罗欣
- 作品数：49 被引量：114H指数：5
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- TLR7激活对Hela细胞增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Toll样受体7(TLR7)在Hela细胞中的表达以及激活TLR7后对Hela细胞增殖和MAPKs-ERK1/2及PI3K-AKT两条信号通路的ERK和AKT磷酸化水平的影响。方法采用Real-time PCR分析TLR7在Hela细胞中的表达;使用不同浓度的TLR7激动剂Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞,采用MTS比色法分析其对Hela细胞增殖的影响;Western blot分析Gardiquimod对Hela细胞ERK1/2及AKT蛋白磷酸化水平的影响。结果 TLR7在Hela细胞中呈组成性弱表达;TLR7激动剂Gardiquimod可促进Hela细胞的增殖,且呈时间及剂量依赖性;Gardiquimod激活TLR7后可以显著增加Hela细胞中ERK1/2和AKT的蛋白磷酸化水平。结论 TLR7激动剂Gardiquimod能够活化MAPK-ERK1/2和PI3K-AKT信号通路的ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平,并促进Hela细胞的体外增殖。
- 李磊程丰伟王芳金锐罗欣张胜权
- 关键词：TOLL样受体7HELA细胞细胞增殖信号通路
- 生物化学与分子生物学教学虚拟实验平台建设的思考被引量：4
- 2014年
- 计算机支持的协作学习(CSCL)是近年来教育技术领域研究的热点之一,信息及多媒体技术深刻影响了高等医学教育,虚拟实验教学将很大程度地填补了传统实验教学的不足,对于深入理解生物化学与分子生物学实验的微观发生机制,扩展学生对该学科的深入了解,对多学科领域知识的融会贯通,更重要的是,对生物化学与分子生物学实验教学的发展起到重要的推动作用。
- 冯婷婷秦宜德许功林罗欣顾芳黄海良
- 关键词：生物化学与分子生物学实验教学虚拟实验室
- 人白细胞介素29在cos-7细胞中表达及其体外抗乙型肝炎病毒作用被引量：2
- 2007年
- 目的：克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在cos-7细胞中表达，并初步探讨表达产物体外抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：分离外周血单个核细胞；VSV感染后，提取总RNA，通过一步法RT-PCR获得IL-29全长cDNA。DNA测序正确后，将IL-29 cDNA的编码框序列构建到真核表达载体psectagB/His-myc中。氨苄青霉素板筛选及PCR鉴定，挑出阳性克隆进行扩增、转染cos-7细胞并经潮霉素及有限稀释法筛选稳定表达克隆。SDS-PAGE、Western blot鉴定，Ni2＋亲和层析分离纯化得到主带分子量为33000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白。体外以HepG2.2.2.15为靶细胞观察rhIL-29对HepG2.2.2.15培养上清液中HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg）影响。结果：成功获得人IL-29全长cDNA并在cos-7细胞中稳定表达。SDS-PAGE、Western blot分析显示表达的rhIL-29融合蛋白为几个蛋白质区带，分子量在20000-33000之间纯化的rhIL-29融合蛋白，主带在33000附近。rhIL-29融合蛋白具有抑制HBsAg及HBeAg分泌作用并且具有剂量效应，抑制率分别达85%。结论：获得具有生物活性的rhIL-29融合蛋白。rhIL-29融合蛋白在体外具有抑制HepG2.2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg作用。
- 陈兵罗欣鲁云霞徐从贞张胜权
- 关键词：克隆抗乙肝病毒活性
- IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响
- 2013年
- 目的探讨白介素-10(IL-10)对皮肤角质形成(HaCaT)细胞中血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响及其可能机制。方法培养HaCaT细胞,用不同剂量IL-10刺激后,通过荧光定量PCR(Real-time PCR)在mRNA水平上分析IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响;通过Western blot法分析IL-10对HaCaT细胞信号通路:丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)的影响,并通过MAPKs-ERK1/2特异性阻断剂PD98059及PI3K-AKT特异性阻断剂LY294002阻断这两个信号途径,进而分析IL-10影响HaCaT细胞中VEGF-A表达的可能机制。结果 Real-time PCR分析结果显示IL-10能抑制HaCaT细胞中VEGF-A转录水平的表达;Western blot法结果显示:IL-10能够增加ERK1/2和AKT的磷酸化水平。阻断剂研究显示IL-10抑制VEGF-A转录水平表达的作用不依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径。结论 IL-10抑制HaCaT细胞中VEGF-A转录水平的表达,不依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥作用。
- 贾波罗欣李磊程丰伟王芳黄海良杨小萍张胜权
- 关键词：HACAT细胞IL-10信号途径
- 鼻息肉组织唾液酸和丙二醛含量的变化
- 1996年
- 测定27例鼻息肉脂质结合唾液酸和丙二醛含量分别为6.4662±1.2156μmol·g^(-1)Pr和0.6342±0.0274μmol·g^(-1)Pr.与正常鼻粘膜对照具有显著性意义.提示:自由基生成及其导致的脂质过氧化作用,膜结构和功能改变,可能在鼻息肉形成与发展中具有重要地位.
