窦洁
- 作品数：89 被引量：244H指数：8
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 一种具有抗流感病毒作用的黄芩苷注射剂
- 本发明涉及一种具有抗流感病毒作用的黄芩苷注射剂，由黄芩苷、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、注射用水，经高温高压灭菌制成，其中黄芩苷按所需体积和设定浓度称取，磷酸二氢钠0.60克，磷酸氢二钠2.16克，添加注射用水100毫升，氢氧...
- 周长林窦洁丁玥郁洁王慧郭青龙尤启冬
- 文献传递
- 脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达被引量：1
- 2006年
- 目的:构建共表达载体pETDuet-aroB-qutB,在大肠杆菌中同时表达奎尼酸合成途径中的关键酶脱氢奎尼酸合成酶(DHQase)和奎尼酸脱氢酶(QDHase)。方法:分别以大肠杆菌(B21)和构巢曲霉(ATCC 24919)基因组为模板,采用PCR法扩增得到脱氢奎尼酸合成酶基因aroB和奎尼酸脱氢酶基因qutB,克隆接入pETDuet-1载体中,转化入大肠杆菌BL21,在宿主菌中共表达脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶。结果:获得了包含pETDuet-aroB-qutB共表达载体的重组大肠杆菌。IPTG(0.5 mmol/L)诱导重组菌4 h后,脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶表达量分别占菌体总蛋白的18.7%和30.5%,酶活力为70.4 U/L、40.2 U/L,分别提高了14.1倍和22.3倍。结论:实现了脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的高效共表达,为基因工程法生物合成奎尼酸奠定了基础。
- 周长林杨毅刚窦洁
- 关键词：奎尼酸生物合成
- 嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌协同抑制痢疾杆菌的活性研究被引量：7
- 2015年
- 以嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌为研究对象,用琼脂扩散法检测其纯培养和共培养后的发酵液对福氏痢疾杆菌的体外抑菌活性。结果表明,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌共培养液对福氏痢疾杆菌具有良好的协同抑制作用,其共培养液抑菌作用较嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌纯培养,其抑菌作用分别增强了17.2%和22.4%。同时,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌存在共生关系,共培养后生物量可达4.27 g/L(干重),较嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌纯培养生物量分别提高6.0%和30.6%,且共生可使产酸增多,从而达到协同抑菌效果。对福氏痢疾杆菌黏附人结肠腺癌Caco-2细胞的研究表明,嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌能协同抑制福氏痢疾杆菌对Caco-2细胞的黏附,Caco-2与混合益生菌、嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌共孵育的组别,其福氏痢疾杆菌的相对黏附率分别降低了84.2%,81.2%和75.8%,相对应的Caco-2细胞的活力分别提高了22.9%,12.5%和11.5%。本研究首次发现两种益生菌嗜酸乳杆菌和酪酸梭菌具有共生关系,并且在体外能够协同抑制肠道致病菌福氏痢疾杆菌的生长和黏附,对于由福氏痢疾杆菌引起的细菌性痢疾治疗具有临床应用前景。
- 王艺宙方凯王慧窦洁周长林
- 关键词：嗜酸乳杆菌酪酸梭菌痢疾杆菌复合益生菌
- 海胆黄多糖SEP纯化工艺的研究被引量：3
- 2013年
- 为了规模化制备具有抗肿瘤活性的海胆黄多糖(SEP),简化纯化步骤和提高多糖收率,在原有分离纯化方法的基础上,结合超滤技术,对SEP的纯化工艺进行了优化。采用木瓜蛋白酶-Sevag联用法,以超滤法替代减压浓缩和透析去除杂质,优化酶法提取条件和超滤参数。研究结果表明:用0.6%的木瓜蛋白酶在pH 6.5、60℃酶解5 h,可去除18.3%的蛋白质,3次Sevag法后,蛋白质去除率达71.7%,多糖回收率80.1%。采用截留相对分子质量100 k的膜超滤浓缩,压力0.05 MPa,原液质量浓度1.2 mg/mL,浓缩3倍时的多糖截留率为84.0%。各步骤多糖累计回收率为67.3%,该纯化工艺可获得高产率高纯度的SEP,为规模化制备SEP奠定了基础。
