程纪华
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
- 供职机构：北京医科大学人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞肝癌中bcl-10基因突变的研究
- 2000年
- 目的 研究bcl 10基因在早期和进展期人肝细胞肝癌中的突变频率。方法 提取 46例新鲜肝癌及癌周组织的基因组DNA ,应用聚合酶链式反应 单链构像多态性分析 (PCR SSCP)方法 ,研究bcl 10基因 3个外显子的突变情况 ,并对每个外显子随机抽取 6例突变样本进行测序分析。同时分析bcl 10基因突变与血清甲胎蛋白 (AFP)水平以及肝癌大小的关系。结果 46例肝细胞肝癌中共检测到外显子 1突变 2 6例 ,占 5 6 .5 % ,6例测序样本中有 5例表现为第 5 744位C→G颠换突变 ;外显子 2突变 2 5例 ,占 5 4.3 % ,6例测序样本中有 4例表现为第 11311位T碱基缺失突变 ;外显子 3突变 2 1例 ,占 45 .7% ,6例测序样本皆表现为第 14116位C→T转换突变。统计分析表明bcl 10突变和血清AFP以及肝癌大小无相关性。结论 bcl 10基因在肝癌中突变频率较高。
- 程纪华冷希圣蔡胜利彭吉润曹广王申五杜如昱
- 关键词：肝细胞癌基因突变突变频率
- 甲胎蛋白启动子调控表达p53基因的肝癌细胞靶向性基因治疗载体的研究被引量：12
- 2000年
- 目的 利用含有人甲胎蛋白启动子的腺相关病毒载体 ,构建能在人肝癌细胞株中特异表达目的基因的质粒。方法 通过设计含有特定酶切位点的引物 ,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白启动子 (AFPpromoter)序列并克隆到含有绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因的质粒pTR UF5上 ,构建成含报告基因的重组腺相关病毒质粒rAAV AFP GFP ;再通过平端连接的方法 ,构建成含p5 3基因的质粒rAAV AFP 5 3。通过用rAAV AFP GFP转染表达AFP的HepG2 细胞株和不表达AFP的 2 93细胞株 ,以检测AFP启动子的功能。rAAV AFP 5 3转染HLE肝癌细胞株后 ,用流式细胞分析检测对细胞周期的影响。结果 rAAV AFP GFP和经测序、酶切鉴定证实为含有人AFP启动子的质粒。细胞转染表明rAAV AFP GFP能特异地在AFP阳性细胞中高效表达目的基因 (质粒转染效率为 36 .5 % ) ;rAAV AFP 5 3使HLE的凋亡率达到 73 .88%。结论 成功构建了以腺相关病毒为载体、受人AFP启动子调控表达人野生型p5 3基因和报告基因的质粒。
- 程纪华冷希圣彭吉润何湘君蔡胜利张佑彬王申五杜如昱
- 关键词：腺相关病毒甲胎蛋白启动子基因治疗肝癌
