纪晋文
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白包涵体的纯化及活性鉴定被引量：4
- 2005年
- 目的 :建立一种有效的纯化幽门螺杆菌热休克蛋白 A亚单位 -尿素酶 B亚单位 (Hsp A- Ure B)融合蛋白包涵体的方法。方法 :基因工程重组大肠杆菌 BL2 1(p ET- HU2 7)诱导表达的 Hsp A- Ure B融合蛋白包涵体经洗涤、变性、复性 ,在 A¨ KTA FPL C上运用 Hi Trap Chelating HP分离纯化 ,用 SDS- PAGE和 Bradford法检测目的蛋白的纯度和含量 ,用 Western blotting对纯化后蛋白进行免疫学活性鉴定。结果 :纯化后 Hsp A- Ure B融合蛋白的纯度 >90 % ,含量达 0 .2 5 g· L- 1 ,并可以被 Hsp A- U re B融合蛋白免疫小鼠血清识别。结论 :成功地建立了从包涵体中纯化高纯度 Hsp A- U re B融合蛋白的方法。
- 纪晋文代丽萍段广才郗园林
- 关键词：螺杆菌热休克蛋白质类尿素酶重组融合蛋白质类包涵体
- 幽门螺杆菌疫苗候选抗原的筛选及其免疫效果研究
- 段广才代丽萍张荣光郗园林范清堂代敏纪晋文夏晓燕
- 所属科学技术领域：公共卫生与预防医学；生物工程主要内容、特点：幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，简称Hp)感染在世界范围内广泛流行，已证实Hp感染是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃MALT淋巴瘤的重要病因。...
- 关键词：
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗疫苗研制免疫效果胃炎消化性溃疡
- 幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白可溶性表达产物的纯化及活性鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 :建立一种有效的纯化幽门螺杆菌HspA UreB融合蛋白可溶性表达产物的方法。方法 :基因工程重组大肠杆菌BL2 1(pET HU2 7)诱导表达产物 ,超声破碎后收集上清 ,上清经盐析初步纯化后 ,在 ¨AKTAFPLC上运用HiTrapChelatingHP分离纯化 ,用SDS PAGE和Bradford法检测目的蛋白的纯度和含量 ,用West ern blot对纯化后蛋白进行免疫学活性鉴定。结果 :纯化后HspA UreB融合蛋白的纯度 >90 % ,含量达 0 15mg/ml,并可以被免疫小鼠血清识别。结论 :建立了从BL2 1(pET HU2 7)可溶性表达产物中纯化高纯度HspA UreB融合蛋白的方法 ,为进一步的动物实验研究奠定了基础。
- 纪晋文代丽萍段广才郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌纯化可溶性表达ET动物实验研究活性鉴定
- 幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的诱导表达与活性鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:优化幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白诱导表达的条件,以提高目的蛋白的产量。方法:表达幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的重组基因工程菌BL21(pET-HU27)在不同温度下(25℃、37℃)以不同的IPTG浓度(0.3、1.0和2.0 mmol.L-1)和不同的培养基(LB、SOC)中分别诱导表达不同时间,表达产物经超声破碎后,进行融合蛋白可溶性分析,并用Western blotting对表达产物进行鉴定。结果:SDS-PAGE结果显示,37℃时,LB培养基中,0.3 mmol.L-1的IPTG浓度诱导5 h时,融合蛋白的含量最高为21.51%;25℃,SOC培养基中,1.0 mmol.L-1的IPTG浓度诱导8 h时,可溶性HspA-UreB融合蛋白含量最高为34.58%,表达产物能够被免疫小鼠血清识别。结论:实现了幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白在原核细胞中的高效表达,并具有良好的免疫活性,为进一步开发应用以该融合蛋白为抗原的幽门螺杆菌疫苗打下了坚实的基础。
- 纪晋文代丽萍段广才郗园林
- 关键词：螺杆菌基因表达包涵体
- 幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白纯化及其免疫效果的研究
- 本研究对本研究室构建的HspA-UreB融合蛋白原核表达系统BL21(pET-HU27)的诱导表达条件进行进一步探索，对HspA-UreB融合蛋白原核表达系统表达的可溶性蛋白和包涵体进行分离、纯化和鉴定，并应用纯化产物联...
- 纪晋文
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗包涵体免疫效果融合蛋白
- 文献传递