- 郁洁张玲玲王嫣蓉王艺宙柯梦云窦洁王慧奚涛周长林
- 关键词：纯化木瓜蛋白酶超滤
- 甘油对毕赤酵母高密度发酵表达重组水蛭素Ⅱ的影响被引量：8
- 2006年
- 目的:考察甘油对毕赤酵母生长和重组水蛭素Ⅱ表达的影响。方法:在摇瓶和10L发酵罐中用含有不同浓度甘油的培养基培养毕赤酵母,测定毕赤酵母的生长和重组水蛭素Ⅱ的表达。结果:发酵培养基中初始甘油浓度为5 g/L时,毕赤酵母生长速度明显加快;补料过程中甘油浓度大于70 g/L时,毕赤酵母生长受到抑制。与不加甘油相比较,诱导表达期维持培养基中甘油浓度在5 g/L以下,重组水蛭素表达可提前4 h,诱导30 h其活性达13 000 ATU/mL,比仅用甲醇诱导时效价提高了7.7%。结论:降低初始培养基中甘油浓度有利于毕赤酵母生长,补料过程中培养基甘油浓度应维持在抑制毕赤酵母生长的浓度之下,诱导阶段培养基中少量的甘油有利于水蛭素的表达。
- 宋留君周长林窦洁林健
- 关键词：重组水蛭素毕赤酵母甘油
- 单克隆抗体类药物体外生物学活性检测方法概述被引量：1
- 2020年
- 单克隆抗体因其具有特异性、高效性以及低毒副作用的特点而在恶性肿瘤、自身免疫疾病以及器官移植排斥的治疗上占据了非常重要的地位,成为众多药企的研发目标。单克隆抗体类药物的体外生物学活性检测是其质量控制中至关重要的一环。单克隆抗体类药物的生物学活性检测方法主要有细胞增殖抑制法、细胞毒性法、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性法(ADCC)、补体依赖的细胞毒性法(CDC)和报告基因法等几类方法。文章根据单克隆抗体类药物的作用特点分别对靶向肿瘤细胞单抗类药物、靶向细胞因子单抗类药物、靶向免疫细胞或者免疫检查点相关分子单抗类药物及抗体偶联药物和双特异性抗体等其他单抗类药物的体外生物学活性的检测方法进行综述。
- 黄秋歌于红阳王红丽徐明波窦洁杨仲璡
- 关键词：生物学活性检测细胞增殖抑制荧光素酶报告基因
- 一种调节人结肠肿瘤细胞的表达载体、制备方法及其应用
- 本发明调节人结肠肿瘤细胞的表达载体、制备方法及其应用。一种调节人结肠肿瘤细胞的表达载体，它是由C10orf10基因和Pcdna3.1‑HisA载体构建而成。制备方法为(1)获得cDNA(2)将上述cDNA连接到TOPO ...
- 窦洁周长林毛珂彭光勇王洲李承琴
- 文献传递
- 复方野马追胶囊的体内抑菌抗病毒实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的观察复方野马追胶囊的体内抑菌及抗副流感病毒作用。方法采用体内实验,观察复方野马追胶囊对链球菌感染小鼠的保护作用;以副流感病毒感染小鼠,观察实验中小鼠生存时间、死亡率及肺指数和肺组织病变程度。结果复方野马追胶囊体内有明显的抑菌和抗副流感病毒作用,能明显降低链球菌感染小鼠的死亡率,明显延长副流感病毒感染小鼠的生存时间,显著降低肺指数,减轻肺组织病变程度。结论复方野马追胶囊体内有明显的抑菌和抗副流感病毒作用。
- 彭蕴茹窦洁黄芳钱大玮
- 关键词：链球菌副流感病毒
- 全局转录工程法构建产S-腺苷蛋氨酸重组酿酒酵母的研究被引量：5
- 2012年
- 利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶II中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体。并用醋酸锂转化的方法转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2846中,研究了SPT15和TAF25的定向进化对酿酒酵母产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)的影响。经过筛选分别获得了重组酿酒酵母菌株spt15-81和taf25-36。对其发酵性状分别进行了初步研究,在28℃、200 r/min条件下,250 mL摇瓶(50 mL O-medium)发酵48 h时,SAM的产量分别比对照菌株提高了2.0倍和1.8倍。由此表明。
- 曹喜涛陈凯李扬窦洁王慧周长林奚涛
- 关键词：酿酒酵母易错PCRS-腺苷甲硫氨酸
- 复方野马追胶囊抗流感病毒实验研究被引量：10
- 2008年
- 目的:观察复方野马追胶囊(轮叶泽兰)的抗流感病毒作用。方法:采用体外抗病毒实验,观察复方野马追胶囊对流感病毒的作用;采用体内实验,以流感病毒感染小鼠,观察小鼠生存时间、死亡率及肺指数和肺组织病变程度。结果:复方野马追胶囊体外对流感病毒有一定抑制作用,体内则能明显延长感染小鼠的生存时间,显著降低肺指数,减轻肺组织病变程度。结论:复方野马追胶囊体内体外均有明显的抗流感病毒作用。
- 彭蕴茹窦洁黄芳钱大玮
- 关键词：流感病毒小鼠