- 江世英杨克林邱建新罗欣洪明光
- 关键词：鼻息肉唾液酸类丙二醛
- LSS基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定被引量：2
- 2021年
- 探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因敲除鼠的繁育和基因型分析。将引进杂合子小鼠进行饲养并繁育,提取其基因组DNA,利用PCR反应扩增目的基因片段,鉴定出小鼠的基因型;Western blot分析并比较LSS基因敲除杂合子小鼠和野生型小鼠的肝脏、皮肤组织中LSS蛋白的表达情况。成功的繁育出LSS基因敲除小鼠,使用PCR鉴定其子代小鼠包括野生型(LSS^(+/+),Wt)、杂合子(LSS^(+/-)),未出现纯合敲除小鼠;Western blot结果表明:相较于野生型小鼠,LSS基因敲除杂合子小鼠在肝组织和皮肤组织中表达LSS蛋白量少;杂合子敲除鼠的生存能力比野生型小鼠弱。获得LSS基因敲除小鼠,PCR鉴定小鼠基因型具有简单、稳定的优点。
- 李名聪孙晓梅李昱昊周宏罗欣张胜权
- 关键词：基因敲除小鼠基因型鉴定
- 新药坎地沙坦酯的核磁共振谱分析
- 2003年
- 目的 用核磁共振方法鉴定新药坎地沙坦酯的结构。方法 应用HMQC、HMBC等二维核磁共振技术进行测定。结果 对新药坎地沙坦酯的1H NMR和13C NMR谱信号进行了全归属。
- 秦宜德方敏徐从贞罗欣徐奎
- 关键词：新药坎地沙坦酯核磁共振谱
- 初乳中酶活性及生物活性因子含量的动态变化及其意义被引量：15
- 2004年
- 目的 探讨人初乳中超氧化物歧化酶 (SOD)、淀粉酶 (AM)和碱性磷酸酶 (ALP)活性及表皮生长因子 (EGF)和胰岛素样生长因子 1(IGF 1)含量的变化规律及其临床意义。方法 分别采用改良邻苯三酚自氧化法、碘 淀粉比色法和磷酸苯二钠法 ,测定 2 0例产妇的 118份初乳 (泌乳第 1～ 7天 )中SOD、AM和ALP活性 ;采用放射免疫法测定EGF和IGF 1含量。结果 初乳中SOD活性在开始泌乳的前 1～ 4天由 (18 7± 2 2 )kU/L上升到 (2 2 5± 2 9)kU/L ,然后下降 ,第 7天为 (11 2± 2 1)kU/L ,前 4天活性显著高于第 7天 (P <0 0 5或P <0 0 1)。AM和ALP活性在开始泌乳的 1周内逐渐下降 ,分别由 (15 5± 12 )kU/L和 (10 5± 17)kU/L ,下降到 (17± 4 )kU/L和 (5 4± 9)kU/L ,前 4天的AM活性显著高于第 7天 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,第 1天的ALP活性显著高于第 7天 (P <0 0 5 )。初乳中EGF和IGF 1含量在开始泌乳的前 4天快速下降 ,分别由 (10 5± 11) μg/L和(2 5 9± 2 7) μg/L下降到 (40± 5 )μg/L和 (5 6± 1 3) μg/L ,在泌乳的第 4～ 7天变化较小。泌乳前 3天 ,EGF含量显著高于第 7天 (P<0 0 5或P <0 0 1) ,第 1天的IGF 1含量显著高于第 7天 (P <0 0 1)。结论初乳中具有高活性的SOD、AM和ALP 。
- 秦宜德罗欣黄登莲徐从贞
- 关键词：初乳超氧化物歧化酶淀粉酶类碱性磷酸酶
- PDX1真核表达载体的构建及其对PANC-1细胞PI3K/AKT信号途径的影响
- 2017年
- 目的构建胰腺十二指肠同源框蛋白1(PDX1)基因真核表达载体并转染至PANC-1细胞,观察其对PI3K/AKT信号通路的影响。方法从Hela细胞中提取总RNA,逆转后PCR扩增PDX1编码区片段,然后将PDX1的CDS插入PCMV6-Entry质粒构建PCMV6-Entry-PDX1表达重组体。重组体转染至PANC-1细胞中通过G418筛选出稳定表达细胞株。Western blot分析PDX1蛋白水平表达及p-AKT水平变化。结果 PDX1基因成功在PANC-1中表达。利用Western blot检测验证获得了稳定的PDX1过表达细胞株。Western blot结果显示:过表达PDX1的细胞株AKT表达含量与正常细胞及对照细胞没有区别而p-AKT水平降低。结论PDX1基因过表达能够降低PANC-1细胞的p-AKT水平。
- 栾康金锐刘莉罗欣张胜权
- 关键词：基因重组PI3K/AKT信号通路PANC-1
- 人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用被引量：1
- 2005年
- 目的 :构建人细胞因子IL 2 1表达载体并在Hela细胞中稳定表达 ,分析rhIL 2 1体外促T细胞增殖作用。方法 :以已构建的pMD IL2 1为模板 ,PCR扩增成熟IL 2 1cDNA的编码框序列并构建到真核表达载体pCDNA3 1/hismyc B中。挑出阳性克隆进行扩增 ,脂质体转染入Hela细胞中并以G4 18加压筛选。有限稀释法、RT PCR及Westernblot筛选出稳定表达的细胞株。培养上清液经金属离子螯合层析分离纯化后 ,SDS PAGE、Westernblot鉴定。MTT法测定其与抗CD3单克隆抗体共刺激T细胞增殖活性。结果 :SDS PAGE、Westernblot显示Mr为 180 0 0的带有myc重组人IL 2 1融合蛋白 (rhIL 2 1) ;并成功地获得hIL 2 1稳定表达细胞株。rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。
- 张胜权陈兵罗欣徐从贞鲁云霞
- 关键词：白细胞介素21克隆表达T细胞增殖
