决定簇hAFP542-550作为免疫原构建DNA疫...
- 羊东晔黄来强蓝方
- 文献传递
- HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达被引量:3
- 2008年
- 目的构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础。方法常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况。结果三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因。结论成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础。
- 杨峥嵘马原栋万骏郑义王海峰赵洁彭扬洋罗海波羊东晔黄来强
- 关键词:人乳头瘤病毒腺病毒
- 原发性旁路性高胆红素血症1例被引量:4
- 2002年
- 欧阳春晖卢放根吴小平李俊霞刘小伟羊东晔
- 关键词:脾切除病例报告